上海交通大学：《生物技术与人类》通识课程教学资源（课堂讨论PPT）动物细胞工程——动物细胞培养技术

动物细胞工程 动物细胞培养 技术

动 物 细 胞 工 程 -动物细胞培养 技术

动物细胞工程 的基础 动物细胞与组织培养 动物 动物细胞融合 细胞 单克隆抗体制备 工程 技术 细胞核移植 体细胞克隆 photeh9t.en20707172024g0721

+动物细胞培养技术 (一)概念：是指从动物体内取出相关的组织，将他分散成单个细胞， 然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖培养获得目的细 胞或细胞产物的技术。 原代培养：从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。一般培养的第一代细胞与传代以 内的细胞称为原代细胞培养 传代培养：将原代细胞从培养瓶中取出，配置成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的培养瓶 中继续培养，称为传代培养 二)原理 细胞分裂增殖

动物细胞培养技术 (一) 概念：是指从动物体内取出相关的组织，将他分散成单个细胞， 然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖培养获得目的细 胞或细胞产物的技术。 (二) 原理 细胞分裂增殖 原代培养：从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。一般培养的第一代细胞与传代以 内的细胞称为原代细胞培养 传代培养：将原代细胞从培养瓶中取出，配置成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的培养瓶 中继续培养，称为传代培养

动物细胞特点 •进化度高 ·结构，形态，成分复杂 •细胞间连接形式多样 ·生长相对缓慢 ·功能全面

动物细胞特点 • 进化度高 • 结构，形态，成分复杂 • 细胞间连接形式多样 • 生长相对缓慢 • 功能全面

动物细胞生长特点 1细胞贴壁： 悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。 2.细胞的接触抑制 当贴壁细胞分裂生长到表面互相接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象 就称为细胞的接触抑制

动物细胞生长特点 1.细胞贴壁： 悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。 2.细胞的接触抑制 当贴壁细胞分裂生长到表面互相接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象 就称为细胞的接触抑制

(三)动物细胞培养过程 动物组织细胞间隙中含有 一定量的弹性纤维等蛋白 质 取动物器官 和组织 胰蛋白酶处理 单个细胞 幼龄动物 剪碎组织 的例线融的性惠月装置白期处清 计领成中个理L制文延后北看 胰蛋白酶处理 酸蛋白 单个细胞 原代细胞培养 细胞悬浮液 传代细胞培养

（三）动物细胞培养过程 动物组织细胞间隙中含有 一定量的弹性纤维等蛋白 质

归纳 取 动物胚胎或幼龄动物 的组织、器官 过程 胰蛋白酶 单个细胞 加入培养 液 细胞在贴壁生长过程中，随着细胞 分裂，数量不断增加，最后形成一 个单层，此时，细胞间相互接触， 细胞分裂和增长停止。 细胞悬浮液 接触抑制 原代 贴满瓶壁的细胞 培养（分装前） 10代以内细胞生长保 持正常 1-10代细胞

细胞在贴壁生长过程中，随着细胞 分裂，数量不断增加，最后形成一 个单层，此时，细胞间相互接触， 细胞分裂和增长停止。 10代以内细胞生长保 持正常

遗传物质 原代细胞 未改变 胰蛋白酶 传代培养 细胞失去接触抑制，细 加 培养液 胞增殖缓慢，核型已经 发生变化 40一50代细胞（细胞株） 遗传物质 已 改变 无限传代（细胞系）

细胞失去接触抑制，细 胞增殖缓慢，核型已经 发生变化

有关概念 细胞株：原代细胞一般传至10代左右细胞后生长停滞，大部分细胞衰老死亡， 少数细胞存活到40-50代，这种传代细胞为细胞株。 细胞系：细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态，只有部分细胞由于遗 传物质的改变，使其在培养条件下可以无限制传代，这种传代细胞为细胞系。 细胞株与细胞系的区别：细胞系的遗传物质改变，具有癌细胞 的特点，失去接触抑制，容易传代培养

有关概念 细胞株：原代细胞一般传至10代左右细胞后生长停滞，大部分细胞衰老死亡， 少数细胞存活到40-50代，这种传代细胞为细胞株。 细胞系：细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态，只有部分细胞由于遗 传物质的改变，使其在培养条件下可以无限制传代，这种传代细胞为细胞系。 细胞株与细胞系的区别：细胞系的遗传物质改变，具有癌细胞 的特点，失去接触抑制，容易传代培养

四，动物细胞培养的条件 1无菌，无毒的环境 添加一定量的抗生素，定期更换培养液 保证细胞的 顺利生长增 2.营养 殖 添加：糖（葡萄糖)，氨基酸，促生长因子，无机盐，微量元素，动物血清等。 3.温度和PH 培养室中控制温度和PH,使之达到 36.5+-0.5C,7.27.4 4.气体环境： 培养箱中提供02和C02(95%空气和5%二氧化碳)

四，动物细胞培养的条件 1.无菌，无毒的环境 添加一定量的抗生素，定期更换培养液 2.营养 添加：糖（葡萄糖），氨基酸，促生长因子，无机盐，微量元素，动物血清等。 保证细胞的 顺利生长增 殖 3.温度和PH 培养室中控制温度和PH，使之达到 36.5+-0.5℃，7.2~7.4 4.气体环境： 培养箱中提供O2和CO2(95%空气和5%二氧化碳)