河南农业大学：《动物微生物学》课程教学资源（实验指导）实验十五 主要病原菌的认识（三）

实验十六酵母菌细胞形态观察及死活细胞的染色鉴别 目的要求 1.通过观察了解酵母细胞的形态结构。 2.掌握鉴别酵母细胞死活的染色方法。 材料 3.其他：显微镜、载玻片、盖玻片、滴管、试管、蒸馏水等。 原理 酵母南细胞较大，不必染色即可用显微镜观察其形态。 用美兰染色液可对酵母细胞进行死活染色鉴别。美兰是一种弱氧化剂，氧化态呈色 还原态里无色 的酵母细形 因新陈代谢 新进行，具有一定的还原能力 ,能将进入细 胞的美兰还原，而细胞不被染色。因此，用美兰对酵母细胞染色一定时间后，无色的为活细 胞，呈蓝色的则为死亡细胞。需要注意的是，一个活酵母菌的还原能力是一定的，必须严格 控制染料的浓度和染色时间。 方法 1酵母菌细胞形态的观察 取洁净的载玻片一块，用滴管取酵母菌悬滴于载玻片中央，取盖玻片一块，小心地将盖 玻片一端与菌液接触，然后缓慢地将盖玻片放下，以避免产生气泡。至此，一片酵母菌水浸 标本片就制成了。 先用低倍镜观察，再用高倍镜观察，观察时注意酵母细胞的形状及出芽情况。 2.死活酵母细胞的染色鉴别 取0.1%美兰液一滴，滴在 一块洁净的载玻片中央，加一滴酵母菌悬液，混合均匀，染 色3一5分钟后加盖玻片制成水浸标本片，镜检。 内容 1.制片观察所给各种酵母菌的细胞形态 2.用美兰液对酵母茵死活细胞进行染色鉴别， 结果与思考思 1.绘图表示所观察的各种酵母菌，注明茵名及放大倍数。 2.用美兰对酵母细胞进行染色鉴别时，为什么要控制染料的浓度和染色时间？

实验十六 酵母菌细胞形态观察及死活细胞的染色鉴别 目的要求 1. 通过观察了解酵母细胞的形态结构。 2. 掌握鉴别酵母细胞死活的染色方法。 材料 1. 菌种：酵母菌菌悬液。 2. 染料：0.1％美兰染色液。 3. 其他：显微镜、载玻片、盖玻片、滴管、试管、蒸馏水等。 原理 酵母菌细胞较大，不必染色即可用显微镜观察其形态。 用美兰染色液可对酵母细胞进行死活染色鉴别。美兰是一种弱氧化剂，氧化态呈蓝色， 还原态呈无色。活的酵母细胞，因新陈代谢的不断进行，具有一定的还原能力，能将进入细 胞的美兰还原，而细胞不被染色。因此，用美兰对酵母细胞染色一定时间后，无色的为活细 胞，呈蓝色的则为死亡细胞。需要注意的是，一个活酵母菌的还原能力是一定的，必须严格 控制染料的浓度和染色时间。 方法 1．酵母菌细胞形态的观察 取洁净的载玻片一块，用滴管取酵母菌悬滴于载玻片中央，取盖玻片一块，小心地将盖 玻片一端与菌液接触，然后缓慢地将盖玻片放下，以避免产生气泡。至此，一片酵母菌水浸 标本片就制成了。 先用低倍镜观察，再用高倍镜观察，观察时注意酵母细胞的形状及出芽情况。 2．死活酵母细胞的染色鉴别 取 0.1％美兰液一滴，滴在一块洁净的载玻片中央，加一滴酵母菌悬液，混合均匀，染 色 3～5 分钟后加盖玻片制成水浸标本片，镜检。 内容 1. 制片观察所给各种酵母菌的细胞形态。 2. 用美兰液对酵母菌死活细胞进行染色鉴别。 结果与思考题 1. 绘图表示所观察的各种酵母菌，注明菌名及放大倍数。 2. 用美兰对酵母细胞进行染色鉴别时，为什么要控制染料的浓度和染色时间?