安徽科技学院：《现代生物工程学》课程教学资源（PPT课件）第六章 发酵工程 第四节 发酵菌种选育（生产中常用菌种的分离与选育）

第四节生产中常用菌种的分离、 选育

第四节 生产中常用菌种的分离、 选育

带图象分析系统的微生物菌种 显微观察装置

带图象分析系统的微生物菌种 显微观察装置

菌种的分离简介 (一)、菌种的来源 ·根据资料直接向有科研单位、高等院校、工厂 或菌种保藏部门索取或购买； ·从大自然中分离筛选新的微生物菌种

一 菌种的分离简介 （一）、菌种的来源 • 根据资料直接向有科研单位、高等院校、工厂 或菌种保藏部门索取或购买； • 从大自然中分离筛选新的微生物菌种

(二)、分离思路 ·新菌种的分离是要从混杂的各类微生物中依照 生产的要求、菌种的特性，采用各种筛选方法， 快速、准确地把所需要的菌种挑选出来。 ·实验室或生产用菌种若不慎污染了杂菌，也必 须重新进行分离纯化。 ·有了优良的菌种，还要有合适的工艺条件和合 理先进的设备与之配合

（二）、分离思路 • 新菌种的分离是要从混杂的各类微生物中依照 生产的要求、菌种的特性，采用各种筛选方法， 快速、准确地把所需要的菌种挑选出来。 • 实验室或生产用菌种若不慎污染了杂菌，也必 须重新进行分离纯化。 • 有了优良的菌种，还要有合适的工艺条件和合 理先进的设备与之配合

(三)、新菌种分离与筛选的步豫 定方案：首先要查阅资料，了解所需菌种的生 长培养特性。 ·采样：有针对性地采集样品。 ·增殖：人为地通过控制养分或培条件，使所需 菌种增殖培养后，在数量上占优势。 。分离：利用分离技术得到纯种。 ·发酵性能测定：进行生产性能测定。这些特性 包括形态、培养特征、营养要求、生理生化特 性、发酵周期、产品品种和产量、耐受最高温 度、生长和发酵最适温度、最适PH值、提取工 艺等

• 定方案：首先要查阅资料，了解所需菌种的生 长培养特性。 • 采样：有针对性地采集样品。 • 增殖：人为地通过控制养分或培条件，使所需 菌种增殖培养后，在数量上占优势。 • 分离：利用分离技术得到纯种。 • 发酵性能测定：进行生产性能测定。这些特性 包括形态、培养特征、营养要求、生理生化特 性、发酵周期、产品品种和产量、耐受最高温 度、生长和发酵最适温度、最适pH值、提取工 艺等。 （三）、新菌种分离与筛选的步骤

1.采样 采样对象 以采集土壤为主。一般园田土和耕作 过的诏泽土中，以细菌和放线菌为主， 富含碳水化合物的土壤和诏泽地中，酵 母和霉菌较多，如一些野果生长区和果 园内。采样的对象也可以是植物，腐败 物品，某些水域等

1.采样 采样对象 以采集土壤为主。一般园田土和耕作 过的沼泽土中，以细菌和放线菌为主， 富含碳水化合物的土壤和沼泽地中，酵 母和霉菌较多，如一些野果生长区和果 园内。采样的对象也可以是植物，腐败 物品，某些水域等

从自然界筛选

从自然界筛选

·采样季节：以温度适中，雨量不多的秋初为好。 采土方式：在选好适当地点后，用小萨子除去表 土，取离地面5-15cm处的土约10g,盛入清洁的牛 皮纸袋或塑抖袋中，扎好，标记，记录采样时间、 地点、环境条件等，以备查考。为了使土样中微 生物的数量和类型尽少变化，宜将样品逐步分批 寺回，以便及时分离

• 采样季节：以温度适中，雨量不多的秋初为好。 • 采土方式：在选好适当地点后，用小萨子除去表 土，取离地面5-15cm处的土约10g，盛入清洁的牛 皮纸袋或塑料袋中，扎好，标记，记录采样时间、 地点、环境条件等，以备查考。为了使土样中微 生物的数量和类型尽少变化，宜将样品逐步分批 寄回，以便及时分离

2.增殖培养 为了容易分离到所需的菌种，让无关的微生物至 少是在数量上不要增加，可以通过配制选择性培 养基，选择一定的培养条件来控制。 ·例如碳源利用的控制，可选定糖，淀粉、纤维素， 或者石油等，以其中的一种为唯一碳源，那么只 有利用这一碳源的微生物才能大量正常生长，而 其它微生物就可能死亡或淘达。这样对下阶段的 纯种分离就会顺利得多

2.增殖培养 • 为了容易分离到所需的菌种，让无关的微生物至 少是在数量上不要增加，可以通过配制选择性培 养基，选择一定的培养条件来控制。 • 例如碳源利用的控制，可选定糖，淀粉、纤维素， 或者石油等，以其中的一种为唯一碳源，那么只 有利用这一碳源的微生物才能大量正常生长，而 其它微生物就可能死亡或淘汰。这样对下阶段的 纯种分离就会顺利得多

3.培养分离 ·尽管通过增殖培养效果显著，但还是处于微生 物的混杂生长状态。因此还必须分离，纯化。 在这一步，增殖培养的选择性控制条件还应进 一步应用，而且控制得细一点，好一点。纯种 分离的方法有划线分离法、稀释分离法

3.培养分离 • 尽管通过增殖培养效果显著，但还是处于微生 物的混杂生长状态。因此还必须分离，纯化。 在这一步，增殖培养的选择性控制条件还应进 一步应用，而且控制得细一点，好一点。纯种 分离的方法有划线分离法、稀释分离法