复旦大学：《细胞生物学实验 Experiments of Cell Biology》课程教学资源（讲义）福尔根（Feulgen）染色

实验 福尔根( Feulgen)染色 13/03/2019 细胞生物学实验 Cell Biology Experiment

13/03/2019 细胞生物学实验 Cell Biology Experiment 1 福尔根（Feulgen）染色 实验二

实验目的 1、以 Feulgen染色法为例学习细胞化 学 方法检测细胞核DNA的原理和方法; 2、观察DNA在细胞内的分布。 13/03/2019 细胞生物学实验 Cell Biology Experiment

13/03/2019 细胞生物学实验 Cell Biology Experiment 2 实验目的 1、以Feulgen染色法为例学习细胞化学 方法检测细胞核DNA的原理和方法； 2、观察DNA在细胞内的分布

背景和故事 什么是细胞化学? 细胞化学是指在保持细胞原有形 态结构的基础上,利用物理的、化学 的或者免疫学的方法,原位显示某种 物质的分布和含量,从而研究与其相 关的机能活动的科学。 13/03/2019 细胞生物学实验 Cell Biology Experiment

背景和故事 13/03/2019 细胞生物学实验 Cell Biology Experiment 3 什么是细胞化学？ 细胞化学是指在保持细胞原有形 态结构的基础上，利用物理的、化学 的或者免疫学的方法，原位显示某种 物质的分布和含量，从而研究与其相 关的机能活动的科学

故事 DNA的发现与认识 困惑 900 年 1850-1900 染色体的行为 1948年 减数分裂 染色体的本质和作用是什么? 豌豆杂交实验 孟德尔定律 减数分裂与孟德尔分离相一致 1900年再发现 遗传因子”带在染色体上吗 “遗传因子”的本质又是什么呢? 13/03/2019 细胞生物学实验 Cell Biology Experiment

13/03/2019 细胞生物学实验 Cell Biology Experiment 4 1948年 紫鸭齿草花粉母细胞 染色体 故事：DNA的发现与认识 1900年- 染色体的行为 减数分裂 1856-1864年 豌豆杂交实验 孟德尔定律 1900年再发现 染色体的本质和作用是什么？ 减数分裂与孟德尔分离相一致 “遗传因子”带在染色体上 吗？ “ 遗传因子”的本质又是什么呢？ 困惑 1850-1900

枚闺 DNA的发现与认识 解困 1924-1953 1900年 染色体的行为 1869年 1848年 减数分裂 绷带脓细胞 核酸 1924年 Feulgen反应 1879年 豌豆杂交实验 4种碱基、2种核糖 孟德尔定律 DNA RNA 1900年再发现 DNA位于 细胞核和染色体! 肺炎双球菌实验 1953年 1944年 R株(无毒)+S株有毒,加热杀死 DNA 纯化得到的转化因子 DNA可能是遗传因子」 感染小鼠死亡 双螺旋结构经DNA酶后失去 因子 定性 转化能力 染色体可能是遗传因子的载体09 13/03/2019 细胞

13/03/2019 细胞生物学实验 Cell Biology Experiment 5 2019/3/13 1848年 紫鸭齿草花粉母细胞 染色体 故事：DNA的发现与认识 1900年- 染色体的行为 减数分裂 1856-1864年 豌豆杂交实验 孟德尔定律 1900年再发现 1869年 绷带脓细胞 核酸 1879年- 4种碱基、2种核糖 DNA, RNA 解困 1924-1953 1924年 Feulgen反应 DNA 位于 细胞核和染色体！ DNA可能是遗传因子 染色体可能是遗传因子的载体 1928年 肺炎双球菌实验 R株(无毒)+ S株(有毒，加热杀死) 感染小鼠死亡 转化因子具热稳定性 1944年 纯化得到的转化因子 经DNA酶后失去 转化能力 1953年 DNA 双螺旋结构

Feulgen反应 确定了DNA存在于细胞核和染色体 为DNA的生物学功能研究引导了方向。C 13/03/2019 细胞生物学实验 Cell Biology Experiment

13/03/2019 细胞生物学实验 Cell Biology Experiment Feulgen反应 确定了DNA存在于细胞核和染色体； 为DNA的生物学功能研究引导了方向

1.在水解过程中,DNA经过加热的弱酸水解 后,分子中的嘌呤和脱氧核糖间的糖苷键被 切断,并且脱氧核糖与磷酸间的磷酯键断开, 脱氧核糖的一端释放岀游离的醛基 反应过程(动画) A/G T/C 13/03/2019 细胞生物学实验 Cell Biology Experiment

13/03/2019 细胞生物学实验 Cell Biology Experiment 7 1.在水解过程中，DNA经过加热的弱酸水解 后，分子中的嘌呤和脱氧核糖间的糖苷键被 切断，并且脱氧核糖与磷酸间的磷酯键断开， 脱氧核糖的一端释放出游离的醛基。 反应过程（动画） H+ H+ H+ H+ H+

1.在水解过程中,DNA经过加热的弱酸水解 后,分子中的嘌呤和脱氧核糖间的糖苷键被 切断,并且脱氧核糖与磷酸间的磷酯键断开, 脱氧核糖的一端释放岀游离的醛基 反应过程(动画) C-OH A/G OH T/C OH 13/03/2019 细胞生物学实验 Cell Biology Experiment

13/03/2019 细胞生物学实验 Cell Biology Experiment 8 1.在水解过程中，DNA经过加热的弱酸水解 后，分子中的嘌呤和脱氧核糖间的糖苷键被 切断，并且脱氧核糖与磷酸间的磷酯键断开， 脱氧核糖的一端释放出游离的醛基。 反应过程（动画） OH OH H+ H+ H+ H+ H+ C-OH

1.在水解过程中,DNA经过加热的弱酸水解 后,分子中的嘌呤和脱氧核糖间的糖苷键被 切断,并且脱氧核糖与磷酸间的磷酯键断开, 脱氧核糖的一端释放岀游离的醛基 反应过程(动画) C-OH A/G CHO T/C CHO 13/03/2019 细胞生物学实验 Cell Biology Experiment

13/03/2019 细胞生物学实验 Cell Biology Experiment 9 1.在水解过程中，DNA经过加热的弱酸水解 后，分子中的嘌呤和脱氧核糖间的糖苷键被 切断，并且脱氧核糖与磷酸间的磷酯键断开， 脱氧核糖的一端释放出游离的醛基。 反应过程（动画） CHO CHO H+ H+ H+ H+ H+ C-OH

2.在显色过程中,上述游离醛基在原位与无 色的 Schiffˆ试剂(无色品红亚硫酸溶液)反 应形成含有醌基的紫红色产物,因而使细胞 内含有DNA的部位呈现紫红色阳性反应。 反应过程(动画) C-OH A/G CHO T/C - NHS CHO NH2 scU-NHSOSH NHSO3H Schiff试剂(无色品红亚硫酸溶液 13/03/2019 细胞生物学实验 Cell Biology Experiment

13/03/2019 细胞生物学实验 Cell Biology Experiment 10 2.在显色过程中，上述游离醛基在原位与无 色的Schiff 试剂（无色品红亚硫酸溶液）反 应形成含有醌基的紫红色产物，因而使细胞 内含有DNA的部位呈现紫红色阳性反应。 反应过程（动画） CHO CHO C-OH Schiff 试剂（无色品红亚硫酸溶液）