《分析化学》课程教学课件（PPT讲稿）实验十一 维生素B12的吸收曲线绘制及注射液的含量测定

实训十一维生素B的吸收曲线绘制及注射液的含量测定一、实验目的1、掌握752型分光光度计的使用方法。2、掌握注射剂含量的测定和计算方法。3、熟悉测绘吸收曲线的一般方法

实训十一 维生素B12的吸收曲线绘制 及注射液的含量测定 一、实验目的 1、掌握752型分光光度计的使用方法。 2、掌握注射剂含量的测定和计算方法。 3、熟悉测绘吸收曲线的一般方法

实训十一丝维生素B,的吸收曲线绘制及注射液的含量测定实验原理1、将不同波长的单色光依次通过待测液，测得不同波长下的吸光度A，，以波长入为横坐标，以吸光度A为纵坐标描绘吸收曲线。2、Bz在361nm处有最大吸收，在入max处测得A。A1×稀释倍数XE1%1001cmVB.标示量%=×100%标示量（g/mL）

二、实验原理 1、将不同波长的单色光依次通过待测液，测得不同 波长下的吸光度A，以波长λ为横坐标，以吸光度A为 纵坐标描绘吸收曲线。 实训十一 维生素B12的吸收曲线绘制 及注射液的含量测定 2、B12在361nm处有最大吸收，在λmax处测得A。 100% / 100 1 1% 1 1 2    标示量（ ） 稀释倍数 标示量％＝ g m L E A V cm B

实训十一维生素Bi的吸收曲线绘制及注射液的含量测定三、实验资源1、仪器：752型紫外一可见分光光度计2、试剂： 25mg/L维生素B12水溶液,维生素B12注射液(市售品)。……

三、实验资源 1、仪器：752型紫外－可见分光光度计 2、试剂：25mg/L维生素B12水溶液， 维生素B12注射液(市售品)。. 实训十一 维生素B12的吸收曲线绘制 及注射液的含量测定

实训十一维生素B1的吸收曲线绘制及注射液的含量测定四、实验步骤1、吸收曲线的绘制25mg/L维生素B,溶液置于1cm比色血中，以蒸馏水为空白溶液，在不同波长(340nm~580nm之间，其中从350nm~370nm和540~560nm每间隔5nm测量一次，其余每间隔20nm测量一次吸光度）下测量相应的吸光度。然后以波长为横坐标，吸光度为纵坐标绘出吸收曲线

四、实验步骤 25mg/L维生素B12溶液置于1cm比色皿中，以蒸馏水为 空白溶液，在不同波长(340nm~580nm之间，其中从 350nm~370nm和540~560nm每间隔5nm测量一次，其 余每间隔20nm测量一次吸光度)下测量相应的吸光度。 然后以波长为横坐标，吸光度为纵坐标绘出吸收曲线。 1、吸收曲线的绘制 实训十一 维生素B12的吸收曲线绘制 及注射液的含量测定

实训十一维生素B1的吸收曲线绘制及注射液的含量测定四、实验步骤2、维生素B1注射液含量测定将25mg/L维生素B2溶液置于1cm石英比色血中,在361nm波长条件下以蒸馏水作为空白测定吸光度A，按%为207计算维生C63H88CoN14O14P的百分吸收系数E1cm素B12标示量的百分含量

四、实验步骤 2、维生素B12注射液含量测定 将25mg/L维生素B12溶液置于1cm石英比色皿中,在 361nm波长条件下以蒸馏水作为空白测定吸光度A，按 C63H88CoN14O14P的百分吸收系数E 为207计算维生 素B12标示量的百分含量。 实训十一 维生素B12的吸收曲线绘制 及注射液的含量测定 1cm 1%

实训十一维生素B的吸收曲线绘制及注射液的含量测定五、实验数据记录与处理编号321项目1%207E(100mlg-l.cm-)1cm吸光度AVB12标示量(%)VBl,标示量(%)

五、实验数据记录与处理 实训十一 维生素B12的吸收曲线绘制 及注射液的含量测定 1 2 3 E （100ml·g-1·cm-1） 207 吸光度A VB12标示量（%） VB12标示量（%） 1% 1cm 编号 项目