内蒙古农业大学：《家畜繁殖学》课程教学课件（PPT讲稿）第六章 人工受精 Artificial Insemination（2/2）

三、稀释液的种类和配置 （一）稀释液的种类 1、现用稀释液 奶类和等渗糖类为主。 2、常温保存稀释液 用于常温保存精液，pH较低。 3、低温保存稀释液 用于低温保存精液，含有卵黄和奶类等抗冷休克 物质。 4、冷冻保存稀释液 用于冷冻保存精液，含抗冻物质如甘油、DMSO

三、稀释液的种类和配置 （一）稀释液的种类 1、现用稀释液 奶类和等渗糖类为主。 2、常温保存稀释液 用于常温保存精液，pH较低。 3、低温保存稀释液 用于低温保存精液，含有卵黄和奶类等抗冷休克 物质。 4、冷冻保存稀释液 用于冷冻保存精液，含抗冻物质如甘油、DMSO

（二）稀释液的配制 1、各种成分的准备 （1）蒸馏水：现制、灭菌。 （2）化学药品：成分要纯净，溶解过滤后消毒，高 温变性药品应用细菌滤膜过滤。 （3）奶类：新鲜，不含其它物质。于（90~95℃）水 浴10min，去除奶皮。 （4）卵黄：取自新鲜鸡蛋，用前对蛋壳消毒。 （5）抗生素、酶类、激素、维生素等：于稀释液消 毒冷却后加入。 2、配制稀释液注意事项（书P155） （1）所用物品认真清、消毒、干燥； （2）如配制液状稀释液，最好现用现配，不要长时 间保存（预混除外）

（二）稀释液的配制 1、各种成分的准备 （1）蒸馏水：现制、灭菌。 （2）化学药品：成分要纯净，溶解过滤后消毒，高 温变性药品应用细菌滤膜过滤。 （3）奶类：新鲜，不含其它物质。于（90~95℃）水 浴10min，去除奶皮。 （4）卵黄：取自新鲜鸡蛋，用前对蛋壳消毒。 （5）抗生素、酶类、激素、维生素等：于稀释液消 毒冷却后加入。 2、配制稀释液注意事项（书P155） （1）所用物品认真清、消毒、干燥； （2）如配制液状稀释液，最好现用现配，不要长时 间保存（预混除外）

四、精液稀释方法与稀释倍数 （一）精液稀释方法 1、新采集的精液于30℃稀释，防止精子冷休克； 2、采精后及时检查、稀释，时间长后精子容易 死亡； 3、稀释液与精液温度应该一致； 4、稀释时，将稀释液沿容器壁缓慢倒入精液， 高倍稀释时分次进行； 5、稀释后立即镜检活力，以确保操作正确

四、精液稀释方法与稀释倍数 （一）精液稀释方法 1、新采集的精液于30℃稀释，防止精子冷休克； 2、采精后及时检查、稀释，时间长后精子容易 死亡； 3、稀释液与精液温度应该一致； 4、稀释时，将稀释液沿容器壁缓慢倒入精液， 高倍稀释时分次进行； 5、稀释后立即镜检活力，以确保操作正确

（二）稀释倍数 稀释倍数 = 稀释液的量/精液量

（二）稀释倍数 稀释倍数 = 稀释液的量/精液量

如何精确计算一份精液的稀释倍数？ 首先要考虑以下几个因素： 猪 1、该份精液总量 250ml 2、精子密度 2亿/ml 3、有效精子数（保存后使用前精子活率） 0.6 4、每次输入有效精子数 10亿 5、每次输精量 20ml 该份精液的有效精子数： 250ml×2×0.6=300亿 则分成的份数： 300亿/10亿=30份 则稀释后总量： 30×20=600ml 则稀释倍数： 600-250/250=1.4

