新乡医学院：《生物材料检验》课程教学资源（教案讲义，打印版）实验六 顶空气相色谱法测定血液中的乙醇含量

新乡医学院教案首页 课程名称 生物材料检验 授课题目 顶空气相色谱法测定血液中的乙醇含量 授课对象 本科2013级卫生检验专业 1. 讲解与示范 60分钟 时间分配 2.学生操作 130分钟 3. 小结 10分钟 共200分钟 课时目标 掌握顶空气相色谱法测定血液中的乙碎含量的原理与方法。 了解血中乙醇含量测定意义 授课重点 顶空气相色谱法测定血液中的乙醇含量的原理与方法 授课难点 气相色谱内标法 授课形式 小班实验课 授课方法 板书结合示教 参考文献 高蓉主编《卫生检验检疫实验教程：卫生理化检验分册》，第1版，2015 思考题 与血液直接进样相比，顶空发的优势是什么？ 教研室主任（签字） 课程负责人（签字） 教研室主任 及课程负责 人签字 月日 年月日

教素续页 教案内容 教学组织与 教学安排 顶空气相色谱法测定血液中的乙醇含量 实验目的 1.掌握顶空气相色谱法原理和仪器结构， 2掌握血液中酒精含量测定的操作。 工作原理 顶空气相色谱(GC headspace Analysis)是指对液体或固体中的挥发性 成分进行气相色谱分析的一种间接测定法，它是在热力学平衡的蒸气相与被 分析样品同时存在于 个密闭系统中进行的。这一方法从气相色谱仪角度讲 是一种进样系统，即“顶空进样系统”。其主要用于复杂基体中挥发性残留 复习理论课相关知 物的分析。其做法是：对与液体或固体试样达成热力学平衡的气相组分进行 识，讲解本次实验的 取样分析，从而测定待测样品中的分析组分。该法选择性高、灵敏度高、基 目的原理步骤 体干扰小、不需要样品前处理。 静态顶空气相色诺 在一个密闭恒温体系中，液气或固气达到平衡时用气相色谱法分析蒸气 相中的被测组分。 1.数置 6 1:恒温液出口：2：注射器入口：3：恒温器： 4:放置样品口：5：恒温液入口：6：样品 2。影响静态顶空气相色谱的因素 。样品的性质 ·进样量 ·平衡温度 ·平衡时间 ·与样品瓶有关的因素：样品瓶、密封垫

教素续页 教案内容 教学组织与 教学安排 仪器与试剂 空哈仪器： 恒温装置（水浴或其他） 2.顶空进样小瓶，硅橡胶垫，密封钳，铝帽，聚四氟膜。 3.1mL气相色谱进样针。 4.安捷伦7890气相色谱，FID检测器 仪器与试剂 实验试剂： 分析纯：乙醇、叔丁醇、 去离子水 实验操作步骤 ·绘制标准曲线 配置0、20、40、80、120mg/ml乙醇标准溶液 配置80mg/L叔丁醇标准溶液 取5只20mL顶空瓶，分别加入0、20、40、80、120mg/100mL乙醇标 准溶液各1mL,每只瓶中均加入0.5mL80mg/100ml叔丁醇标准溶液，封学生分为6组顺序进 口后摇匀，放入恒温装置(70℃)中15分钟。 入仪器室进行完整操 用注射器取顶空瓶内液面以上空气0.5L进气相色谱分析，以叔丁醇 作，第1组学生学习 为内标法绘制测定乙醇标准曲线。 负责给下一组 2.样品测定 学生讲解，教师在 取血液样品1ml,加入0.5叔丁醇标样，测定方法同标准曲线绘制： 旁给予纠错补充。 3.样品空白 以纯水为空白，加入叔丁醇内标，测定样品空白。 结果计算 以内标法测定样品(C)和空白(C)中乙醇的浓度 C=C-0 注意事项 1.血液样品的保持条件，4℃时10天内分析完成 2.平衡温度50-70℃ 思考题： 与血液直接进样相比，顶空发的优势是什么？

救聚来页 1.实验的质控过程讲解 2.注意安全和实验室卫生 小结 教学后记