中山大学：《分子医学》课程教学课件（讲稿）分子克隆载体

分子克隆裁体

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基因载体是一类能自我复制的DNA分子，其中的一段DNA被切除而不影响其复制，可用以置换或插入外源（目的）DNA而将目的DNA带入宿主细胞常用的载体有质粒、噬菌体、病毒TAAGTCGAATTOEcORICTTAACCAATTC

基因载体是一类能自我复制的 DNA 分子，其中的 一段 DNA被切 除而不影响其复制，可用以置换或插 入外源 (目的 ) DNA 而将目的 DNA带入 宿主细胞。 常用的载体有质粒、噬菌体、病毒

基因工程的表达体系操纵子理论在基因工程中的应用目的基因翻译表达及其准确性常用基因载体

基因工程的表达体系 操纵子理论在基因工程中的应用 目的基因翻译表达及其准确性 常用基因载体

基因工程的表达体系

原核生物表达体系：大肠杆菌、枯草杆菌、农杆菌

原核生物表达体系： 大肠杆菌 、 枯草杆菌、农杆菌

大肠杆菌表达体系的优点：1）积累了充足经验，有数不清的载体可供应用；（2）对其研究充分，可依载体选择不同菌种作宿主；(3)操作安全，致病能力低；(4）成本相对低得多

大肠杆菌表达体系的优点： (1)积累了充足经验，有数不清的载体可供应 用； (2) 对其研究充分 ,可 依载体选择不同菌种作宿 主； (3) 操作安全，致病能力低 ； (4) 成本相对低得多

缺点：(1)原核生物与真核生物有不同的酶系统和基因调控方式;(2)没有加工所需的酶系统;(3)糖基化问题(4)热源、内毒素不易除去；（5）常会形成包涵体

缺点： (1)原核生物 与真核生物有不同的酶系统和基因调控方 式； (2)没有加工 所需的酶系统； (3)糖基化问 题 ; (4)热源、内 毒素不易除去 ； (5)常会形成 包涵体

表达体系的发展载体宿主表达体细菌第一代质粒、噬菌体原核生物表达体系酵母第二代酵母表达体系穿梭质粒培养细胞第三代哺乳类细胞表达体系病毒、脂质体DNA本身生殖细胞、第四代基因直接导入体细胞、个体

表达体系的发展 表达体 载体 宿主 第一代 原核生物表达体系 质粒、噬菌体 细菌 第二代 酵母表达体系 穿梭质粒 酵母 第三代 哺乳类细胞表达体系 病毒、脂质体 培养细胞 第四代 基因直接导入 DNA 本身 生殖细胞、 体细胞、个体

操纵子理论在基因工程的应用