新乡医学院：《生物材料检验》课程教学资源（实验课件，打印版）实验六 顶空气相色谱法测定血液中的乙醇含量

顶空气相色谱法测定血液 中的乙醇含量 卫生检验学教研室

实验目的 1.掌握顶空气相色谱法原理和仪器结构。 2.掌握血液中酒精含量测定的操作

工作原理 顶空气相色谱(GC headspace Analysis)是指对液体或固体中 的挥发性成分进行气相色谱分析的一种间接测定法，它是在热力 学平衡的蒸气相与被分析样品同时存在于一个密闭系统中进行的： 经方法从气相色谱仪角度讲，是二种进样系统，即“顶空进样 。其主要用手复杂基体中挥发性残留物的分析。其做法是： 对与液体或固体试样达成热力学平衡的气相组分进行取样分析， 从而测定待测样品中的分析组分。该法选择性高、灵敏度高、基 体干扰小、不需要样品前处理

静态顶空气相色谱 在一个密闭恒温体系中，液气或固气达到平衡时用气相色谱法分析蒸气 相中的被测组分。 1.装置 1:恒温液出口；2：注射器入口；3：恒温器； 4:放置样品口；5：恒温液入口；6：样品

2.影响静态顶空气相色谱的因素 ·样品的性质 ·进样量 ·平衡温度 ·平衡时间 ·与样品瓶有关的因素：样品瓶、密封垫

仪器与试剂 实验仪器： 1.恒温装置（水浴或其他）。 2.顶空进样小瓶，硅橡胶垫，密封钳，铝帽，聚四氟膜。 3.1mL气相色谱进样针。 4.安捷伦7890气相色谱，F1D检测器

仪器与试剂 实验试剂： 分析纯：乙醇、叔丁醇、 去离子水

实验操作步骤 1.绘制标准曲线 配置0、20、40、80、120mg/100mL乙醇标准溶液 配置80mg/100mL叔丁醇标准溶液 取5只20mL顶空瓶，分别加入0、20、40、80、，120mg/mL乙醇标 准溶液各1mL,每只瓶中均加入0.5mL80mg/mL叔丁醇标准溶 液，封口后摇匀，放入恒温装置(70℃)中15分钟。 用注射器取顶空瓶内液面以上空气0.5mL进气相色谱分析，以叔丁 醇为内标法绘制测定乙醇标准曲线

2.样品测定 取血液样品1mL,加入0.5mL叔丁醇标样，测定方法同标准曲线绘 制 3.样品空白 以纯水为空白，加入叔丁醇内标，测定样品空白

结果计算 以内标法测定样品(C)和空白(C)中乙醇的浓度 C=C1-Co