《医学分子生物学 Molecular Biology in Medicine》课程PPT教学课件：第十章 核酸分子的杂交技术

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反式作用因子特点: ①三个功能结构域:DNA识别结合域; 转录活性域; 结合其他蛋白的结合域 ②能识别并结合顺式作用元件 ③正调控与负调控

反式作用因子特点： ①三个功能结构域：DNA识别结合域； 转录活性域； 结合其他蛋白的结合域 ②能识别并结合顺式作用元件 ③正调控与负调控

顺式作用元件 结构基因 GCGC-CAATETATA 外显子内含子外显子 转录起始 TATA盒 增强子 CAAT盒 GC盒

结构基因 GCGC CAAT TATA 外显子 内含子 外显子 转录起始 CAAT盒 GC盒 增强子 顺式作用元件 TATA盒 (Hogness box)

第十章棱酸分子杂技术 核酸分子杂交的基本原理 核酸分子杂交的基本方法 探针的标记

第十章 核酸分子杂交技术 • 核酸分子杂交的基本原理 • 核酸分子杂交的基本方法 • 探针的标记

第一节核酸分子杂交的基本原理 核酸分子杂交的基本原理:具有 互补序列的两条核酸单链在一定 条件下,按碱基配对原则形成双 链的过程 探针

第一节 核酸分子杂交的基本原理 • 核酸分子杂交的基本原理：具有 互补序列的两条核酸单链在一定 条件下，按碱基配对原则形成双 链的过程。 • 探针

Hybridization of Nucleic Acids DNA1 DNAZ DNA RNA 探针 Northern Southern hybridization hybridization Juang RH (2004)BCbasics

Hybridization of Nucleic Acids RNA DNA1 DNA2 DNA Southern hybridization Northern hybridization Juang RH (2004) BCbasics 探针

DNA变性与复性 1DNA变性 ①定义:氢键断裂,单链 ②方法热变性:90~100℃熔解温度(Tm) 酸碱变性:常采用碱变性 化学试剂变性;尿素、甲醛等 2DNA复性(退火) DNADNA, DNARNA, RNARNA

一、DNA变性与复性 1.DNA变性 ①定义：氢键断裂，单链 ②方法:热变性: 90~100℃ 熔解温度(Tm) 酸碱变性:常采用碱变性 化学试剂变性;尿素、甲醛等 2.DNA复性(退火) DNA/DNA，DNA/RNA，RNA/RNA

退火 退火 双螺旋DNA 加热 部分解链加热 单股随机卷曲 图7-1DNA变性和复性