苏州大学：《医用基因工程》第二十章 基因治疗

第二十章基因治疗 基因治疗的概念及遵循原则 基因治疗的程序 基因治疗的策略 四、基因治疗的临床应用 五、基因治疗的问题与前景 六、裂解型(HSⅴⅠ)载体用于脑肿瘤 的基因治疗(如图

第二十章 基因治疗 • 一、基因治疗的概念及遵循原则 • 二、基因治疗的程序 • 三、基因治疗的策略 • 四、基因治疗的临床应用 • 五、基因治疗的问题与前景 • 六、裂解型（HSV-Ⅰ）载体用于脑肿瘤 的基因治疗(如图)

基因治疗的概念 基因治疗就是将有功能的基因转移到病人的细胞中以 纠正或置换致病基因的一种治疗方法,是指有功能的 目的基因导入靶细胞后与宿主细胞内的基因发生整合, 成为宿主细胞遗传物质的一部分,目的基因的表达产 物起到对疾病的治疗作用。若目的基因不与宿主细胞 基因组发生整合,但可通过暂时表达产物发挥治疗作 用的方法叫基因疗法( gene therapeutics),此法实际 上就如同临床上使用的药物治疗一样,这与传统意义 上的基因治疗是有区别的。基因治疗常采取四大措施, 包括:(1)基因置换( gene replacement)(2)基因修正(gene correction)(3)基因修饰( gene augmentation)(4)基因失活 (gene inactivation

基因治疗的概念 • 基因治疗就是将有功能的基因转移到病人的细胞中以 纠正或置换致病基因的一种治疗方法，是指有功能的 目的基因导入靶细胞后与宿主细胞内的基因发生整合， 成为宿主细胞遗传物质的一部分，目的基因的表达产 物起到对疾病的治疗作用。若目的基因不与宿主细胞 基因组发生整合，但可通过暂时表达产物发挥治疗作 用的方法叫基因疗法（gene therapeutics），此法实际 上就如同临床上使用的药物治疗一样，这与传统意义 上的基因治疗是有区别的。基因治疗常采取四大措施， 包括：(1)基因置换(gene reptacement) (2)基因修正(gene correction) (3)基因修饰(gene augmentation) (4)基因失活 (gene inactivation)

基因置换 基因置换( gene replacement):是指将致病 基因整个地被有功能的正常基因所置换, 使致病基因永久地得到更正。但操作难 度大,有伦理学问题

基因置换 • 基因置换(gene reptacement)：是指将致病 基因整个地被有功能的正常基因所置换， 使致病基因永久地得到更正。但操作难 度大，有伦理学问题

基因修正 基因修正( gene correction)是指将致病基 因的突变碱基序列得以纠正,而正常序 列部分予以保留,使突变的致病基因恢 复正常功能。即使致病基因的突变序列 纠正为正常序列(用碱基点突变技术)

基因修正 • 基因修正(gene correction)是指将致病基 因的突变碱基序列得以纠正，而正常序 列部分予以保留，使突变的致病基因恢 复正常功能。即使致病基因的突变序列 纠正为正常序列（用碱基点突变技术）

基因修饰 基因修饰( gene augmentation)则是指将目 的基因导入缺陷细胞或其它细胞,目的 基因的表达产物可修饰和改变缺陷细胞 的功能或使原有的功能得到加强

基因修饰 • 基因修饰(gene augmentation)则是指将目 的基因导入缺陷细胞或其它细胞，目的 基因的表达产物可修饰和改变缺陷细胞 的功能或使原有的功能得到加强

基因失活 基因失活( gene inactivation)就是应用反义 技术 antisense technology)特异封闭某些 基因的表达,以达到抑制或阻止某些有 害基因的表达。 SIRNA的基因干扰可造 成靶基因(异常基因)的失活(或沉 默)

基因失活 • 基因失活(gene inactivation)就是应用反义 技术(antisense technology)特异封闭某些 基因的表达，以达到抑制或阻止某些有 害基因的表达。SiRNA的基因干扰可造 成靶基因（异常基因）的失活（或沉 默）

基因治疗遵循的原贝 基因治疗应遵循的基本原则为: 治疗的疾病应是指目前治疗方法难以阻止疾病发展 的严重疾病 遗传性疾病应是属于染色体“隐性”遗传的疾病 即指来自双亲的二条染色体上同一基因位点都发生改 变的疾病,只要通过导入同一正常基因即可纠正缺陷 3.能治疗疾病的正常基因已经被克隆,并能表达有功 能的产物。 ·4.基因治疗用的基因在体内表达无需精确调控,表达 产物过多不会产生危害。 5.注入体内带有外源基因的治疗细胞,应能自然消减 去除

基因治疗遵循的原则 基因治疗应遵循的基本原则为： • 1．治疗的疾病应是指目前治疗方法难以阻止疾病发展 的严重疾病。 • 2．遗传性疾病应是属于染色体“隐性”遗传的疾病， 即指来自双亲的二条染色体上同一基因位点都发生改 变的疾病，只要通过导入同一正常基因即可纠正缺陷。 • 3．能治疗疾病的正常基因已经被克隆，并能表达有功 能的产物。 • 4．基因治疗用的基因在体内表达无需精确调控，表达 产物过多不会产生危害。 • 5．注入体内带有外源基因的治疗细胞，应能自然消减 去除

基因治疗的程序 )且的基因的准备 (二)受体细胞靶细胞)的选择和培养 (三)载体的选择 (四)且的基因导入靶细胞的基因转移方法

二、基因治疗的程序 • (一)目的基因的准备 • (二)受体细胞(靶细胞)的选择和培养。 • (三)载体的选择 • (四)目的基因导入靶细胞的基因转移方法

目的基因导入靶细胞的基因转 移方法 1.基因转移的物理法 2.基因转移的化学法 3.基因转移的融合法 基因转移的颗粒轰击技术 5.基因转移的病毒载体法

目的基因导入靶细胞的基因转 移方法 • 1．基因转移的物理法 • 2．基因转移的化学法 • 3．基因转移的融合法 • 4．基因转移的颗粒轰击技术 • 5．基因转移的病毒载体法

1.基因转移的物理法 (1)显微注射法 ①真正的显微注射法:直接在显微镜下向胞 内注入基因 ②穿刺法:先在胞膜、胞核上穿孔后导入基 因 (2)电脉冲介导法:在高压电脉冲下,使 胞膜瞬间形成孔洞,基因在强电场下导 入,电场强度和持续时间随种类而异

1．基因转移的物理法 • (1)显微注射法 – ①真正的显微注射法：直接在显微镜下向胞 内注入基因 – ②穿刺法：先在胞膜、胞核上穿孔后导入基 因 • (2)电脉冲介导法：在高压电脉冲下，使 胞膜瞬间形成孔洞，基因在强电场下导 入，电场强度和持续时间随种类而异