河南农业大学：《动物微生物学》课程教学资源（实验指导）实验十七 放线菌的形态观察

实验十七放线菌的形态观察 目的要求 学会放线菌制片方法，观察其形态特征。 材料 菌种：细黄链霉菌()马铃薯平板培养3一4天。 2 科：石炭酸复红液、 夫 .其他：显微镜、载玻片、接种针、香柏油、二甲苯等。 原理 放线菌是单细胞核微生物，菌丝体分为营养菌丝和气生菌丝两部分。部分气生菌丝的顶 端会分化成孢子丝，呈螺旋状、波浪状或分枝状等。在孢子丝顶端产生孢子，孢子常呈球形、 椭圆形或杆形等，气生菌丝和孢子的形状、颜色常作为分类的依据，放线菌的菌丝的宽度与 细菌类似，必须染色后才能进行观察。 方法 1.营养菌丝的制片与观察 ()用接种针取细黄链霉菌菌落（连同培养基一起）置于载玻片中央。 2)另取一块载玻片用方将其压碎，弃去培养基，制成涂片，干燥、园定、 (3)用美兰染色液或石炭酸复红 染色液染色30~60秒钟，水洗、 燥、用油镜观察营 养菌丝的形态。 2.气生菌丝、孢子丝的观察 将培养皿打开，放在低倍镜下寻找菌落的边缘，直接观察气生菌丝和孢子丝的形态（分 枝、卷曲情况等)。 3.孢子链及孢子的观察（印片法） 取洁净的盖玻片一块，在菌落上面轻轻地压一下，然后将印有痕迹的一面朝下，成在滴 有一滴美兰液的载玻片上，使孢子等印浸在染色液中，制成印片。用油镜观察孢子链及孢子 的形态。 4。埋片法的制片观察 (1)在马铃薯浸汁琼脂培养基平板上，划线接入少量细黄链霉菌的孢子，在接种线旁 倾斜地插入无菌盖玻片，于28~30℃培养 (2)培养3~4天后，菌丝沿者盖玻片向上生长，待菌丝长好后，取出盖玻片放在干净 的载玻片上，置于显微镜下观察。 内容 上述方法制片观察细黄链霉菌的营养菌丝、孢子丝、孢子链及孢子的形态。 作业 1,将观察结果绘图，并注明各部位名称。 2.比较各种方法的优缺点：在何种情况下，适宜用何种制片方法来观察，效果最好。 3.放线菌的菌体为何不易挑取？

实验十七 放线菌的形态观察 目的要求 学会放线菌制片方法，观察其形态特征。 材料 1. 菌种：细黄链霉菌（Streptomyces microflavus）马铃薯平板培养 3～4 天。 2. 染料：石炭酸复红液、美兰液。 3. 其他：显微镜、载玻片、接种针、香柏油、二甲苯等。 原理 放线菌是单细胞核微生物，菌丝体分为营养菌丝和气生菌丝两部分。部分气生菌丝的顶 端会分化成孢子丝，呈螺旋状、波浪状或分枝状等。在孢子丝顶端产生孢子，孢子常呈球形、 椭圆形或杆形等，气生菌丝和孢子的形状、颜色常作为分类的依据，放线菌的菌丝的宽度与 细菌类似，必须染色后才能进行观察。 方法 1．营养菌丝的制片与观察 （l）用接种针取细黄链霉菌菌落（连同培养基一起）置于载玻片中央。 （2）另取一块载玻片用力将其压碎，弃去培养基，制成涂片，干燥、固定。 （3）用美兰染色液或石炭酸复红染色液染色 30～60 秒钟，水洗、干燥、用油镜观察营 养菌丝的形态。 2．气生菌丝、孢子丝的观察 将培养皿打开，放在低倍镜下寻找菌落的边缘，直接观察气生菌丝和孢子丝的形态（分 枝、卷曲情况等）。 3．孢子链及孢子的观察（印片法） 取洁净的盖玻片一块，在菌落上面轻轻地压一下，然后将印有痕迹的一面朝下，放在滴 有一滴美兰液的载玻片上，使孢子等印浸在染色液中，制成印片。用油镜观察孢子链及孢子 的形态。 4．埋片法的制片观察 （1）在马铃薯浸汁琼脂培养基平板上，划线接入少量细黄链霉菌的孢子，在接种线旁 倾斜地插入无菌盖玻片，于 28～30℃培养。 （2）培养 3～4 天后，菌丝沿着盖玻片向上生长，待菌丝长好后，取出盖玻片放在干净 的载玻片上，置于显微镜下观察。 内容 按上述方法制片观察细黄链霉菌的营养菌丝、孢子丝、孢子链及孢子的形态。 作业 1. 将观察结果绘图，并注明各部位名称。 2. 比较各种方法的优缺点；在何种情况下，适宜用何种制片方法来观察，效果最好。 3. 放线菌的菌体为何不易挑取?