《普通植物病理学实验》实验十 孢子萌发和病原物的接种

实验十孢子萌发和病原物的接种

实验十 孢子萌发和病原物的接种

实验目的 了解病原菌生活力的强弱,存活期的长短,有 效传播距离,抗药性的大小,生活史,环境与 发病的关系以及有些病原菌的鉴定等,都必须 进行孢子萌发试验。 孢子能否萌发,萌发率的高低,萌发势的强弱 以及萌发的方式等既受病原菌自身内在的因素 影响,也受外界环境条件制约,因此要达到萌 发试验的目的,必须充分掌握萌发所需的各种 条件

了解病原菌生活力的强弱，存活期的长短，有 效传播距离，抗药性的大小，生活史，环境与 发病的关系以及有些病原菌的鉴定等，都必须 进行孢子萌发试验。 孢子能否萌发，萌发率的高低，萌发势的强弱 以及萌发的方式等既受病原菌自身内在的因素 影响，也受外界环境条件制约，因此要达到萌 发试验的目的，必须充分掌握萌发所需的各种 条件。 一、实验目的

通过人为作用使病原物与寄主植物感病部位接 触,创造条件使病原物侵入使寄主发病叫接种, 接种是证病过程的重要步骤,在研究植物病害 规律,测定品种抗病性,药剂防病效果时都需 要接种。因此,接种是植病工作者必须掌握的 基本技术。 本实验主要学习真菌孢子萌发以及植物病原物 常用的接种方法

通过人为作用使病原物与寄主植物感病部位接 触，创造条件使病原物侵入使寄主发病叫接种， 接种是证病过程的重要步骤，在研究植物病害 规律，测定品种抗病性，药剂防病效果时都需 要接种。因此，接种是植病工作者必须掌握的 基本技术。 本实验主要学习真菌孢子萌发以及植物病原物 常用的接种方法

二、孢子萌发的内容、材料和方法 ()孢子萌发的方法很多,常用的有以下几种: 1琼脂平板法 对于某些不适于直接在水滴中萌发的真菌可采 用此法。 取洁净的载玻片,在熔化并冷至50℃左右的 2%水琼脂培养基中沾一下,待凝成薄层后, 去掉一面琼脂培养基,将有琼脂培养基的一面 朝上,平放在培养皿内的“U”形玻棒上,皿底 衬上吸水滤纸保湿

(一) 孢子萌发的方法很多，常用的有以下几种： 1.琼脂平板法 对于某些不适于直接在水滴中萌发的真菌可采 用此法。 取洁净的载玻片，在熔化并冷至50℃左右的 2%水琼脂培养基中沾一下，待凝成薄层后， 去掉一面琼脂培养基，将有琼脂培养基的一面 朝上，平放在培养皿内的“U”形玻棒上，皿底 衬上吸水滤纸保湿。 二、孢子萌发的内容、材料和方法

再将小麦秆锈菌夏孢子或白粉菌的分生孢子轻 轻弹落或涂抹在琼脂平面上。保温培养,小麦 秆锈菌夏孢子培养在20℃温度下,小麦白粉病 分生孢子培养在10~12℃C下,2小时后镜检萌 发结果。 此法也可以直接在培养皿中做成的水球脂平板 上进行

再将小麦秆锈菌夏孢子或白粉菌的分生孢子轻 轻弹落或涂抹在琼脂平面上。保温培养，小麦 秆锈菌夏孢子培养在20℃温度下，小麦白粉病 分生孢子培养在10~12℃下，2小时后镜检萌 发结果。 此法也可以直接在培养皿中做成的水琼脂平板 上进行

2悬滴法 在清净的盖玻片中央,滴玉米大斑病菌孢子悬浮 液一滴,注意滴成圆形,大小适当,菌悬液浓度 以显微镜低倍镜头每个视野约20个孢子为宜。 然后翻转盖片制成悬滴,平放在培养皿内的“U” 形玻棒上,皿底衬上吸水滤纸保湿,盖好皿盖, 放置在26~28℃温箱中培养,4~5小时后检查萌 发结果

2.悬滴法 在洁净的盖玻片中央，滴玉米大斑病菌孢子悬浮 液一滴，注意滴成圆形，大小适当，菌悬液浓度 以显微镜低倍镜头每个视野约20个孢子为宜。 然后翻转盖片制成悬滴，平放在培养皿内的“U” 形玻棒上，皿底衬上吸水滤纸保湿，盖好皿盖， 放置在26~28℃温箱中培养，4~5小时后检查萌 发结果

(二)孢子萌发的记载方法 孢子萌发是先吸水膨胀,然后长出芽管,通常 以芽管长度超过孢子直径一半(不是正圆形的孢 子以短径为准作为萌发标准,记载项目有以下 几种

(二)孢子萌发的记载方法 孢子萌发是先吸水膨胀，然后长出芽管，通常 以芽管长度超过孢子直径一半(不是正圆形的孢 子以短径为准)作为萌发标准，记载项目有以下 几种:

(1)萌发率:即萌发一定时间后,随机取一定 数目至少500个)的孢子,检查萌发的孢子数, 求出萌发百分率,如果用该法记录两种或几种 不同处理时,要注意严格掌握检查时间。 (2)萌发时间:测定孢子萌发达到一定萌发率所 需的时间。 (3)芽管平均长度:测定一定数目已萌发孢子的 芽管长度,求其平均值

(1)萌发率： 即萌发一定时间后，随机取一定 数目(至少500个)的孢子，检查萌发的孢子数， 求出萌发百分率，如果用该法记录两种或几种 不同处理时，要注意严格掌握检查时间。 (2)萌发时间：测定孢子萌发达到一定萌发率所 需的时间。 (3)芽管平均长度：测定一定数目已萌发孢子的 芽管长度，求其平均值

三、植物病原物接种的内容、材 料和方油 (一)植物病害人工接种方法 人工接种方法是根据病害的传染方式和侵染途 径设计的,植物病害的种类很多、其传染方式 和侵染途径各异,因此接种方法也不相同

三、植物病原物接种的内容、材 料和方法 (一)植物病害人工接种方法 人工接种方法是根据病害的传染方式和侵染途 径设计的，植物病害的种类很多、其传染方式 和侵染途径各异，因此接种方法也不相同

(1)拌土法(小麦根腐病) 拌土法适于土壤传染的病害,方法是将消毒的 土壤分别装入两个小花盆中,其中一盆表层覆 以一厘米厚的菌土,菌土是用玉米砂培养菌1 份加消毒土5份混合而成,另一盆不接种(不覆 菌土作为对照。将经0.1%升汞表面消毒3分 钟并用无菌水洗3次的小麦种子,分别播种在 两个花盆内,插上标牌,注明接种日期,方法 病害名称及接种人姓名,花盆放在室温下,浇 水保湿,遮阴管理,待幼苗出土展开叶子后(大 约一周),观察并记载根腐病发生情况

(1)拌土法 (小麦根腐病) 拌土法适于土壤传染的病害，方法是将消毒的 土壤分别装入两个小花盆中，其中一盆表层覆 以一厘米厚的菌土，菌土是用玉米砂培养菌1 份加消毒土5份混合而成，另一盆不接种(不覆 菌土)作为对照。将经0.1%升汞表面消毒3分 钟并用无菌水洗3次的小麦种子，分别播种在 两个花盆内，插上标牌，注明接种日期，方法 病害名称及接种人姓名，花盆放在室温下，浇 水保湿，遮阴管理，待幼苗出土展开叶子后(大 约一周)，观察并记载根腐病发生情况