锦州医科大学：《分子医学实验技术》课程教学课件（讲稿）真核细胞基因组DNA提取

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真核基因组DNA提取及鉴定 分子医学实验教学平台 Jinzhou Medical University

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第一部分真核基因组DNA提取

真核基因组DNA提取 第一部分

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沉淀法裂解溶解核酸酚/氯仿抽提取上清离心洗涤吸附法裂解洗涤核酸洗脱核酸吸附磁珠法结合洗涤裂解加入磁珠溶解核酸

沉淀法 吸附法 磁珠法 裂解 核酸吸附 洗涤 核酸洗脱 裂解 加入磁珠 结合 洗涤 溶解核酸 裂解 酚/氯仿抽提 取上清离心 洗涤 溶解核酸 乙醇

锦州医科大学Jinzhou Medlcal Unlversty实验步骤实验目的实验原理实验材料实验结果如何利用吸附法对真核基因组进行提取？fluid-filledspacecell membraneqorganelles去除保留？nucleus福cytoplasmchromosomesorganelenica, Ine.11

11 Jinzhou Medical University 裂 解 实验目的 实验原理 实验材料 实验步骤 实验结果 如何利用吸附法对真核基因组进行提取？ 去除 保留

华州医科大学Jinzhou Medical Universtty实验结果实验目的实验原理实验材料实验步骤硅基质膜C上样离心离心8裂解液吸附洗涤洗脱纯化产物裂解：LysisBuffer离心：去除蛋白质等大分子洗脱：低盐高pH吸附：高盐低pH(EDTA,SDS,Tris-HCI)漂洗：去除金属离子等小分子蛋白酶KRNaseA12

12 Jinzhou Medical University 实验目的 实验原理 实验材料 实验步骤 实验结果 裂解：Lysis Buffer （EDTA,SDS,Tris-HCl） 蛋白酶K RNase A 离心：去除蛋白质等大分子 吸附：高盐低pH 漂洗：去除金属离子等小分子 洗脱：低盐高pH 硅基质膜

锦州医科大学Jinzhou Medlcal Untverstty实验结果实验目的实验原理实验材料实验步骤真核基因组DNA提取试剂成分作用试剂名称抑制DNaseEDTALysis BufferSDS破坏膜结构，并使蛋白质变性从而与DNA分子分离提供合适的裂解环境Tris-HCI蛋白酶K消化降解蛋白成小肽ProteinaseKRNaseA去除RNA污染乙醇、水WashBuffer去除盐离子等小分子杂质Elution BufferTris、EDTA(TE)洗脱溶解核酸13

13 Jinzhou Medical University 真核基因组DNA提取试剂 试剂名称 成分 作用 Lysis Buffer EDTA 抑制DNase SDS 破坏膜结构，并使蛋白质变性从而与DNA分子分离 Tris-HCl 提供合适的裂解环境 Proteinase K 蛋白酶K 消化降解蛋白成小肽 RNase A 去除RNA污染 Wash Buffer 乙醇、水 去除盐离子等小分子杂质 Elution Buffer Tris、EDTA（TE） 洗脱溶解核酸 实验目的 实验原理 实验材料 实验步骤 实验结果

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14 Jinzhou Medical University 实验目的 实验原理 实验器材 实验步骤 实验结果 微量移液器 研钵 吸头盒 吸头 低温高速离心机 恒温水浴箱

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15 Jinzhou Medical University 实验目的 实验原理 实验材料 实验步骤 实验结果 EP管 离心柱管 离心柱+套管 离心管架