石河子大学：《仪器分析》课程PPT教学课件（药学专业）色谱分析法概论

第十八章色谱分析法概论 历史沿革 基本分类 基本理论 色谱描述

第十八章 色谱分析法概论 历史沿革 基本分类 基本理论 色谱描述

色谱法早在1906年由俄国植物学家茨维 特分离植物色素时采用。 他在研究植物叶的色素成分时，将植物 叶子的萃取物倒入填有碳酸钙的直立玻璃管 内，然后加入石油醚使其自由流下，结果色 素中各组分互相分离形成各种不同颜色的谱 带。这种方法因此得名为色谱法。以后此法 逐渐应用于无色物质的分离

色谱法早在1906年由俄国植物学家茨维 特分离植物色素时采用。 他在研究植物叶的色素成分时，将植物 叶子的萃取物倒入填有碳酸钙的直立玻璃管 内，然后加入石油醚使其自由流下，结果色 素中各组分互相分离形成各种不同颜色的谱 带。这种方法因此得名为色谱法。以后此法 逐渐应用于无色物质的分离

色谱柱：装有固定相的管子（玻璃管或不 锈钢管) 。 固定相：将填入玻璃管或不锈钢管内静止 不动的一相（固体或液体) 流动相：自下而上运动的一相（一般是气 体或液体)

• 色谱柱：装有固定相的管子（玻璃管或不 锈钢管） • 固定相：将填入玻璃管或不锈钢管内静止 不动的一相（固体或液体） • 流动相：自下而上运动的一相（一般是气 体或液体）

30~40年代：薄层色谱法、纸色谱法 50年代：气相色谱法(GC)的出现，奠定 了现代色谱法的基础 60年代：推出了气相色谱一质谱(GC-MS)联 用技术，有效地弥补了色谱法定性 特征差的弱点。 70年代： 高效液相色谱法(HPLC) 80年代：超临界流体色谱法(SFC) 80年代末：高效毛细管电泳法(PCE)

30~40年代：薄层色谱法、纸色谱法 50年代：气相色谱法（GC）的出现，奠定 了现代色谱法的基础 60年代：推出了气相色谱—质谱(GC-MS)联 用技术，有效地弥补了色谱法定性 特征差的弱点。 70年代：高效液相色谱法(HPLC) 80年代：超临界流体色谱法（SFC） 80年代末：高效毛细管电泳法（HPCE）

二·基本分类 从不同角度，可将色谱法分类如下： 1.按两相状态分类 气体为流动相的色谱称为气相色谱(GC) 根据固定相是固体吸附剂还是固定液 (附着在惰性载体上的一薄层有机化合物 液体)，又可分为气固色谱(GSC)和气 液色谱(GLC)

从不同角度，可将色谱法分类如下： 1. 按两相状态分类 气体为流动相的色谱称为气相色谱（GC） 根据固定相是固体吸附剂还是固定液 （附着在惰性载体上的一薄层有机化合物 液体），又可分为气固色谱（GSC）和气 液色谱（GLC）

·液体为流动相的色谱称液相色谱(LC) 同理液相色谱亦可分为液固色谱 (LSC)和液液色谱(LLC)。超临界流 体为流动相的色谱为超临界流体色谱 (SFC)。 ·随着色谱工作的发展，通过化学反应将固 定液键合到载体表面，这种化学键合固定 相的色谱又称化学键合相色谱(CBPC)

• 液体为流动相的色谱称液相色谱（LC） 同理液相色谱亦可分为液固色谱 （LSC）和液液色谱（LLC）。超临界流 体为流动相的色谱为超临界流体色谱 （SFC）。 • 随着色谱工作的发展，通过化学反应将固 定液键合到载体表面，这种化学键合固定 相的色谱又称化学键合相色谱（CBPC）

2.按分离机理分类 。 利用组分在吸附剂（固定相）上的吸附 能力强弱不同而得以分离的方法，称为 吸附色谱法。 ·利用组分在固定液（固定相）中溶解度 不同而达到分离的方法称为分配色谱法。 ·利用组分在离子交换剂（固定相)上的 亲和力大小不同而达到分离的方法，称 为离子交换色谱法

2. 按分离机理分类 • 利用组分在吸附剂（固定相）上的吸附 能力强弱不同而得以分离的方法，称为 吸附色谱法。 • 利用组分在固定液（固定相）中溶解度 不同而达到分离的方法称为分配色谱法。 • 利用组分在离子交换剂（固定相）上的 亲和力大小不同而达到分离的方法，称 为离子交换色谱法

·利用大小不同的分子在多孔固定相中的 选择渗透而达到分离的方法，称为凝胶 色谱法或尺寸排阻色谱法。 ·利用不同组分与固定相（固定化分子） 的高专属性亲和力进行分离的技术称为 亲和色谱法，常用于蛋白质的分离

• 利用大小不同的分子在多孔固定相中的 选择渗透而达到分离的方法，称为凝胶 色谱法或尺寸排阻色谱法。 • 利用不同组分与固定相（固定化分子） 的高专属性亲和力进行分离的技术称为 亲和色谱法，常用于蛋白质的分离

3.按固定相的外型分类 ·固定相装于柱内的色谱法，称为柱色谱。 它又可分为填充柱色谱法、毛细管柱色谱 法、微填充柱色谱法。（气相色谱、高效 液相色谱、超临界流体色谱) ·固定相呈平板状的色谱，称为平板色谱， 它又可分为薄层色谱、纸色谱、薄膜色谱 法。（液相色谱）

3. 按固定相的外型分类 • 固定相装于柱内的色谱法，称为柱色谱。 它又可分为填充柱色谱法、毛细管柱色谱 法、微填充柱色谱法。（气相色谱、高效 液相色谱、超临界流体色谱） • 固定相呈平板状的色谱，称为平板色谱， 它又可分为薄层色谱、纸色谱、薄膜色谱 法。（液相色谱）

按性质不同分类 流动相 液体 气体 固定相 固 液固色灣L沁 气固色增G50 体 Liquid-Solid Gas-Solid Chromatography G分hromatography 液液色增LLG 气液色谱1G L1-工i可 Gas-Liquid 体 Chromatography Chromatography