新乡医学院：《毒理学》课程教学资源（课件讲稿，打印版）实验四 急性经口毒性实验

急性经口毒性试验

急性毒性试验 ·实验动物的选择（物种和品系，年龄和体 重，性别，分组，预检，禁食)(who?) ·受试物(what?) ·染毒方法how?) ·剂量选择(how?) ·毒性作用观察ending)

一、实验目的 ·1.学习急性毒性试验的实验设计原则 ·2.掌握灌胃技术，随机分组方法 ·3.掌握LD50的计算方法 ·4.观察和描述受试物的中毒特征 ·5.掌握急性毒性分级标准

急性毒性作用： 指机体一次接触或24小时内多次接触化学物后 在短期（最长到14天）内所发生的毒性效应，包 括一般行为、外观改变、大体形态变化以及死亡 效应

LD5o:半数致死剂量 指引起一组受试实验动物半数死亡的剂量。常 用以表示急性毒性的大小。 其值越小，表示外源化学物的毒性越强；反之， 毒性越低。 LDso是经过统计学计算得到的毒性参数，是一 个统计量，受实验动物个体易感性差异的影响较 小，因此是最重要的急性毒性参数

二、实验原理 选择健康的实验动物，根据体重按随机分组的方 法，依据LD50计算的设计原则将动物分成数个染毒组。 给予受试物后，了解动物所产生的急性毒性反应及其 严重程度，中毒死亡的特征以及可能的死亡原因，观 察受试物毒性唇应与剂量的关系，求共半数致死剂量 (LDs0),并根据LD5O值将受试物进行急性毒性分级。 本次实验采用改进寇民法。 改进寇氏法：利用剂量对数与死亡率呈$型曲线 而设计的方法。要求如下： 每个染毒剂量组动物数相同， 各剂量组组距呈等比级数， 死亡率呈正态分布， 最低剂量组死亡率80%

三、材料和试剂 1.实验动物：健康成年小鼠，昆明种，普通级，雌 雄各60只 2器材：灌胃针，注射器，吸管，容量瓶，滴管， 动物体重秤等 3.试剂：受试物为1.3g/ml敌敌畏油溶液（湖北荆 州)，植物油，苦味酸（染色标记）

四、操作步骤 1.实验动物选择：昆明种小鼠，雌雄各60（上午） 2.实验动物的随机分组和标记（上午） 3.剂量设计及受试物配制（上午） 4.经口染毒（下午） 5.中毒体征和动物死亡情况观察记录（下午） 6.LD50的计算（次日下午） 7.结果评价、完成实习报告（次日下午）

实验动物的随机分组 雌雄分开分组，每种性别分6组，每组10只 1.动物称重：按体重分在不同笼中待分组 24g 2.随机分组方法 每种性别随机分为6组：A、B、C、D、E,F,每轮分别从笼中取一只动 物按如下顺序到各组，直到动物取完。（雌雄分别分组） 第一轮：A、B、C、D、E、F 第二轮：B、C、D、E、F、A 第三轮：C、D、E、F、A、B 第四轮：D、E、F、A、B、C 第五轮：E、F、A、B、C、D 第六轮：F、A、B、C、D、E 雌雄各5组为剂量组，各剩一组作为溶剂对照（只灌植物油）和备用。 分完组后在笼子上做好标记，动物暂不标记，下午灌胃前再标记

剂量设计 预实验得出LD1o0、LD0,各设置五个剂量组，n=5 i=(lg LD100-lg LDo)/(n-1),k=10i 雌性： 雄性： LD100=240mg/kg LD100=250mg/kg LDo=90mg/kg LDo=100mg/kg