温州大学：材料工程实验教案（有机化学实验PPT）薄层色谱法

薄层色谱法

实验目的一>学习薄层色谱法的原理和使用方法>掌握薄层色谱分离和鉴定有机物的操作步骤

一、实验目的 ➢ 学习薄层色谱法的原理和使用方法。 ➢ 掌握薄层色谱分离和鉴定有机物的操作步骤

二、实验原理实验室常用的薄层色谱，其原理是利用混和物中各组分在不相混溶的两相：即流动相（展开剂）和固定相（吸附剂）中吸附和解吸的能力的不同，也可以说在两相中的分配不同，当混合物随流动相（展开剂）流过固定相（吸附剂）时，发生了反复多次的吸附和解吸的过程，从而使混合物分离成两种或多种单一的纯组分

二、实验原理 实验室常用的薄层色谱，其原理是利用混和物中 各组分在不相混溶的两相：即流动相（展开剂）和 固定相（吸附剂）中吸附和解吸的能力的不同，也 可以说在两相中的分配不同，当混合物随流动相 （展开剂）流过固定相（吸附剂）时，发生了反复 多次的吸附和解吸的过程，从而使混合物分离成两 种或多种单一的纯组分

三、主要仪器与试剂仪器：玻璃片等层析缸、试剂 :硅胶、羧甲基纤维素钠、环己烷、乙酸乙酯、偶氮苯、苏丹Ⅲ等

三、主要仪器与试剂 仪器： 层析缸、玻璃片等 试剂： 硅胶、羧甲基纤维素钠、环己烷、乙酸乙酯、偶氮苯、 苏丹Ⅲ等

四、实验步骤1、制板：将5g硅胶G在搅拌下慢慢加入12mL0.5%的羧甲基纤维素钠水溶液中，调成糊状，然后将其倒到在洁净的玻璃片上，用手轻轻振动，使涂层均匀平整，晾于。标准：无纹路，无团粒，无可看到玻璃的薄的涂料点薄层板的活化：薄层板经自然晾干后，再放入烘2.箱活化，进一步除去水分

四、实验步骤 1、制板：将5 g硅胶G在搅拌下慢慢加入12 mL 0.5% 的羧甲基纤维素钠水溶液中，调成糊状，然后将其 倒在洁净的玻璃片上，用手轻轻振动，使涂层均匀 平整，晾干。标准：无纹路，无团粒，无可看到玻 璃的薄的涂料点。 2、薄层板的活化：薄层板经自然晾干后，再放入烘 箱活化，进一步除去水分

3、点样：用铅笔在层析板上距末端1cm处轻轻画一横线，然后用毛细管吸取样液在横线上轻轻点样若颜色浅，可重复点样，需前次样点挥发干后进行。样点直径不应超过2mm，否则易拖尾影响测定。样点间距在1-1.5cm为宜，太近易重叠

3、点样：用铅笔在层析板上距末端1 cm处轻轻画一 横线，然后用毛细管吸取样液在横线上轻轻点样。 若颜色浅，可重复点样，需前次样点挥发干后进行。 样点直径不应超过2 mm，否则易拖尾影响测定。样 点间距在1-1.5 cm为宜, 太近易重叠

4、爬板：层析缸内壁贴一片环绕周长的滤纸，倒入展开剂，液面高度约5mm。滤纸下面浸入展开剂中以使层析缸被展开剂饱和。待样点干燥后，将层析板点样一段放入层析缸中，样点不得浸泡在展开剂中，盖好瓶盖。待展开剂上升至前沿约1cm处取出，迅速在展开剂最前沿处画一横线。晾干，量出展开剂和样点移动的距离5、计算比移值R，：R，=样点移动的距离/展开剂移动的距离

4、爬板：层析缸内壁贴一片环绕周长的滤纸，倒入 展开剂，液面高度约5 mm。滤纸下面浸入展开剂中， 以使层析缸被展开剂饱和。待样点干燥后，将层析 板点样一段放入层析缸中，样点不得浸泡在展开剂 中，盖好瓶盖。待展开剂上升至前沿约1 cm处取出， 迅速在展开剂最前沿处画一横线。晾干，量出展开 剂和样点移动的距离。 5、计算比移值Rf : Rf = 样点移动的距离/展开剂移动的距离

五、注意事项>画点样起点线时应尽量避免划破硅胶，直起点线离边缘的高度要大于展开瓶中的展开剂高度，以避免样点浸入展开剂>开始展开后，则不能再移动展开瓶>一根毛细管不能点多个样品>从展开瓶中拿出的薄层板应迅速划好终点线，否则展开剂挥发不利于计算比移值

五、注意事项 ➢ 画点样起点线时应尽量避免划破硅胶，且起点线离 边缘的高度要大于展开瓶中的展开剂高度，以避免样 点浸入展开剂。 ➢ 开始展开后，则不能再移动展开瓶。 ➢ 一根毛细管不能点多个样品。 ➢ 从展开瓶中拿出的薄层板应迅速划好终点线，否则 展开剂挥发不利于计算比移值

六、！思考题>试简述薄层色谱法在有机化学中的主要应用薄层色谱法主要包括哪些步骤？在一定的操作条件下为什么可以利用R，值来鉴定化合物？

➢ 试简述薄层色谱法在有机化学中的主要应用。 ➢ 薄层色谱法主要包括哪些步骤？在一定的操作条件 下为什么可以利用Rf值来鉴定化合物？ 六、思考题