《仪器分析》第三章 高效液相色谱分析（High Performance Liquid Chromatography）

第三章高液相色谱法 High Performance Liquid chromatography, HPLC

第三章 高效液相色谱法 High Performance Liquid Chromatography，HPLC

液相色谱仪(1) Waters Lc 2690

液相色谱仪（1）

液相色谱仪(2) 岛津高效液相色谱仪LC-10A系列 延=

液相色谱仪（2）

液相色谱仪(3) HP1050系列液相色谱仪

液相色谱仪（3）

高压液相色谱对于挥发性低、热稳定性差、分子量大 的高分子化合物以及离子型化合物的分离尤为有利。 如氨基酸、多肽、蛋白质、生物碱、核酸、甾体、类 脂、维生素、抗菌素等均可进行分离分析定量。生物 材料和生物体液是目前所知道撮复杂的化学物质的混 合物,所含成分在一万种以上,其分子量从18到几百 万,而且其中有意义的化学成分的含量又往往很低, 因此,必须要有一种高分辨、高灵敏度的分离鉴定手 段,气相色谱和高压液相色谱具有以上特点,它们可 通过对生物样品和生物体液样品的有关成分的提取 分离、分析定量,进行对疾病的早期快速诊断的研究, 病理病因的研究,以及药物在体内代谢的研究.…等。 它们将以高选择性、高分离效能、高灵敏度、高速度 等特点,为您提供准确可靠的研究指标。尤其是高灵 敏度方面,它们可以检测出10-910-12克的痕量物质, 能达到这个检测量的分析方法并不多见。因此,气相 色谱和高压液相色谱是从事生物科学和医学研究的 个很有用的手段

⚫ 高压液相色谱对于挥发性低、热稳定性差、分子量大 的高分子化合物以及离子型化合物的分离尤为有利。 如氨基酸、多肽、蛋白质、生物碱、核酸、甾体、类 脂、维生素、抗菌素等均可进行分离分析定量。生物 材料和生物体液是目前所知道撮复杂的化学物质的混 合物，所含成分在一万种以上，其分子量从18到几百 万，而且其中有意义的化学成分的含量又往往很低， 因此，必须要有一种高分辨、高灵敏度的分离鉴定手 段，气相色谱和高压液相色谱具有以上特点，它们可 通过对生物样品和生物体液样品的有关成分的提取、 分离、分析定量，进行对疾病的早期快速诊断的研究， 病理病因的研究，以及药物在体内代谢的研究……等。 它们将以高选择性、高分离效能、高灵敏度、高速度 等特点，为您提供准确可靠的研究指标。尤其是高灵 敏度方面，它们可以检测出10-910-12克的痕量物质， 能达到这个检测量的分析方法并不多见。因此，气相 色谱和高压液相色谱是从事生物科学和医学研究的一 个很有用的手段

第一节高效液相色谱法概述 什么是高效液相色谱(HPLc)? gh HPLC(High Performance Liquid Chromatography)一高效液相色谱法 份是一种区别于经典液相色谱,基于仪器 方法的高效能分离手段: 高性能色谱柱,高精度输液泵,高灵敏度检测器 “广用各个领 无论在技术上理论上还是在应用上仍 处于发展阶段 .ITS ALL IMPORTANTWaters

第一节 高效液相色谱法概述

HPLC的仪器配置及流程 色谱泵及控制器 数据处理及控制 乳色谱柱检测器 WHes 4B6 进样器 4 II'SALL IMPORTANT Waters

色谱分离的机理 Stationary Phase 分离是 9 A 〉 Mobile phase 物理的过程。 Injection Interaction Amount Elution 2固定相( Stationary Phase) 流动相( Mobile phase Time -> 样品(溶解于流动相中的溶质) ITS ALL IMPORTANT/Waters

HPLC的图形结果 色谱图( Chr omatogram 色谱图:色谱柱流出物通过检测器时所产生的响应信号对时间 的曲线图,其纵坐标为信号强度,横坐标为保留时间. 色谱峰 10c 峰宽 基线 峰高 0 cn on 19000 2 时间(分) IT'S ALL IMPORTANT Waters

理论基础:速率理论 B h=A+-+ cu A为涡流扩散项 B/u分子扩散项 Cu项即传质阻力项

一、理论基础：速率理论 Cu u B H = A + + A为涡流扩散项 B/u分子扩散项 Cu项即传质阻力项