中国农业大学：《发酵工程学 Fermentation Engineering》课程教学资源（实验指导）实验一 工业微生物的筛选和分离

工业微生物的筛选和分离 1、醋酸菌分离培养基:1%酵母膏,1%葡萄糖,pH4.5,琼脂2%,O.IMPa灭菌20分 钟。干热灭菌CaCO3。6个250m三角瓶,各装100m培养基。使用前分别加入3%无水乙 醇和2%CaCO 2、降解亚硝酸盐培养基:NaNO30.2%,KHPO40.7%,MSO4HO0.25%, Na2HPO4 1.35%,MgSO4THO01%,葡萄糖1%,琼脂2%,0.IMPa灭菌20分钟。6个250ml三角 瓶,各装100ml培养基。 同时灭菌试管20支(分为两个以包装,二个班用),1ml吸管12支(分为两个以包装, 二个班用)。普通平皿60个。 土样:5g土样,加入4m无菌水中。为10,然后取lm加入9m无菌水,为稀释 直至稀释至10 实验老师准备:(1)课前半小时打开操净工作台灭菌 (2)课前稀释土样至108。 (3)溶化培养基。 同学分组:共分六组,三组分离醋酸菌,三组分离亚硝酸盐分解菌 分离醋酸菌同学每组分别作101,102,10 分离亚硝酸盐分解菌同学每组分别作10-,105,10 每位同学做一个平皿。并标记好稀释度和名字 具体操作方法:吸取相应浓度的土样稀释液0.5m,加入平皿内,采用倾注稀释法,加 入溶化后不烫手的培养基,刚好盖过平皿底部,迅速混匀后放置,使培养基冷却,放入37℃ 培养箱中倒置培养48小时。 醋酸菌分离观察透明圈大小并计数,亚硝酸盐分解菌分离直接计数平皿上菌的生长数 上课时间:生工021:星期一(5月23日)上午8:00至12点 生工022:星期二(5月24日)晚6:30-8:20

工业微生物的筛选和分离 1、醋酸菌分离培养基：1％酵母膏，1％葡萄糖，pH4.5，琼脂 2％，0.1MPa 灭菌 20 分 钟。干热灭菌 CaCO3。6 个 250ml 三角瓶，各装 100ml 培养基。使用前分别加入 3％无水乙 醇和 2％CaCO3。 2、降解亚硝酸盐培养基：NaNO30.2%，KH2PO4 0.7%，MnSO4.H2O 0.25%，Na2HPO4 1.35%，MgSO4.7H2O 0.1%，葡萄糖 1％，琼脂 2％，0.1MPa 灭菌 20 分钟。6 个 250ml 三角 瓶，各装 100ml 培养基。 同时灭菌试管 20 支（分为两个以包装，二个班用），1ml 吸管 12 支（分为两个以包装， 二个班用）。普通平皿 60 个。 土样：5g 土样，加入 45ml 无菌水中。为 10-1，然后取 1ml 加入 9ml 无菌水，为稀释 10-2， 直至稀释至 10-8。 实验老师准备：（1）课前半小时打开操净工作台灭菌。 （2）课前稀释土样至 10-8。 （3）溶化培养基。 同学分组：共分六组，三组分离醋酸菌，三组分离亚硝酸盐分解菌。 分离醋酸菌同学每组分别作 10-1，10-2，10-3。 分离亚硝酸盐分解菌同学每组分别作 10-4，10-5，10-6。 每位同学做一个平皿。并标记好稀释度和名字。 具体操作方法：吸取相应浓度的土样稀释液 0.5ml，加入平皿内，采用倾注稀释法，加 入溶化后不烫手的培养基，刚好盖过平皿底部，迅速混匀后放置，使培养基冷却，放入 37℃ 培养箱中倒置培养 48 小时。 醋酸菌分离观察透明圈大小并计数，亚硝酸盐分解菌分离直接计数平皿上菌的生长数 量。 上课时间：生工 021：星期一（5 月 23 日）上午 8：00 至 12 点。 生工 022：星期二（5 月 24 日）晚 6：30-8：20