《生物制品学》卡介苗

卡介苗

卡 介 苗

讲授内容 卡介苗的研制和使用 卡介苗的临床试验 造成卡介苗保护效力差异的主要因素 卡介苗对控制结核病的作用 分枝杆菌的DNA转移 分枝杆菌的载体系统 外源基因在BCG中的表达

讲授内容 • 卡介苗的研制和使用 • 卡介苗的临床试验 • 造成卡介苗保护效力差异的主要因素 • 卡介苗对控制结核病的作用 • 分枝杆菌的DNA转移 • 分枝杆菌的载体系统 • 外源基因在BCG中的表达

讲授内容 人型结核杆菌在BCG的表达 结核杆菌蛋白抗原是新型结核疫苗研制的 依据 结核杆菌的分泌型蛋白 结核杆菌短期培养的滤过后蛋白 具有保护作用的结核杆菌分泌蛋白 结核杆菌亚单位疫苗 结核DNA疫苗

讲授内容 • 人型结核杆菌在BCG的表达 • 结核杆菌蛋白抗原是新型结核疫苗研制的 依据 • 结核杆菌的分泌型蛋白 • 结核杆菌短期培养的滤过后蛋白 • 具有保护作用的结核杆菌分泌蛋白 • 结核杆菌亚单位疫苗 • 结核DNA疫苗

卡介苗的研制和使用 法国科学家 Calmette和 Guerin于1908年从患结核性 乳腺炎的奶牛身上分离到牛型结核杆菌,在含胆汁的土 豆甘油液体培养基中作连续传代培养的减毒试验。 他们将细菌每3个星期传代1次,在传了39代以后,结 核杆菌的菌落形态已发生了改变。 在传代的过程中,他们不断地测试细菌的毒力,直至 经过230次的传代和13年持之以恒的工作,终于在1921 年经动物实验证明这株牛型结核杆菌失去了毒力。更重 要的是,如果用这种细菌感染牛、豚鼠、小鼠、恒河猴 和猩猩都不能恢复其毒力,而且在30天以后用牛型或人 结核杄菌毒株进行攻击,动物都获得了保护。 这个菌苗被称作为卡介苗(BCG)

一、卡介苗的研制和使用 法国科学家Calmette和Guerin于1908年从患结核性 乳腺炎的奶牛身上分离到牛型结核杆菌，在含胆汁的土 豆甘油液体培养基中作连续传代培养的减毒试验。 他们将细菌每3个星期传代1次，在传了39代以后，结 核杆菌的菌落形态已发生了改变。 在传代的过程中，他们不断地测试细菌的毒力，直至 经过230次的传代和13年持之以恒的工作，终于在1921 年经动物实验证明这株牛型结核杆菌失去了毒力。更重 要的是，如果用这种细菌感染牛、豚鼠、小鼠、恒河猴 和猩猩都不能恢复其毒力，而且在30天以后用牛型或人 结核杆菌毒株进行攻击，动物都获得了保护。 这个菌苗被称作为卡介苗(BCG)

卡介苗首先于1921年在法国对1名新生儿进行 试验,在他出生后的第3天、第5天和第7天给予 口服卡介苗。这名婴儿的母亲在其出生后不久死 于结核病,以后他就和患有结核病的外祖母一起 生活。然而由于接种了卡介苗,他一生都没有得 结核病

卡介苗首先于1921年在法国对1名新生儿进行 试验，在他出生后的第3天、第5天和第7天给予 口服卡介苗。这名婴儿的母亲在其出生后不久死 于结核病，以后他就和患有结核病的外祖母一起 生活。然而由于接种了卡介苗，他一生都没有得 结核病

Calmette在1927年发表了长达7年的卡介苗临床试验 结果。 他从1921—1927年,对969名儿童口服接种卡介苗, 这些儿童的母亲大多数都患有结核病,或者他们的家庭 成员中有人患有结核病。经过长期观察,在这些儿童中 的结核病死亡率只有3.9%,然而在没有接种卡介苗的 儿童中的结核病死亡率却高达32.6%。1928年以后 卡介苗在全世界广泛使用 至今已在182个国家和地区,对40多亿的儿童接种了 卡介苗。根据WHO扩大计划免疫的要求,现在每年仍有 1亿多的新生儿接种卡介苗

