《临床免疫学检验技术》课程教学课件（PPT讲稿）流式细胞分析技术

第十三章流式细胞分析技术

1 第十三章 流式细胞分析技术

目录第一节流式细胞仪的分析及分选原理第二节数据的显示与分析第三节流式细胞仪免疫分析的技术要求第四节流式细胞分析的临床应用第五节影响流式细胞分析的主要因素

2 目 录 第一节 流式细胞仪的分析及分选原理 第二节 数据的显示与分析 第三节 流式细胞仪免疫分析的技术要求 第四节 流式细胞分析的临床应用 第五节 影响流式细胞分析的主要因素

教学目的1.掌握：流式细胞术（仪）、前向散射光、垂直散射光、荧光补偿等概念；流式细胞仪的主要参数（散射光和荧光）以及两类信号的代表意义；单参数、双参数数据显示方式的结果解读；单细胞样本制备和荧光抗体选择的基本要求。2.熟悉：经典流式细胞仪的基本结构、分析及分选原理临床应用。-

3 教学目的 1.掌握：流式细胞术（仪）、前向散射光、垂直散射光、 荧光补偿等概念；流式细胞仪的主要参数（散射光和荧光）以 及两类信号的代表意义；单参数、双参数数据显示方式的结果 解读；单细胞样本制备和荧光抗体选择的基本要求。 2.熟悉：经典流式细胞仪的基本结构、分析及分选原理、 临床应用

第一节流式细胞仪的分析及分选原理

4 第一节 流式细胞仪的分析及分选原理

一、概述流式细胞仪（flowcytometer）：是多学科交叉融合的产物，是集光学、化学、材料学、流体力学、自动化控制、光电测量、细胞生物学、生物化学、免疫学和计算机图像分析等技术于一体的现代化新型分析仪器，主要用于微粒（细胞）定性和定量分析流式细胞仪特点：①速度快，每秒可测量数万个微粒；②精度高；③准确性好；④多参数测量，可以同时对同一个微粒作物理一化学和生物特性的多参数测量。5

5 一、概 述 流式细胞仪（flow cytometer）： 是多学科交叉融合的产物，是集光学、化学、材料学 、流体力学、自动化控制、光电测量、细胞生物学、生物 化学、免疫学和计算机图像分析等技术于一体的现代化新 型分析仪器，主要用于微粒（细胞）定性和定量分析。 流式细胞仪特点： ①速度快，每秒可测量数万个微粒；②精度高；③准 确性好；④多参数测量，可以同时对同一个微粒作物理、 化学和生物特性的多参数测量

概述流式细胞术（flowcytometry，FCM）：是基于流式细胞仪的一项快速、精确、高通量针对微粒（细胞）的特征或功能进行多参数定性、定量分析和分选的新型技术。6

6 概 述 流式细胞术（flow cytometry，FCM）： 是基于流式细胞仪的一项快速、精确、高通量针对微粒（ 细胞）的特征或功能进行多参数定性、定量分析和分选的新型 技术

流式细胞仪常检测的细胞特性细胞组成细胞功能大小细胞表面/胞浆/核-特异性抗原粒度细胞活性一细胞周期、凋亡DNA,RNA含量胞内细胞因子蛋白质含量激素结合位点酶活性钙离子，PH值，膜电位蛋白修饰

7 流式细胞仪常检测的细胞特性

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二、经典流式细胞仪（一）基本结构经典分析型的流式细胞仪的结构组成：1.液流系统：液流驱动系统、流动室、鞘液流和标本流。2.信号检测：光源、光束形成器（流动室前光学系统）、流动室后光学系统3.转换及放大系统：光电转换器、放大器和信号处理电路4.计算机分析系统5.分选型流式细胞仪分选系统：荧光激活细胞分选系统（FACS）9

9 二、经典流式细胞仪 （一）基本结构 经典分析型的流式细胞仪的结构组成： 1.液流系统：液流驱动系统、流动室、鞘液流和标本流。 2.信号检测：光源、光束形成器（流动室前光学系统）、 流动室后光学系统 3.转换及放大系统：光电转换器、放大器和信号处理电路 4.计算机分析系统 5.分选型流式细胞仪 分选系统：荧光激活细胞分选系统（FACS）

经典流式细胞仪的结构压缩气体计算机系统细胞悬液PO..O......0.....0..0调节阀调节阀鞘液红色荧光分光棱镜ORD绿色荧光光学系统0标本鞘液激光光源光形成器O垂直散射光液流系统电荷环o前向散射光Oi:iO电极偏转板福信号检测及光电转换系统细胞收集管废液分选系统10

10 经典流式细胞仪的结构