如何精确计算一份精液的稀释倍数？ 首先要考虑以下几个因素： 猪 1、该份精液总量 250ml 2、精子密度 2亿/ml 3、有效精子数（保存后使用前精子活率） 0.6 4、每次输入有效精子数 10亿 5、每次输精量 20ml 该份精液的有效精子数： 250ml×2×0.6=300亿 则分成的份数： 300亿/10亿=30份 则稀释后总量： 30×20=600ml 则稀释倍数： 600-250/250=1.4

现行的精液保存方式有三种： 常温保存（15-25 ℃） 低温保存（0-5 ℃） 冷冻保存（-79 ℃或-196 ℃） 第五节 精液的保存 Section 5 Semen Storage 液态保存 固态保存

现行的精液保存方式有三种： 常温保存（15-25 ℃） 低温保存（0-5 ℃） 冷冻保存（-79 ℃或-196 ℃） 第五节 精液的保存 Section 5 Semen Storage 液态保存 固态保存

一、常温保存（15-25 ℃），变温保存 1、原理：是利用一定范围的酸性环境， 抑制精子的活动，使精子保持可逆的静止状态而不丧 失受精能力。 2、稀释液： （1）能量物：如葡萄糖 ； （2）缓冲体系：如柠檬酸钠、碳酸氢钠 ； （3）抗生素：如青、链霉素等。 3、方法：隔水降温。 天热时，尽可能降低保存温度如放入水井、水缸， 天冷时，放在有暖气的室内。 适合猪精液保存 （15～17℃）

一、常温保存（15-25 ℃），变温保存 1、原理：是利用一定范围的酸性环境， 抑制精子的活动，使精子保持可逆的静止状态而不丧 失受精能力。 2、稀释液： （1）能量物：如葡萄糖 ； （2）缓冲体系：如柠檬酸钠、碳酸氢钠 ； （3）抗生素：如青、链霉素等。 3、方法：隔水降温。 天热时，尽可能降低保存温度如放入水井、水缸， 天冷时，放在有暖气的室内。 适合猪精液保存 （15～17℃）

二、低温保存（0-5 ℃） 1、原理：利用较低的温度来减弱精子的活动和 代谢，从而延长精子的生命。 2、低温保存稀释液： 除室温保存液应具有的 成分外（不充CO2），在牛用的稀释液还需 用加卵黄或牛奶。 为何要添加？

二、低温保存（0-5 ℃） 1、原理：利用较低的温度来减弱精子的活动和 代谢，从而延长精子的生命。 2、低温保存稀释液： 除室温保存液应具有的 成分外（不充CO2），在牛用的稀释液还需 用加卵黄或牛奶。 为何要添加？

3、保存前的处理 （1）稀释分装：低温保存的精液通常用玻璃或塑料瓶 分装，瓶内尽量不留空气，然后封口; （2）降温处理：通常按0.2℃/min降至保存温度; （3）保存方法：牛羊精液置于0~5 ℃，猪精液须特殊 改造的冰箱或用泡沫盒内放冰块，精液用一块泡沫 垫在上面；（看后图） （4）低温保存精液的利用：低温保存的精液在使用前 应该用水浴升温至30℃。 4、液态精液的运输 （1）包装好、做好标记（种类、品种、畜号、时间）； （2）运输中避光、防震并保持温度

3、保存前的处理 （1）稀释分装：低温保存的精液通常用玻璃或塑料瓶 分装，瓶内尽量不留空气，然后封口; （2）降温处理：通常按0.2℃/min降至保存温度; （3）保存方法：牛羊精液置于0~5 ℃，猪精液须特殊 改造的冰箱或用泡沫盒内放冰块，精液用一块泡沫 垫在上面；（看后图） （4）低温保存精液的利用：低温保存的精液在使用前 应该用水浴升温至30℃。 4、液态精液的运输 （1）包装好、做好标记（种类、品种、畜号、时间）； （2）运输中避光、防震并保持温度

泡沫盒保存猪精液图 泡沫盖 泡沫盒 精液 n a 泡沫垫 冰水 传中)，大☏昌