遵义医科大学附属医院医学检验科：《临床分子生物学检验技术》课程教学资源（课件讲稿）第三章 临床标本处理与分离纯化技术

第三章 临床标本处理与分离纯化技术 肖代敏 遵义医学院医学检验学院 临床分子生物学检验技术

肖代敏 遵义医学院医学检验学院

教学要求 掌握DNA的分离纯化 掌握RNA的分离纯化 掌握核酸的鉴定 熟悉临床标本的处理和蛋白质的分离纯化 了解自动化核酸提取系统 临床分子生物学检验技术

教学要求 1 2 4 3 5

检验人是什么？ 健康“情报员”临床“侦察兵” sG■y 心大领德 州 临床分子生物学检验技术

检验人是什么？

检验结果的重要性 70%-85%的临床决策均以实验室结果为依据 欠佳的试验流程会影响检测结果的准确性 不准确的实验结果会影响临床疗效的能力 实验室误差对患者、临床医生、实验室造成影响 70%以上的实验室误差来自检验前过程 临床分子生物学检验技术

检验结果的重要性 70%-85%的临床决策均以实验室结果为依据 欠佳的试验流程会影响检测结果的准确性 不准确的实验结果会影响临床疗效的能力 实验室误差对患者、临床医生、实验室造成影响 70%以上的实验室误差来自检验前过程

第一节↓ 临床标本的处理 明 临床分子生物学检验技术

第一节 临床标本的处理

、 临床标本处理的一般原则熟悉 标题：临床分子室项目申情及样本管哩作业指得书 文件骗号：ZQS0PFZ-GL-008 版本号：B 修改号 生效日期：20140916 失效日期：新版文件发布 发行部门：临床分子室 页码：第1页共4页 受控 编制人：肖代敏 审核人：杨艳 批准人：词 1目的 规范临床分子室检测项目的合理，准确开单及申请，确保检验前的样本质量符 合要求，使其样本具有代表性、真实性，减少分析前因素对检验结果的影响，规范 原始样品采集和运输过程与保存，特制定本程序。 2适用范围 适合于临床分子室检项目申请、原始样品采集、运输等 活动。 3职表或贡任人 ,1临床分子室组长助科室技术负责人和咨询服务组成员负责临床分子室检验项 目申请的管理。 3.2临床医生或其他实验室服务客户提出检验申请。 3.3临床各科或门诊护士负责采集原始样品。 3.4前处理人员，护工其他指定人员负责原始样品的收集和运送。 3.5临床分子室监督员负责监督采样过程。 临床分子生物学检验技术

一、临床标本处理的一般原则熟悉

一、 临床标本处理的一般原则熟悉 标本的类 标本采 型和数量 集时间 采集部位 影响检验质量的关键环节 标本运送 标本保存 生物安全 临床分子生物学检验技术

采集部位 标本的类 型和数量 标本采 集时间 标本运送 生物安全 一、临床标本处理的一般原则熟悉 标本保存

(一)标本采集时间和注意事项熟悉 检测病原体：使用抗病毒前采集样本，如HBV-DNA、 HCV-RNA以及乙肝耐药基因突变位点检测和丙型肝炎基 因分型等。 若病原体含量较少：如感染早期阶段，可采用检测 灵敏度较高方法进行，普通RT-PCR检测结果低于检测 下限，而临床又充分怀疑有病原体感染时（假阴性）， 可采用超敏乙肝和超敏丙肝进行检测。 临床分子生物学检验技术

（一）标本采集时间和注意事项熟悉 检测病原体：使用抗病毒前采集样本，如HBV-DNA 、 HCV-RNA以及乙肝耐药基因突变位点检测和丙型肝炎基 因分型等。 若病原体含量较少：如感染早期阶段，可采用检测 灵敏度较高方法进行，普通RT-PCR检测结果低于检测 下限，而临床又充分怀疑有病原体感染时（假阴性）， 可采用超敏乙肝和超敏丙肝进行检测

(二)标本的类型和数量熟悉 血液标本：BCR/ABL融合基因检测，单个核细胞数量应大于 2×106个L;EB-DNA检测，应尽可能分离出较多 的单个核细胞。 分泌物，咽拭子等样本：应尽可能取到有价值的样本。 临床分子生物学检验技术

（二）标本的类型和数量熟悉 血液标本：BCR/ABL融合基因检测，单个核细胞数量应大于 2×106个/L；EB-DNA检测，应尽可能分离出较多 的单个核细胞。 分泌物，咽拭子等样本：应尽可能取到有价值的样本

(三)标本采集部位熟悉 操作流程简易四示 具体操作步要 炭作流程简易图示 良体按作步爱 1.采血前先进行手消毒，嘱患者挽起衣袖，紧握拳头， 6.采血结束后，一手持无菌棉签，一手持采血针头，将 伸直手臂放在一次性垫巾上，轻轻拍打肘关节寻找易 无菌棉签轻轻按压住针头，另一手快速技出针头，嘱患 找、易固定、进针方便、安全处作为穿刺点 者自行按压棉签35分钟 2.在穿刺部位上方约3cm处，系上止血带，从上往下系， 止血带外端朝上，以免影响操作 7:将采血针头丢入专用锐器盒，按正确方法脱下手套丢 入指定医疗垃圾桶 30.5%碘伏酒精消毒：用酒精棉签在穿刺点处停留 2秒，再以穿刺点为中心作同心回方式从里向外消 毒，约5cm2面积范围 8按七步洗手法进行洗手消毒 4.除去采血针外套，露出针头，以左手拇指固定皮肤 右手持采血针，采血针斜面朝上，延静脉走向，使针头 走向与皮肤成15°角斜行快速刺入皮肤，当进入静脉腔有 落空感时停止穿刺，且采血针另一端可见回血 临床分子生物学检验技术

（三）标本采集部位熟悉