大连医科大学：《形态学实验》课程教学资源（PPT讲稿）第七章 小鼠腹水型肝癌淋巴道转移实验研究（二）

第七章小鼠腹水型肝癌淋巴道转移实验研究（二）形态学实验室2026年1月28日

2026年1月28日 1 第七章 小鼠腹水型肝癌淋巴 道转移实验研究（二） 形态学实验室

实验目的1，通过可移植性小鼠腹水癌淋巴道转移实验，从感性上认识肿瘤侵袭与转移的生物学特性，了解肿瘤动物实验模型建立的过程及意义。2．进一步了解抽取腹水、细胞计数、细胞接种的过程。3.加深对学生科研思想的培养及实验技能的训练。22026年1月28日

2026年1月28日 2 1．通过可移植性小鼠腹水癌淋巴道转移实验，从感 性上认识肿瘤侵袭与转移的生物学特性，了解肿瘤 动物实验模型建立的过程及意义。 2．进一步了解抽取腹水、细胞计数、细胞接种的过 程。 3．加深对学生科研思想的培养及实验技能的训练。 实验目的

实验过程1.解剖小鼠取组织：于接种后21天断颈处死全部小鼠，取皮下瘤体及双侧有关淋巴结称重，同时观察肺、肝、肾等脏器。将上述组织固定于10%福尔马林固定液中。32026年1月28日

2026年1月28日 3 实验过程 1．解剖小鼠取组织： 于接种后21天断颈处死全部小鼠，取皮下瘤体及 双侧有关淋巴结称重，同时观察肺、肝、肾等脏 器。将上述组织固定于10%福尔马林固定液中

2.组织取材：将皮下瘤体、淋巴结、肺、肝、肾选取病变部位，切成厚约2~3mm的<2×1cm大小的组织块，10%中性福尔马林固定。小块组织一般固定数小时，较大标本需固定24~48小时。2026年1月28日

2026年1月28日 4 2．组织取材： 将皮下瘤体、淋巴结、肺、肝、肾选取病变 部位，切成厚约2~3mm的＜2×1cm大小的组织 块，10%中性福尔马林固定。小块组织一般固 定数小时，较大标本需固定24~48小时

3，切片制作：脱水程序及时间组织固定一冲洗①脱水→60%酒精30min+80%酒精1~2h↓2~4h或过夜95%酒精195%酒精2~4h+100%酒精2~4h+100%酒精2~4h或过夜52026年1月28日

2026 年 1 月28 日 5 3 ．切片制作：脱水程序及时间： 组织固定 →冲洗 ①脱水 → ↓ 60 %酒精 30min ↓ 80 %酒精 1 ~ 2 h ↓ 95 %酒精 2 ~ 4 h或过夜 ↓ 95 %酒精 2 ~ 4 h ↓ 100 %酒精 2 ~ 4 h ↓ 100 %酒精 2 ~ 4 h或过夜

②透明一二甲苯I30~45min↓二甲苯II30~45min③浸蜡一→蜡碗I、II、III（各30~45min）↓包埋1贴号④修蜡块一→↓切片③切片一→↓③烘烤切片→火烘烤切片60~70℃，1h+染色?染色一62026年1月28日

2026年1月28日 6 ②透明→ 二甲苯Ⅰ 30~45min ↓ 二甲苯Ⅱ 30~45min ③浸蜡→ 蜡碗Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ（各30~45min） ↓ 包埋 ↓ ④修蜡块→ 贴号 ↓ ⑤切片→ 切片 ↓ ⑥烘烤切片→ 烘烤切片 60~70℃，1h ↓ ⑦染色→ 染色