福建医科大学：《生物化学与分子生物学》课程教学课件（PPT讲稿）实验三 电泳技术原理及蛋白质的分离电泳

生物化学与分子生物学实验电泳技术蛋白质电泳分离

生物化学与分子生物学实验 电泳技术 蛋白质电泳分离

电泳（Electrophoresis)(一)定义■电泳一带电粒子在直流电场中向着电性相反电极移动的现象。■电泳分析技术一利用电泳现象进行物质分离的技术

（一）定义 ◼电泳—带电粒子在直流电场中向着电性 相反电极移动的现象。 ◼电泳分析技术—利用电泳现象进行物质 分离的技术。 电泳（Electrophoresis）

（二）电泳分析技术发展概况发现电泳现象Wieland滤纸电泳1809年1937年1948年1980年代毛细管电泳Tiselius自由界面电泳

（二）电泳分析技术发展概况 1937年 Tiselius自由界面电泳 毛细管电泳 1980年代 Wieland 滤纸电泳 1809年 1948年 发现电泳现象

（三）电泳分析技术的分类又称移动界面电泳，是指在没有支持介质的溶液自由界中进行的电泳。其装置复杂，价格昂贵，费时费面电泳力，不便于推广应用。是指有支持介质的电泳，待分离物质在支持介质电泳上分离成若干区带。支持介质的作用主要是防止区带电泳过程中的对流和扩散，以使被分离的成分得原理电泳到最大分辨率的分离稳态分子颗粒的迁移在一定的时间内即可达到稳态达到稳态后，带的宽度不随时间而改变电泳

（三）电泳分析技术的分类 分子颗粒的迁移在一定的时间内即可达到稳态， 达到稳态后，带的宽度不随时间而改变。 又称移动界面电泳，是指在没有支持介质的溶液 中进行的电泳。其装置复杂，价格昂贵，费时费 力，不便于推广应用。 自由界 面电泳 是指有支持介质的电泳，待分离物质在支持介质 上分离成若干区带。支持介质的作用主要是防止 电泳过程中的对流和扩散，以使被分离的成分得 到最大分辨率的分离 区带 电泳 稳态 电泳 电泳 原理

（三）电泳分析技术的分类电泳电压是否使用被分离样品pH是否连续的高低支持物的量多少分析电泳自由电泳连续pH电常压电泳泳0~500V制备电泳区带电泳高压电泳不连续pH电泳5003000V

（三）电泳分析技术的分类 • 分析电泳 • 制备电泳 • 常压电泳 0～500 V • 高压电泳 500 ～ 3000V • 自由电泳 • 区带电泳 电泳电压 的高低 被分离样品 的量多少 是否使用 支持物 • 连续pH电 泳 • 不连续pH 电泳 pH是否连续

（三）区带电泳的分类1.支持物的物理性状（1）滤纸及其它纤维电泳。（2）凝胶电泳（3）粉末电泳（4）线丝电泳

1.支持物的物理性状 （三）区带电泳的分类 （1）滤纸及其它纤维电泳。 （2）凝胶电泳 （3）粉末电泳 （4）线丝电泳

支持物的装置形式平板式电泳1analysis

① 平板式电泳 支持物的装置形式

支持物的装置形式垂直板式电泳999

② 垂直板式电泳 支持物的装置形式

支持物的装置形式垂直柱式电泳

③ 垂直柱式电泳 支持物的装置形式

ent电源：提供恒压或恒流DEZ1000xGSG50050皖A10

电源：提供恒压或恒流