Calmette在1927年发表了长达7年的卡介苗临床试验 结果。 他从1921—1927年，对969名儿童口服接种卡介苗， 这些儿童的母亲大多数都患有结核病，或者他们的家庭 成员中有人患有结核病。经过长期观察，在这些儿童中 的结核病死亡率只有3．9％，然而在没有接种卡介苗的 儿童中的结核病死亡率却高达32．6％。1928年以后， 卡介苗在全世界广泛使用。 至今已在182个国家和地区，对40多亿的儿童接种了 卡介苗。根据WHO扩大计划免疫的要求，现在每年仍有 1亿多的新生儿接种卡介苗

卡介苗菌种在早期是通过培养的方法进行传代和 保存的。这种方法一直沿用到20世纪60年代,结果 造成卡介苗菌种之间的差异性极大。表现在: 菌落的形态不同,培养基上活菌数的差异,生化 成分和活性、抗药性、对动物和人体的免疫原性以及 对动物的毒力等都有不同 1960年以后,冻干技术使得全世界的实验室都可 以制备一大批卡介苗的种子,然后用同一批的种子菌 苗来生产卡介苗,最多不能超过4代。这种方法保证了 卡介苗的稳定性

卡介苗菌种在早期是通过培养的方法进行传代和 保存的。这种方法一直沿用到20世纪60年代，结果 造成卡介苗菌种之间的差异性极大。表现在： 菌落的形态不同，培养基上活菌数的差异，生化 成分和活性、抗药性、对动物和人体的免疫原性以及 对动物的毒力等都有不同。 1960年以后，冻干技术使得全世界的实验室都可 以制备一大批卡介苗的种子，然后用同一批的种子菌 苗来生产卡介苗，最多不能超过4代。这种方法保证了 卡介苗的稳定性

丹麦哥本哈根的国立血清研究所承担了对卡 介苗进行国际性质量控制的任务。该所的卡介苗 哥本哈根株源于1931年法国巴斯德研究所的第 423代卡介苗。现在世界上普遍使用的3个卡介 苗菌种分别是:美国格兰素(Gaxo-1077)BCG 它是哥本哈根菌株的第1077代培养物;日本东 京(Tkyo-172)BCG,它来源于法国1925年的 种子BCG:还有法国巴斯德( Pasteur 1173P2)BCG。当今世界上使用的卡介苗中,90 6以上是用这3种BCG作为种子来生产的

丹麦哥本哈根的国立血清研究所承担了对卡 介苗进行国际性质量控制的任务。该所的卡介苗 哥本哈根株源于1931年法国巴斯德研究所的第 423代卡介苗。现在世界上普遍使用的3个卡介 苗菌种分别是：美国格兰素(Glaxo—1077)BCG， 它是哥本哈根菌株的第1 077代培养物；日本东 京(Tokyo—172)BCG，它来源于法国1925年的 种子BCG；还有法国巴斯德(Pasteur— 1173P2)BCG。当今世界上使用的卡介苗中，90 ％以上是用这3种BCG作为种子来生产的

卡介苗在早期是通过口服途径免疫的,这种 方法在某些地方一直延续到20世纪50年代 在口服卡介苗的4h以内, Calmette等观察到 血液中有卡介苗菌。这意味着疫苗可引起全身 反应,并能粘附或进入小肠的M细胞中去。现 在的电镜技术可显示在口服卡介苗的兔子肠道 淋巴组织的M细胞中有卡介苗细菌。然而由于 胃酸的作用,口服卡介苗的活菌数往往会减少1 2个对数值,这样就需要口服很大的剂量而造 成卡介苗的安全性问题

卡介苗在早期是通过口服途径免疫的，这种 方法在某些地方一直延续到20世纪50年代。 在口服卡介苗的4h以内，Calmette等观察到 血液中有卡介苗菌。这意味着疫苗可引起全身 反应，并能粘附或进入小肠的M细胞中去。现 在的电镜技术可显示在口服卡介苗的兔子肠道 淋巴组织的M细胞中有卡介苗细菌。然而由于 胃酸的作用，口服卡介苗的活菌数往往会减少1 －2个对数值，这样就需要口服很大的剂量而造 成卡介苗的安全性问题

GALT Structure Gut-associated by mphoid tissue Gut lumen Gut umen it epithelium (M cells dome T-cell Tcell area area germinal center follick (B-cell area) Gut wrall Gut wall 2000 Gar land Publishing/Elsevier Science

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