华南农业大学：《农药残留分析》课程教学资源（实验指导）气相色谱法检测甘蓝和土壤中毒死蜱的残留量

气相色谱法检测甘蓝和土壤中毒死婢的残留量 1试验目的：使学生掌握样品前处理方法及原理，熟悉前处理操作步骤与规则， 熟悉气相色谱仪的构造及测定流程，掌握利用气相色谱对前处理后的样品进行测 定，能利用工作站对气相色谱条件进行设置和优化，并能对结果进行分析。 2原理：气相色谱法是以气体为流动相，分析物质由载气（流动相）携带，通过 色谱柱（柱内涂有固定液），被分析物质的各组分在气（载气）一液（液膜）两 相间的分配系数不同，在流动过程中得到相应的分配和分离，使各组分流出色谱 柱先后顺序不同，通过检测器检测，计算机采集处理，得出一张色谱图。毒死婢 经色谱柱分离，火焰离子化检测器(D)检测，内标法定量。 3试剂：乙睛(AR)、甲醇(AR)等、邻苯二甲酸二丁酯（内标物）、毒死蜱标准 品≥99%。 4仪器：岛津GC2010-plus 供气系统：空气发生器、氮气发生器、氢气发生器。 进样系统：由气化室和进样器组成。气化室将液体样品瞬间气化，预热载气，通 过载气把样品带入色谱柱。 分离系统：包括色谱柱和恒温箱。色谱柱是气相色谱仪的核心部分，它有填充柱 和毛细管柱，样品分离过程在色谱柱内进行。色谱柱安装在恒温箱内，恒温箱保 持箱内的温度恒定或按一定速率程序升温。 检测器：火焰离子化检测器(FID)。 数据处理：它将电信号采集处理，记录峰数、保留时间、峰面积和计算结果。本 实验用色谱工作站采集数据。 5溶液的配制 5.1内标溶液的配制称取0.050g邻苯二甲酸二丁酯（内标物），置于100ml 容量瓶中，用甲醇溶解并定容，摇匀。 5.2标准溶液的配制精确称取0.050g(准确至±0.2mg)标准品，置于100ml 容量瓶中，用甲醇溶解并定容，成工作母液。通过逐级稀释，配制成0.50mg/L、 1.00mg/L、2.50mg/L、5.00mg/L、10.0mg/L的标准工作液（用10mL的容量瓶 来配制，并在各标准工作液中加入100μL的内标溶液)

气相色谱法检测甘蓝和土壤中毒死蜱的残留量 1 试验目的：使学生掌握样品前处理方法及原理，熟悉前处理操作步骤与规则， 熟悉气相色谱仪的构造及测定流程，掌握利用气相色谱对前处理后的样品进行测 定，能利用工作站对气相色谱条件进行设置和优化，并能对结果进行分析。 2 原理：气相色谱法是以气体为流动相，分析物质由载气（流动相）携带，通过 色谱柱（柱内涂有固定液），被分析物质的各组分在气（载气）－液（液膜）两 相间的分配系数不同，在流动过程中得到相应的分配和分离，使各组分流出色谱 柱先后顺序不同，通过检测器检测，计算机采集处理，得出一张色谱图。毒死蜱 经色谱柱分离，火焰离子化检测器（FID）检测，内标法定量。 3 试剂：乙腈（AR）、甲醇（AR）等、邻苯二甲酸二丁酯(内标物)、毒死蜱标准 品≥99%。 4 仪器：岛津 GC 2010-plus 供气系统：空气发生器、氮气发生器、氢气发生器。 进样系统：由气化室和进样器组成。气化室将液体样品瞬间气化，预热载气，通 过载气把样品带入色谱柱。 分离系统：包括色谱柱和恒温箱。色谱柱是气相色谱仪的核心部分，它有填充柱 和毛细管柱，样品分离过程在色谱柱内进行。色谱柱安装在恒温箱内，恒温箱保 持箱内的温度恒定或按一定速率程序升温。 检测器：火焰离子化检测器（FID）。 数据处理：它将电信号采集处理，记录峰数、保留时间、峰面积和计算结果。本 实验用色谱工作站采集数据。 5 溶液的配制 5.1 内标溶液的配制 称取 0.050 g 邻苯二甲酸二丁酯(内标物)，置于 100 mL 容量瓶中，用甲醇溶解并定容，摇匀。 5.2 标准溶液的配制 精确称取 0.050 g(准确至±0.2 mg)标准品，置于 100 mL 容量瓶中，用甲醇溶解并定容，成工作母液。通过逐级稀释，配制成 0.50mg/L、 1.00mg/L、2.50mg/L 、5.00mg/L、10.0mg/L 的标准工作液（用 10mL 的容量瓶 来配制，并在各标准工作液中加入 100 μL 的内标溶液）

