四川农业大学：《植物组织与细胞培养》课程教学资源（PPT课件）实验一 培养基的配置与灭菌（主讲人：杨鸿玉）

实验一培养基的配置、分装及灭菌

实验一 培养基的配置、分装及灭菌

实验一培养基的配置与灭黄 植物组织培养成功与否，培养基制备和选择至关重要！ 离体培养条件下，不同种植物的组 织对培养有不同的要求，甚至同一 种植物不同部位的组织对营养的要 求也不相同，只有满足了它们各自 的特殊要求，它们才能很好地生长。 因此，没有一种培养基能够适合一 切类型的植物组织或器官，在建立 一项新的培养系统时，首先必须找 到一合适的培养基，植物组织培养 才能成功

实验一 培养基的配置与灭菌 植物组织培养成功与否，培养基制备和选择至关重要！ 离体培养条件下，不同种植物的组 织对培养有不同的要求，甚至同一 种植物不同部位的组织对营养的要 求也不相同，只有满足了它们各自 的特殊要求，它们才能很好地生长。 因此，没有一种培养基能够适合一 切类型的植物组织或器官，在建立 一项新的培养系统时，首先必须找 到一合适的培养基，植物组织培养 才能成功

实验一 培养基的配置与灸菌 基本培养基 完全培养基 初代培养基 培养基种类 继代培养基 诱导培养基 增殖和生根培养基 固体培养基 液体培养基

实验一 培养基的配置与灭菌 培 养 基 种 类 完全培养基 初代培养基 继代培养基 固体培养基 液体培养基 基本培养基 诱导培养基 增殖和生根培养基

实验一 培养基的配置与灸菌 实验目的 口掌握固体培养基的基本配置方法和程序 口熟练掌握MS培养基的配方和组成 口掌握培养基灭菌的方法及操作要求

一、实验目的 实验一 培养基的配置与灭菌  掌握固体培养基的基本配置方法和程序  熟练掌握MS培养基的配方和组成  掌握培养基灭菌的方法及操作要求

实脸一培养基的配置与灭菌 MS培养基：1962年由Murashige和Skoog为烟草 细胞而设计的。 ◆特点是无机盐和离子浓度较高（钾盐、铁盐、硝酸盐含量均较 高)，特别是硝酸盐含量较其他培养基高，离子平衡性好，具 有较强的缓冲能力，是一种较稳定的平衡溶液。 ◆微量元素种类齐全，浓度高；培养基营养丰富，在一般的培养 中，无需额外加入氨基酸、酪蛋白水解物、酵母提取物及椰子 汁等有机附加成分。 ◆养分的数量和比例较合适，可满足植物的营养和生理需要。 ◆能加速愈伤组织和培养物生长。广泛用于植物的器官、花药、 细胞和原生质体培养效果良好。有些培养基是由它演变而来

实验一 培养基的配置与灭菌 MS培养基：1962年由Murashige和Skoog为烟草 细胞而设计的。 ◆特点是无机盐和离子浓度较高（钾盐、铁盐、硝酸盐含量均较 高），特别是硝酸盐含量较其他培养基高，离子平衡性好，具 有较强的缓冲能力,是一种较稳定的平衡溶液。 ◆微量元素种类齐全，浓度高；培养基营养丰富，在一般的培养 中，无需额外加入氨基酸、酪蛋白水解物、酵母提取物及椰子 汁等有机附加成分。 ◆养分的数量和比例较合适，可满足植物的营养和生理需要。 ◆能加速愈伤组织和培养物生长。广泛用于植物的器官、花药、 细胞和原生质体培养效果良好。有些培养基是由它演变而来

