福建医科大学：《医学免疫学》课程教学资源（实验课件）补体溶血实验——吞噬现象观察

[实验内容]1.补体的溶血作用（操作）月（示教）2.大小吞噬细胞的吞噬作用

[实验内容] 1.补体的溶血作用（操作） 2.大小吞噬细胞的吞噬作用（示教）

免疫应答类型屏障作用（如皮肤、粘膜血脑屏障、胎盘屏障固有免疫吞噬细胞吞噬作用补体、溶菌酶、乙型溶素等作用细胞免疫适应性免疫体液免疫

免疫应答类型 屏障作用（如皮肤、粘膜 血脑屏障、胎盘屏障） 吞噬细胞吞噬作用 补体、溶菌酶、乙型溶素等作用 细胞免疫 体液免疫 固有免疫 适应性 免疫

固有免疫一、国组织屏障及其作用1、皮肤黏膜及其附属成分的屏障作用物理屏障化学屏障微生物屏障2、血脑屏障3、血胎屏障

一、固有免疫 （ 一）组织屏障及其作用 1、皮肤黏膜及其附属成分的屏障作用 ▲ 物理屏障 ▲ 化学屏障 ▲ 微生物屏障 2、血脑屏障 3、血胎屏障

(二)固有免疫细胞吞噬细胞、NK细胞、NKT细胞、8T细胞、B1细胞等作用。(三) 固有免疫效应分子补体、细胞因子、防御素、溶菌酶、乙型溶素等及其作用

（二）固有免疫细胞 吞噬细胞、NK细胞、NKT细胞、T细胞、B1细 胞等作用。 （三）固有免疫效应分子 补体、细胞因子、防御素、溶菌酶、乙型溶素等及 其作用

补体的溶血作用1.补体系统（complementsystem）概念存在于正常人或动物血清及组织液中一组与免疫相关具有酶活性和自我调解作用的球蛋白。因它们能协助和补充特异性抗体介导的免疫溶菌、溶血作用，故称为补体。由30多种成分组成，部分成分遇热不稳定（56C加热30分钟即可灭活）。2.补体三条激活途径的比较：（page55）

补体的溶血作用  1.补体系统 (complement system)概念  存在于正常人或动物血清及组织液中一组与免疫相关 具有酶活性和自我调解作用的球蛋白。因它们能协助和补 充特异性抗体介导的免疫溶菌、溶血作用，故称为补体。 由30多种成分组成，部分成分遇热不稳定（56℃加热30 分钟即可灭活）。  2.补体三条激活途径的比较：(page 55)

抗原抗体复合物（IgG或lgM）经典途径C1激活的C1MBL途径C4+C2C4b2a3bC4b2a（C3转化酶）（C5转化酶）MBL激活+MASP病原体甘露糖残基C3C3bC5bC5b-9（攻膜复合物）C6C7C8C9C3bBbC3bBb3bC3C3bT（C3转化酶）（C5转化酶）B因子D因子旁路途径图5-6补体三条激活途径及共同未端效应全过程补体三条激活途径及共同末端效应全过程示意图

补体三条激活途径及共同末端效应全过程示意图

本次实验涉及的原理包（SRBC）+SRBC溶血素一—Ag-Ab（IC）绵羊红细胞识别：补体C1q与免疫复合物中抗体的补体C1q结合位点结合后，其分子构象发生改变，致C1r及C1s被激活。活化：C4、C2在激活C1的作用下分解产生C4b及C2a-C3分解产生C3b，与两者组成C4b2a，它为C3转化酶C4b2a结合形成C4b2a3b（C5转化酶）-C5分解产生C5b。膜攻击复合物形成：C5b进一步与C6、C7、C8、C9作用后，最终产生C5b6789（即膜攻击复合物，MAC），使SRBC穿孔，发生溶血反应

本次实验涉及的原理  绵羊红细胞（SRBC）+SRBC溶血素——Ag-Ab（IC）  识别：补体C1q与免疫复合物中抗体的补体C1q结合位点 结合后，其分子构象发生改变，致C1r及C1s被激活。  活化：C4 、C2在激活C1的作用下分解产生C4b及C2a， 两者组成C4b2a，它为C3转化酶——C3分解产生C3b，与 C4b2a结合形成C4b2a3b（C5转化酶）——C5分解产生 C5b。  膜攻击复合物形成：C5b进一步与C6、C7、C8、C9作用 后，最终产生C5b6789（即膜攻击复合物，MAC），使 SRBC穿孔，发生溶血反应

C5bC6.C7ceOSOoc9C9C8C9C9细胞膜细胞内膜攻击复合物（mebraneattackcomplex，MAC）结构示意图

膜攻击复合物（mebrane attack complex, MAC)结构示意图

Fig.3.19Electronmicrographsofthemembraneattackcomplex(MAC).Thecomplexconsistsofacylindricalpore,inwhichthewallsofthecylinder,formedbyC9,traversethe cell membrane.InthesemicrographsthehumanC5b-9complexhasbeenreincorporatedintoalecithinliposomalmembrane.x234000(CourtesyofProfessorJ.Tranum-JensenandDrS.Bhakdi.)膜攻击复合物电镜观察示意图

膜攻击复合物电镜观察示意图

补体的溶血作用原理SRBC（Ag）+ 溶血素（Ab）→Ag-Ab（IC)识别：C1q补体结合位点活化：膜攻击复合体（MAC）形成效应：溶血

• SRBC（Ag）+ 溶血素（ Ab） Ag-Ab（IC） • 识别： C1q 补体结合位点 • 活化：膜攻击复合体（MAC）形成 • 效应：溶血 原理 补体的溶血作用