河北科技大学：《仪器分析》课程教学资源（PPT课件）第十三章 高效液相色谱法

第十三章高效液相色谱法

第十三章 高效液相色谱法

第一节液相色谱仪器 high performance liquid chromatograph) 液相色谱仪(1) Waters LC 2690 图

第一节 液相色谱仪器 （high performance liquid chromatograph） 液相色谱仪（1）

液相色谱仪（2) 岛津高效液相色谱仪LC-10A系列

液相色谱仪（2）

液相色谱仪（3) HP1050系列液相色谱仪

液相色谱仪（3）

液相色谱仪(4) Waters LC-600

液相色谱仪（4）

二、高效液相色谱法的特点 (feature of HPLC) 特点：高压、高效、高速、高沸点、热不稳定有机及生化试 样的高效分离分析方法。 溶剂 碳酸钙 色谱带 海00 0 lonlm 0

二、高效液相色谱法的特点 （feature of HPLC） 特点：高压、高效、高速、高沸点、热不稳定有机及生化试 样的高效分离分析方法

三、流程及主要部件 process and main assembly of HPLC) 1.流程 进样器 高压泵 分离柱 贮液瓶 海后 园录仪信子 检测器 废液

三、流程及主要部件 （process and main assembly of HPLC） 1.流程

2.主要部件 ()高压输液泵 主要部件之一，压力：150~350×105Pa。 为了获得高柱效而使用粒度很小的固定相(<10um), 液体的流动相高速通过时，将产生很高的压力，因此高 压、高速是高效液相色谱的特点之一。 应具有压力平稳、脉冲小、流量稳定可调、耐腐蚀等特性。 忄流动相出口 密封垫 柱塞 单向阁 偏心轮 事流动相进▣

2. 主要部件 (1) 高压输液泵 主要部件之一，压力：150～350×105 Pa。 为了获得高柱效而使用粒度很小的固定相（<10μm）， 液体的流动相高速通过时，将产生很高的压力，因此高 压、高速是高效液相色谱的特点之一。 应具有压力平稳、脉冲小、流量稳定可调、耐腐蚀等特性

(2)梯度淋洗装置 溶剂A 比例阀（溶剂混合点） 外梯度： 溶剂A 泵A ●混合器 利用两台高压输液泵，将 混合器 溶剂B (溶剂混合点) 两种不同极性的溶剂按一定的 溶剂B 泵B 比例送入梯度混合室，混合后 高压梯度 低压梯度 进入色谱柱。 内梯度： 台高压泵，通过比例调 节阀，将两种或多种不同极性 的溶剂按一定的比例抽入高压 泵中混合

(2)梯度淋洗装置 外梯度: 利用两台高压输液泵，将 两种不同极性的溶剂按一定的 比例送入梯度混合室，混合后 进入色谱柱。 内梯度: 一台高压泵, 通过比例调 节阀，将两种或多种不同极性 的溶剂按一定的比例抽入高压 泵中混合

(3)进样装置 流路中为高压力工作状态， 通常使用耐高压的六通阀进样装置， 其结构如图所示： 样品 样品 入 入▣ 样品 出口 样品 出口 样品环 5 流动相 流动相 入▣ 色谱柱 入口 色谱柱 入▣ 入口 a 准备状态 b 进样状态

(3) 进样装置 流路中为高压力工作状态， 通常使用耐高压的六通阀进样装置， 其结构如图所示：