实验一培养基的配置与灭菌 MS固体培养基可用来诱导愈伤组织，或用于胚、 茎段、茎尖及花药培养，MS液体培养基用于细 胞悬浮培养，都能获得明显成功

实验一 培养基的配置与灭菌 MS固体培养基可用来诱导愈伤组织，或用于胚、 茎段、茎尖及花药培养，MS液体培养基用于细 胞悬浮培养,都能获得明显成功

实验一培养基的配置与灭首 二、 实验原理 培养基为离体培养材料的正常生长提供所需的全 部营养成分及为离体材料的分化提供最适宜的生长调 节物质。 口培养基的成分：碳水化合物、无机盐、维生素、有机附 加物、生长调节物质、水分。 ▣培养基pH值的调节：5.8-6.2(6-7) 口培养基灭菌处理：培养基采用湿热灭菌法

二、实验原理 实验一 培养基的配置与灭菌 培养基为离体培养材料的正常生长提供所需的全 部营养成分及为离体材料的分化提供最适宜的生长调 节物质。  培养基的成分：碳水化合物、无机盐、维生素、有机附 加物、生长调节物质、水分。  培养基pH值的调节：5.8-6.2(6-7)  培养基灭菌处理：培养基采用湿热灭菌法

实验一培养基的配置与灭菌 ◆蒸馏水 ◆大量元素母液 ◆微量元素母液 ◆铁盐母液 ◆钙盐母液 ◆有机母液 ◆植物生长调节物质 ◆琼脂 ◆蔗糖

实验一 培养基的配置与灭菌 ◆ 蒸馏水 ◆ 大量元素母液 ◆ 微量元素母液 ◆ 铁盐母液 ◆ 钙盐母液 ◆ 有机母液 ◆ 植物生长调节物质 ◆ 琼脂 ◆ 蔗糖

实脸一 培养基的配置与灸菌 培养基大部分是水，配制培养基时一般用三级水（水中不含或 少含某些离子)，保证培养基中成分完全人为控制。 水的作用 1.水是细胞原生质的主要组成成分； 2.水是重要代谢过程的反应物质和产物： 3.细胞分裂及伸长都需要水分； 4.水是植物物质吸收和运输及生化反应的良好溶剂； 5.水能使植物保持固有姿态，有利于光合作用和传粉； 6.调节植物体周围的温、湿度，维持植物体温稳定。 总之，水是植物原生质体的组成成分，是一切代谢过程的 介质和溶液，是生命活动过程中不可缺少的物质

实验一 培养基的配置与灭菌 培养基大部分是水，配制培养基时一般用三级水(水中不含或 少含某些离子)，保证培养基中成分完全人为控制。 水的作用 1.水是细胞原生质的主要组成成分； 2.水是重要代谢过程的反应物质和产物； 3.细胞分裂及伸长都需要水分； 4.水是植物物质吸收和运输及生化反应的良好溶剂； 5.水能使植物保持固有姿态，有利于光合作用和传粉； 6.调节植物体周围的温、湿度，维持植物体温稳定。 总之，水是植物原生质体的组成成分，是一切代谢过程的 介质和溶液，是生命活动过程中不可缺少的物质

实验一培养基的配置与灸菌 0 大量元素：N,P,K,Ca,Mg,S等元素。 以盐的形式加在培养基中，它们对植物细胞和组 织的生长都是必不可少的，需要量大于0.5mmol/儿。 其中特别说明的是：培养基中无机氮的供应可以有 两种形式，一种是硝酸盐；另一种是铵盐。 微量元素：Fe,Mn,Zn,B,Cu,Co,I等。 对于植物细胞和组织的生长需要量小于0.5mmol/L, 但必不可少，其中Fe较为关键，以螯合形式提供， 可使用FeS04.7H20和Na2-EDTA进行制备

实验一 培养基的配置与灭菌 大量元素：N，P，K，Ca，Mg，S等元素。 以盐的形式加在培养基中，它们对植物细胞和组 织的生长都是必不可少的，需要量大于0.5mmol/L。 其中特别说明的是：培养基中无机氮的供应可以有 两种形式，一种是硝酸盐；另一种是铵盐。 微量元素：Fe，Mn，Zn，B，Cu，Co，I等。 对于植物细胞和组织的生长需要量小于0.5mmol/L， 但必不可少，其中Fe较为关键，以螯合形式提供， 可使用FeSO4.7H2O和Na2-EDTA进行制备