厦门大学：《仪器分析实验》课程教学课件（PPT讲稿）高效液相色谱法 High Performance Liquid Chromatography（HPLC）

仪器分析（含实验） 《仪器分析实验》 高效液相色谱法 High Performance Liquid Chromatography For Short:HPLC 编写日期：2006年9月

编写日期：2006年9月 《仪器分析实验》 高效液相色谱法 High Performance Liquid Chromatography For Short：HPLC 仪器分析(含实验)

实验目的 >了解HPLC仪器基本结构，掌握实验仪器的一般使 用方法； 加深对色谱分离原理的理解，掌握主要实验条件 的选择； 掌握液相色谱定性定量分析技术。 实验内容 反相高效液相色谱法分离测定烷基苯系物 编写日期.2006年9月

编写日期：2006年9月 实验目的 ➢ 了解HPLC仪器基本结构,掌握实验仪器的一般使 用方法； ➢ 加深对色谱分离原理的理解，掌握主要实验条件 的选择； ➢ 掌握液相色谱定性定量分析技术。 实验内容 反相高效液相色谱法分离测定烷基苯系物

实验讲解要点 一、色谱分离原理 二、色谱分析技术 三、HPLC仪器和使用方法 四、HPLC和GC的比较 五、RP-HPLC测定烷基苯化合物原理 建议在实验过程中，对北比前面的气相色谱实验技术，进 一步巩固和提高所学知识和实验技能。 编写日期：2006年9月

编写日期：2006年9月 实验讲解要点 一 、色谱分离原理 二、色谱分析技术 三、 HPLC仪器和使用方法 四、 HPLC和GC的比较 五、 RP-HPLC测定烷基苯化合物原理 建议在实验过程中，对比前面的气相色谱实验技术，进 一步巩固和提高所学知识和实验技能

一、色谱分离原理 色谱法是一类高效分离方法。 >色谱分离原理是什么？ >HPLC和GC仪器的分离部件是什么？ 它们有什么不同？ >HPLC和GC的主要差别？ 编写日期，2006年9月

编写日期：2006年9月 一、色谱分离原理 色谱法是一类高效分离方法。 ➢ 色谱分离原理是什么？ ➢ HPLC和GC仪器的分离部件是什么？ 它们有什么不同？ ➢ HPLC和GC的主要差别？

二、色谱分杯技术 色谱分析是一类重要的仪器分析方法，其特 点是分离能力强、定量准确，适合于复杂样 品或多组分样品分析。 >常见的色谱定性方法？ >色谱定量分析的依据？ >气相色谱实验采用那种定量分析方法？有 何特点？ >HPLC和GC的应用特点 编写日期：2006年9月

编写日期：2006年9月 二、色谱分析技术 色谱分析是一类重要的仪器分析方法，其特 点是分离能力强、定量准确，适合于复杂样 品或多组分样品分析。 ➢ 常见的色谱定性方法？ ➢ 色谱定量分析的依据？ ➢ 气相色谱实验采用那种定量分析方法？有 何特点？ ➢ HPLC和GC的应用特点

三、HPLC仪器和实验技术 >HPLC仪器的基本组分？ >主要部件的工作原理？ >HPLC和GC仪器的比较 >HPLC和GC实验技术的比较 >有人认为色谱分析实验很简单，就是打一 针样品而已，你是怎么认为的？你是否给病 人打过针？为什么没有？ 编写日期.2006年9月

编写日期：2006年9月 三、 HPLC仪器和实验技术 ➢ HPLC仪器的基本组分？ ➢ 主要部件的工作原理？ ➢ HPLC和GC仪器的比较 ➢ HPLC和GC实验技术的比较 ➢ 有人认为色谱分析实验很简单，就是打一 针样品而已，你是怎么认为的？你是否给病 人打过针？为什么没有？

四、高效液相色谱仪的基本组成 hypodermic syrnge 分几个系统？ precolumn injector 和GC有何不同？ pump mixing chamber fittings column 高压泵工作原理？ solvents GC是如何进样的？ 记录系统和GC一样 detector M 吗？ de ta system 编写日期：2006年9月

编写日期：2006年9月 四、高效液相色谱仪的基本组成 分几个系统？ 和GC有何不同？ 高压泵工作原理？ GC是如何进样的？ 记录系统和GC一样 吗？

OUTLET BALL VALVE PISTON INLET BALL VALVE 高压泵工作原理（单向阀) >高压液体有危险吗？ >高压泵如何改变流速？ 编写日期：2006年9月

编写日期：2006年9月 高压泵工作原理（单向阀） ➢ 高压液体有危险吗？ ➢ 高压泵如何改变流速？

Columr Load Inject 六通阀工作原理（流路切换） >HPLC进样针与GC有何不同？ >为什么HPLC与GC进样要求不同？ 编写日期：2006年9月

编写日期：2006年9月 高压泵工作原理（单向阀） ➢ HPLC进样针与GC有何不同？ ➢ 为什么HPLC与GC进样要求不同？ 六通阀工作原理（流路切换）

五、RP-HPLC测定烷基苯化合物原理 >什么是正相色谱？什么是反相色谱？ >什么是键合固定相？ >预测一下苯和甲苯在C18反相柱上的保留 顺序？ >什么是反相色谱疏水机理？ >本实验的主要色谱分析条件有那些？ >流动相组成对保留时间有何影响？举例说 明？ >改变检测波长对色谱图有何影响？ 编写日期：2006年9月

编写日期：2006年9月 五、 RP-HPLC测定烷基苯化合物原理 ➢ 什么是正相色谱？什么是反相色谱？ ➢ 什么是键合固定相？ ➢ 预测一下苯和甲苯在C18反相柱上的保留 顺序？ ➢ 什么是反相色谱疏水机理？ ➢ 本实验的主要色谱分析条件有那些？ ➢ 流动相组成对保留时间有何影响？举例说 明？ ➢ 改变检测波长对色谱图有何影响？