清华大学：《微生物学实验》第二讲 固定化酵母细胞发酵啤酒实验与酸奶制作

微生物学实验 固定化酵母细胞发酵啤酒实验 与酸奶制作 陈金春,林琳,雷明光, 陈晶瑜,郑重,孙珊,荣知立 清华大学微生物实验蜜,100084 Chenjc@mail.tsinghua.edu.cn

固定化酵母细胞发酵啤酒实验 与酸奶制作 陈金春，林琳，雷明光, 陈晶瑜,郑重,孙珊,荣知立 清华大学微生物实验室,100084 Chenjc@mail.tsinghua.edu.cn 微生物学实验

实验目的 °了解固定化细胞技术的方法和意义; °了解酵母发酵产生啤酒的过程; 了解基本微生物实验操作技术; 学习酸奶制作方法; °了解纯种发酵和传统发酵在无菌操作方 面的差别

实验目的 • 了解固定化细胞技术的方法和意义; • 了解酵母发酵产生啤酒的过程; • 了解基本微生物实验操作技术; • 学习酸奶制作方法; • 了解纯种发酵和传统发酵在无菌操作方 面的差别

实验原理 固定化技术 将生物酶或细胞固定在一定的基质上,从而 提供酶或细胞的利用效率 固定化研究开始于50年代,现在已经广泛应 用在近代工业微生物技术上;

实验原理 • 固定化技术 –将生物酶或细胞固定在一定的基质上,从而 提供酶或细胞的利用效率; –固定化研究开始于50年代,现在已经广泛应 用在近代工业微生物技术上;

实验原理 °固定化技术生产啤酒 固定化细胞能重复使用; 发酵后菌体与发酵液易于分离; 后处理工艺简单,成本低; 可连续发酵,过程自动化; °传统发酵法 酵母细胞发酵一次即弃去菌体;

实验原理 • 固定化技术生产啤酒 –固定化细胞能重复使用; –发酵后菌体与发酵液易于分离; –后处理工艺简单,成本低; –可连续发酵,过程自动化; • 传统发酵法 –酵母细胞发酵一次即弃去菌体;

实验原理 包埋法 固定化技术的一种; 将微生物细胞均勺的包埋在水不嵱性载体 的紧密结构中,细胞不易漏出; 制定固定化细胞时,细胞和载体不起任何反 应,细胞处于最佳生理状态; 阖定化细胞有载体为异障,可避免外界不利 因素的影响

实验原理 • 包埋法 –固定化技术的一种; –将微生物细胞均匀的包埋在水不溶性载体 的紧密结构中,细胞不易漏出; –制定固定化细胞时,细胞和载体不起任何反 应,细胞处于最佳生理状态; –固定化细胞有载体为屏障,可避免外界不利 因素的影响;

实验仪器,材料和用具 实验材料: 啤酒酵母; 发酵培养基: 150m麦芽汁(8%~10%)/250ml三角瓶; 实验试剂 2.5%海藻酸钠嵱液5ml,天菌; 1.5%cacl250ml,天菌; 9%无菌生理盐水,50ml;

实验仪器,材料和用具 • 实验材料: –啤酒酵母; • 发酵培养基: –150ml麦芽汁(8%~10%)/250ml三角瓶; • 实验试剂: –2.5%海藻酸钠溶液5ml,灭菌; –1.5% CaCl2 50ml,灭菌; –0.9% 无菌生理盐水, 50ml;

实验仪器,材料和用具 实验用具: 无菌滴管 无菌玻璃棒: 无菌封口膜封好的100m三角瓶

实验仪器,材料和用具 • 实验用具: –无菌滴管; –无菌玻璃棒; –无菌封口膜封好的100ml三角瓶;

实验步骤 菌体培养 将培养24h的新鮮斜面菌种,接种 于三角瓶中培养; °细胞固定化 在海藻酸钠嵱液中,加入2m预热 至35C的酵母培养液,混合均匀, 以无菌滴管缓慢而稳定的加入 CaCl2嵱液,边滴加边搅拌,即可得 到直径约3mm左右的凝胶珠;钙化 多min

实验步骤 • 菌体培养 –将培养24h 的新鲜斜面菌种,接种 于三角瓶中培养; • 细胞固定化 –在海藻酸钠溶液中,加入2ml 预热 至35oC的酵母培养液,混合均匀, 以无菌滴管缓慢而稳定的加入 CaCl2 溶液,边滴加边搅拌,即可得 到直径约3mm左右的凝胶珠;钙化 30min;

实验步骤 固定化细胞发酵啤酒 在无菌玻璃棒帮助下倒掉 CaCl2嵱液,倒生理盐水于制 得的固定化好的酵母细胞的 瓶子中,洗一次凝胶珠将 lo0mL发酵培养基(麦芽汁) 倒入制得的固定化小球的瓶 子中,28℃培养24小肘; 品尝啤酒(若发酸或其他异 味, No drinking

实验步骤 • 固定化细胞发酵啤酒 – 在无菌玻璃棒帮助下倒掉 CaCl2 溶液,倒生理盐水于制 得的固定化好的酵母细胞的 瓶子中,洗一次凝胶珠,将 100mL发酵培养基（麦芽汁） 倒入制得的固定化小球的瓶 子中, 28℃培养24小时; • 品尝啤酒（若发酸或其他异 味，No drinking)

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