苏州大学：《医用基因工程》第四章 真核细胞的基因表达调控

第四章真核细胞的基因表 达调控 第一节真核细胞基因表达的调控 第二节哺乳动物细胞表达系统的选择 标记基因 第三节真核细胞表达系统的载体种类

第四章 真核细胞的基因表 达调控 • 第一节 真核细胞基因表达的调控 • 第二节 哺乳动物细胞表达系统的选择 标记基因 • 第三节 真核细胞表达系统的载体种类

第一节真核细胞基因表达 的调控 、真核生物基因表达的特点及优势 真核细胞表达及调控元件

第一节 真核细胞基因表达 的调控 • 一、真核生物基因表达的特点及优势 • 二、真核细胞表达及调控元件

第二节哺乳动物细胞表达 系统的选择标记基因 胸苷激酶基因选择标记(定义 二、二氢叶酸还原酶基因选择标记 三、新霉素抗性基因选择标记 四、氯霉素已酰转移酶基因选择标记 五、黄嘌呤-鸟嘌呤转移酶( XGPRT)基 因

第二节 哺乳动物细胞表达 系统的选择标记基因 • 一、胸苷激酶基因选择标记（定义） • 二、二氢叶酸还原酶基因选择标记 • 三、新霉素抗性基因选择标记 • 四、氯霉素已酰转移酶基因选择标记 • 五、黄嘌呤-鸟嘌呤转移酶（XGPRT）基 因

第三节真核细胞表达系统 的载体种类 载体的类型 二、几种常用的真核表达载体

第三节 真核细胞表达系统 的载体种类 • 一、载体的类型 • 二、几种常用的真核表达载体

真核生物基因表达的特点 及优势 1.细胞的全能性 2转录和翻译分开进行 3.有相当大的非编码区(调控序列) 4有三种不同RNA聚合酶参与转录 5.初级转录产物能进行剪接加工修饰 6不存在操纵子结构 7.基因多拷贝,功能基因分散在不同区域,分 别转录

一、 真核生物基因表达的特点 及优势 • 1.细胞的全能性 • 2.转录和翻译分开进行 • 3.有相当大的非编码区（调控序列） • 4.有三种不同RNA聚合酶参与转录 • 5.初级转录产物能进行剪接加工修饰 • 6.不存在操纵子结构 • 7.基因多拷贝，功能基因分散在不同区域，分 别转录

真核细胞表达及调控元件 (一)真核生物基因转录水平的调控 (二)转录后水平的调控 三)翻译水平的调控

二、真核细胞表达及调控元件 • （一）真核生物基因转录水平的调控 • （二）转录后水平的调控 • （三）翻译水平的调控

胸苷激酶 °胸腺嘧啶核苷激酶简称胸苷激酶 ( thymidine Kinase,K)在所有真核细胞 中都有表达,是嘧啶生物合成补救代谢途 径中的一个关键酶,它可催化胸苷磷酸化 转变成为dTMP,继续磷酸化生成dTTP,参 与DNA的生物合成

胸苷激酶 • 胸腺嘧啶核苷激酶简称胸苷激酶 （thymidine Kinase,TK）在所有真核细胞 中都有表达, 是嘧啶生物合成补救代谢途 径中的一个关键酶, 它可催化胸苷磷酸化 转变成为dTMP, 继续磷酸化生成dTTP, 参 与DNA的生物合成

载体的类型 1质粒型载体 2.病毒载体 3整合型表达载体 4游离型表达载体 ·5瞬时表达载体 6稳定性表达载体 7非复制性HSV-Ⅰ病毒(单纯疱疹病毒HSV-Ⅰ 型)载体 8.裂解性HSV-Ⅰ病毒载体

一、载体的类型 • 1.质粒型载体 • 2.病毒载体 • 3.整合型表达载体 • 4.游离型表达载体 • 5.瞬时表达载体 • 6.稳定性表达载体 • 7.非复制性HSV-Ⅰ病毒（单纯疱疹病毒HSV-Ⅰ 型）载体 • 8.裂解性HSV-Ⅰ病毒载体

二、几种常用的真核表达载体 ()逆转录病毒载体 1卸甲载体 2.穿梭载体 (痘类病毒载体 )HsVI单纯疱疹病毒载体 1重组病毒型载体 2.重组质粒型载体 3裂解型病毒载体

二、几种常用的真核表达载体 • ㈠ 逆转录病毒载体 – 1.卸甲载体 – 2.穿梭载体 • ㈡ 痘类病毒载体 • ㈢ HSV-Ⅰ单纯疱疹病毒载体 – 1.重组病毒型载体 – 2.重组质粒型载体 – 3.裂解型病毒载体

(一)真核生物基因转录水平 的调控 1.基因调控的顺式作用元件 1)启动子 2)增强子 3)RNA剪接信号 4)负调控元件 5)终止子和polA信号 2.基因调控的反式作用因子 概念 2)反式作用因子主要作用规律

（一）真核生物基因转录水平 的调控 1. 基因调控的顺式作用元件 1) 启动子 2) 增强子 3) RNA剪接信号 4) 负调控元件 5) 终止子和polyA信号 2. 基因调控的反式作用因子 1) 概念 2) 反式作用因子主要作用规律