《微生物学》课程教学课件（实验指导）实验三 培养基的制备和平板划线分离细菌（PPT讲稿）

实验三培养基的制备和平板划线分离细菌

实验三 培养基的制备和平板划线分离细 菌

实验目的·1、了解培养基的概念、种类和用途，明确培养基的配制原理。2、学习掌握培养基配制的一般方法和步骤。·3、掌握平板划线法的方法步骤

实验目的 ⚫ 1、了解培养基的概念、种类和用途，明 确培养基的配制原理。 ⚫ 2、学习掌握培养基配制的一般方法和步 骤。 ⚫ 3、掌握平板划线法的方法步骤

实验原理人工配制的、适合微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质。自然界中微生物种类繁多，营养类型多样，加之实验和研究目的不同，所以培养基的种类很多。不同种类的培养基一般都应含有微生物生长所需的碳源、氮源、能源、无机盐、生长因子和水六大营养要素，且各成分比例应合适

实验原理 ⚫ 人工配制的、适合微生物生长繁殖或积累代谢产物的 营养基质。 ⚫ 自然界中微生物种类繁多，营养类型多样，加之实验 和研究目的不同，所以培养基的种类很多。 ⚫ 不同种类的培养基一般都应含有微生物生长所需的碳 源、氮源、能源、无机盐、生长因子和水六大营养要 素，且各成分比例应合适

实验材料和器血药品：牛肉膏、蛋白陈、氯化钠、琼脂、蔗糖；可溶性淀粉、K,HPO4、KNO3、MgSO47H,O、FeSO47HO等。高压蒸汽灭菌锅、超净工作台。斜面培养物或者菌悬液其它：天平、牛角匙、电炉、1MHCI、1MNaOH、pH试纸、刻度糖瓷杯、量筒、漏斗、漏斗架、玻棒、玻璃珠、三角瓶、带塞子的无菌试管、无棉塞的空试管、培养血、吸管、各种包装纸、防水纸、标签等

实验材料和器皿 • 药品:牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、琼脂、蔗糖；可溶性淀 粉、K2HPO4、KNO3、MgSO4 •7H2O、FeSO4 •7H2O等。 • 高压蒸汽灭菌锅、超净工作台。斜面培养物或者菌悬液 • 其它:天平、牛角匙、电炉、1MHCl、1MNaOH、pH试 纸、刻度搪瓷杯、量筒、漏斗、漏斗架、玻棒、玻璃珠、 三角瓶、带塞子的无菌试管、无棉塞的空试管、培养皿、 吸管、各种包装纸、防水纸、标签等

常用培养基细菌培养：牛肉膏蛋白陈培养基放线菌培养：高氏1号培养基霉菌培养：马铃薯蔗糖培养基

常用培养基 ⚫ 细菌培养：牛肉膏蛋白胨培养基 ⚫ 放线菌培养：高氏1号培养基 ⚫ 霉菌培养：马铃薯蔗糖培养基

牛肉膏蛋白陈培养基配方牛肉膏3g蛋白陈10g5gNaCI琼脂15-20g水1000mlpH7.4-7.6

牛肉膏蛋白胨培养基配方 ⚫ 牛肉膏 3g ⚫ 蛋白胨 10g ⚫ NaCl 5g ⚫ 琼脂 15-20g ⚫ 水 1000ml ⚫ pH 7.4-7.6

培养基配置的操作步骤称量及溶化调pH2.（过滤）加琼脂、溶化、定容、4、分装、加塞、包扎5、灭菌6、倒平板、摆斜面

培养基配置的操作步骤 ⚫ 1、称量及溶化 ⚫ 2、调pH ⚫ 3、加琼脂、溶化、定容、（过滤） ⚫ 4、分装、加塞、包扎 ⚫ 5、灭菌 ⚫ 6、倒平板、摆斜面

注意事项牛肉膏的称取：用玻璃棒蘸取适量牛肉膏，抹于称量纸上，勿取过量，不足时，再蘸取少量，逐步添加：然后将牛肉膏连同称量纸放入水中稍等片刻牛肉膏即从称量纸上脱落，用玻璃棒将纸捞出即可

⚫ 牛肉膏的称取：用玻璃棒蘸取适量牛肉膏，抹 于称量纸上，勿取过量，不足时，再蘸取少量， 逐步添加；然后将牛肉膏连同称量纸放入水中， 稍等片刻牛肉膏即从称量纸上脱落，用玻璃棒 将纸捞出即可。 注意事项

蛋白陈很易吸湿，在称取时动作要迅速称药品时严防药品混杂，一把牛交匙用于一种药品，或称取一种药品后，洗净，擦干，再称取另一药品。瓶盖也不要盖错。在琼脂溶化过程中，应控制火力，以免培养基因沸腾而溢出容器。同时，需不断搅拌，以防琼脂糊底烧焦

⚫ 蛋白胨很易吸湿，在称取时动作要迅速。 ⚫ 称药品时严防药品混杂，一把牛交匙用于一种药 品，或称取一种药品后，洗净，擦干，再称取另 一药品。瓶盖也不要盖错。 ⚫ 在琼脂溶化过程中，应控制火力，以免培养基因 沸腾而溢出容器。同时，需不断搅拌，以防琼脂 糊底烧焦

分装过程中，注意不要使培养基沾在管（瓶）口上以免污染棉塞而引起污染分装量根据试管大小和实际需要而定，固体培养基装量约为管高的1/5，液体培养基的装量约为管高的1/4，三角瓶的装量不超过瓶体的1/2

⚫ 分装过程中，注意不要使培养基沾在管（瓶） 口上以免污染棉塞而引起污染。 ⚫ 分装量根据试管大小和实际需要而定，固体培 养基装量约为管高的1/5，液体培养基的装量约 为管高的1/4，三角瓶的装量不超过瓶体的1/2