辽宁大学：《仪器分析实验》课程教学资源（PPT讲稿，共八个实验，适用专业：制药工程）

实验一维生素B12注射液的鉴别和测定

实验一 维生素B12注射液的鉴别和测定

实验目的：>1掌握紫外可见分光光度计的使用方法>2.掌握维生素B12注射液的鉴别和含量测定的原理和方法。>3.熟悉绘制吸收曲线的一般方法

实验目的： ➢1掌握紫外可见分光光度计的使用方法。 ➢2.掌握维生素B12注射液的鉴别和含量测定的 原理和方法。 ➢3.熟悉绘制吸收曲线的一般方法

实验原理：>1.维生素B12是含钴的有机药物，为深红色结晶，本实验用维生素B12的水溶液，浓度约100ug/ml，水为空白，绘制紫外-可见光区吸收曲线。掌握紫外可见分光光度计的使用方法。>2.掌握维生素B12注射液的鉴别和含量测定的原理和方法。>3.熟悉绘制吸收曲线的一般方法

实验原理： ➢1.维生素B12是含钴的有机药物，为深红色结晶， 本实验用维生素B12的水溶液，浓度约100ug/ml， 水为空白，绘制紫外-可见光区吸收曲线。掌握紫 外可见分光光度计的使用方法。 ➢2.掌握维生素B12注射液的鉴别和含量测定的原理 和方法。 ➢3.熟悉绘制吸收曲线的一般方法

实验原理：>4.维生素B1.吸收光谱上有三个吸收峰：278nm±1nm361nm±1nm与550nm±1nm，求出其相应的吸光系数，用它们的比值来进行鉴别在361nm的吸收峰干扰因素少，吸收又最强，中国药典规定以361nm土lnm处吸收峰的比吸光系数E值(207)为测定注射液含量的依据

实验原理： ➢4.维生素B12吸收光谱上有三个吸收峰： 278nm±1nm、361nm±1nm与550nm±1nm，求 出其相应的吸光系数，用它们的比值来进行鉴别。 在361nm的吸收峰干扰因素少，吸收又最强，中国 药典规定以361nm±lnm处吸收峰的比吸光系数E值 (207)为测定注射液含量的依据

实验步骤：>1.定量测定设鉴别项下在361nm1nm波长测得的吸光度为A样，试液中维生素B12的浓度C(ug/ml)则可按下式计算：C B12 (ug / ml) = A样*48.31以上计算式可由下法导出：根据朗伯-比尔定律A=ECIC B12 (g / 100ml) =A样/EI=A样/ 207,得 :C B12 (ug / ml) = A样/ 207*(106/100)= A样*48.31

实验步骤： ➢1.定量测定 设鉴别项下在361nm±1nm波长测得的吸光度为A样， 试液中维生素B12的浓度C (ug／m1)则可按下式计算： C B12 (ug／m1) = A样*48.31 以上计算式可由下法导出： 根据朗伯-比尔定律 A = ECl C B12 (g／100m1) = A样/ El= A样/ 207, 得： C B12 (ug／m1) = A样/ 207*(106/100)= A样*48.31

思考题：>1：单色光不纯对于测得的吸收曲线有何影响？>2·利用邻组同学的实验结果，比较同一溶液在不同仪器上测得的吸收曲线的形状、吸收峰波长以及相同浓度的吸光度等有无不同，试作解释>3：比较用吸光系数和校正曲线定量方法，你认为哪种方法更好？为什么？>4：本次实验在278nm±1nm361nm±1nm与550nm土1nm处求得的吸光系数，能否作为维生素B12的普适常数?为什么？

思考题： ➢1．单色光不纯对于测得的吸收曲线有何影响? ➢2．利用邻组同学的实验结果，比较同一溶液在不 同仪器上测得的吸收曲线的形状、吸收峰波长以及 相同浓度的吸光度等有无不同，试作解释。 ➢3．比较用吸光系数和校正曲线定量方法，你认为 哪种方法更好?为什么? ➢4．本次实验在278nm±1nm、361nm±1nm与 550nm±1nm处求得的吸光系数，能否作为维生素 B12的普适常数?为什么?

实验二硫酸奎宁的激发光谱和发射光谱的测定

实验二 硫酸奎宁的激发光谱和发射光谱的测定

实验目的：>1：掌握激发光谱和发射光谱的概念及其测定方法>2.熟悉荧光分光光度计的基本原理和实验技术。>3：了解荧光分光光度计的使用方法

实验目的： ➢1．掌握激发光谱和发射光谱的概念及其测定方法。 ➢2．熟悉荧光分光光度计的基本原理和实验技术。 ➢3．了解荧光分光光度计的使用方法

实验原理：>任何荧光物质都具有两种特征光谱：激发光谱和发射光谱。物质的激发光学谱和发射光谱是定性分析的依据，也是定量测定时选择激发波长入ex和发射波长入em的依据。在荧光分析法中，一般最大激发波长入ex和最大发射波长入em是最灵敏的光谱条件

实验原理： ➢任何荧光物质都具有两种特征光谱：激发光谱和 发射光谱。物质的激发光学谱和发射光谱是定性分 析的依据，也是定量测定时选择激发波长λex和发 射波长λem的依据。在荧光分析法中，一般最大激 发波长λex和最大发射波长λem是最灵敏的光谱条 件

实验原理：>可以用荧光分光光度计测量其激发光谱和发射光谱。另外，在荧光分析法中，常采用其一定浓度的标准溶液来校准仪器在紫外-可见光范围内的灵敏度

实验原理： ➢可以用荧光分光光度计测量其激发光谱和发射光 谱。另外，在荧光分析法中，常采用其一定浓度的 标准溶液来校准仪器在紫外-可见光范围内的灵敏度