6试验步骤： 6.1样品前处理： 提取甘蓝切碎、混匀，称取10g于研磨中，加30mL乙腈，研碎，过滤至置塞量 筒，加入3gNaC1,5gMgS0,手摇1min,静置分层，记录体积，取15mL上 清液于150mL烧瓶中，在50℃下浓缩近干，过经活化的自制层析柱净化。 净化带砂芯玻璃层析柱(25cm×L.5cmi.d.),采用干法装柱法从下至上依次装 2cm无水硫酸钠、4g+0.5g的弗罗里硅土+活性炭、2cm无水硫酸钠，轻轻 敲实。将弗罗里硅土用10.0ml丙酮+石油醚(10%+90%)预淋条件化，当溶 剂液面到达柱吸附层表面时，加入样品溶液，用烧瓶接收洗脱液，用40L 丙酮+石油醚(10%+90%)淋洗弗罗里硅土。将收集液浓缩近干，用丙酮定 容至3mL,上机分析。 (土壤前处理同上) 6.2上机测定 6.2.1气相色谱测定条件 仪器：气相色谱(HP6890,FPD):柱温采用程序升温方式：从80℃以30℃ /min的升温速率升至240℃并保留2min,然后以10℃的升温速率升至260℃， 并保留5min:进样口温度：260℃；检测器温度：300℃：进样量：1μL。 6.2.2标准曲线 以配制好的0.50mg/L、1.00mg/L、2.50mg/L、5.00mg/L、10.0mg/L的标准 工作液，在上述色谱操作条件下分别进样1L,以毒死蜱峰面积与内标物峰面积 的比值为Y轴、标准溶液浓度为X轴，绘出标准曲线。 6.2.3计算公式 根据峰的保留时间确定分析的物质（同种物质在相同分析条件下保留时间相 同)，根据所测毒死蜱峰面积与内标物峰面积的比值，用内标法计算样品的含量 (样品所测峰面积比值代入曲线方程得出样品的浓度)

6 试验步骤： 6.1 样品前处理： 提取 甘蓝切碎、混匀，称取 10g 于研磨中，加 30mL 乙腈，研碎，过滤至置塞量 筒，加入 3gNaCl，5gMgSO4，手摇 1min，静置分层，记录体积，取 15mL 上 清液于 150mL 烧瓶中，在 50℃下浓缩近干，过经活化的自制层析柱净化。 净化 带砂芯玻璃层析柱（25cm×1.5cm i.d.），采用干法装柱法从下至上依次装 2cm 无水硫酸钠、4g+0.5g 的弗罗里硅土+活性炭、2cm 无水硫酸钠，轻轻 敲实。将弗罗里硅土用 10.0mL 丙酮+石油醚（10%+90%）预淋条件化，当溶 剂液面到达柱吸附层表面时，加入样品溶液，用烧瓶接收洗脱液，用 40mL 丙酮+石油醚（10%+90%）淋洗弗罗里硅土。将收集液浓缩近干，用丙酮定 容至 3mL，上机分析。 （土壤前处理同上） 6.2 上机测定 6.2.1 气相色谱测定条件 仪器：气相色谱（HP6890，FPD）；柱温采用程序升温方式：从 80℃以 30℃ /min 的升温速率升至 240℃并保留 2min，然后以 10℃的升温速率升至 260℃， 并保留 5min；进样口温度：260℃；检测器温度：300℃；进样量：1μL。 6.2.2 标准曲线 以配制好的0.50mg/L、1.00mg/L、2.50mg/L 、5.00mg/L、10.0mg/L的标准 工作液，在上述色谱操作条件下分别进样1L，以毒死蜱峰面积与内标物峰面积 的比值为Y轴、标准溶液浓度为X轴，绘出标准曲线。 6.2.3 计算公式 根据峰的保留时间确定分析的物质(同种物质在相同分析条件下保留时间相 同)，根据所测毒死蜱峰面积与内标物峰面积的比值，用内标法计算样品的含量 （样品所测峰面积比值代入曲线方程得出样品的浓度）