甘肃农业大学：《基因工程》课程教学资源（课件讲稿）第六章 目的基因的转化方法

第六章目的基因的转化方法

第六章 目的基因的转化方法

内容 一、植物基因转化受体系统 二、农杆菌介导法 三、基因枪法 四、种质系统转化法 五、病毒载体转化法

内 容 一、植物基因转化受体系统 二、农杆菌介导法 三、基因枪法 四、种质系统转化法 五、病毒载体转化法

植物的基本特征 植物 低等植物 高等植物 无根、茎、叶等分化器官 含根、茎、叶、花、果分化器官 合子不经胚直接发育为个体 合子经胚再发育为个体 藻类地衣 苔藓门蕨类门裸子门被子门

植物的基本特征 植 物 低 等 植 物 藻类 地衣 高 等 植 物 无根、茎、叶等分化器官 合子不经胚直接发育为个体 含根、茎、叶、花、果分化器官 合子经胚再发育为个体 苔藓门 蕨类门 裸子门 被子门

一、植物基因转化受体系统 ，植物基因转化受体系统的条件 植物基因转化受体系统的类型及特性 ·植物基因转化受体系统的建立 ·植物基因转化受体系统常见的问题及其解决途径

一、植物基因转化受体系统 • 植物基因转化受体系统的条件 • 植物基因转化受体系统的类型及特性 • 植物基因转化受体系统的建立 • 植物基因转化受体系统常见的问题及其解决途径

植物基因转化受体系统的概念 植物基因转化受体(gene transformation receptor)系统：一般是指用于转化的外植体通过组 织培养途径或其他非组织培养途径，能高效、稳定 地再生无性系，并能接受外源基因(foreign gene.) 的整合（recombination),对用于转化选择的抗生 素敏感的再生系统

植物基因转化受体系统的概念 植 物 基 因 转 化 受 体 （ gene transformation receptor）系统：一般是指用于转化的外植体通过组 织培养途径或其他非组织培养途径，能高效、稳定 地再生无性系，并能接受外源基因（foreign gene） 的整合（recombination），对用于转化选择的抗生 素敏感的再生系统

植物基因转化受体系统的条件 高效稳定的再生能力 ● 较高的遗传稳定性 ● 具有稳定的外植体来源 抗生素敏感性 农杆菌敏感性

植物基因转化受体系统的条件 • 高效稳定的再生能力 • 较高的遗传稳定性 • 具有稳定的外植体来源 • 抗生素敏感性 • 农杆菌敏感性

高效稳定的再生能力 用于植物基因转化的外植体必须易于再生， 有很高的再生频率，并且具有良好的实验稳 定性和重复性。 不同植物的种类、细胞类型、细胞状态、特 定的植物培养技术的成熟程度等在建立受体 系统时均需考虑

高效稳定的再生能力 • 用于植物基因转化的外植体必须易于再生， 有很高的再生频率，并且具有良好的实验稳 定性和重复性。 • 不同植物的种类、细胞类型、细胞状态、特 定的植物培养技术的成熟程度等在建立受体 系统时均需考虑

较高的遗传稳定性 植物受体系统接受外源DNA后不影响其自 身的遗传体系，同时又能稳定地将外源基 因遗传给后代，保持遗传的稳定性。 选择适当的培养体系

较高的遗传稳定性 • 植物受体系统接受外源DNA后不影响其自 身的遗传体系，同时又能稳定地将外源基 因遗传给后代，保持遗传的稳定性。 • 选择适当的培养体系

具有稳定的外植体来源 转化的外植体一般采用种子，无菌实生苗的 胚轴、子叶或幼叶，可进行离体快速繁殖的材 料如一些植物的试管苗，以及可较高频率诱导 的营养变态器官等

具有稳定的外植体来源 转化的外植体一般采用种子，无菌实生苗的 胚轴、子叶或幼叶，可进行离体快速繁殖的材 料如一些植物的试管苗，以及可较高频率诱导 的营养变态器官等

抗生素敏感性 植物基因转化中，通常使用两类抗生素： 抑菌抗生素 选择性抗生素 选择性抗生素应满足以下条件： 植物受体材料对所选用的抗生素有一定的敏感性； 抗生素对受体植物没有剧烈的毒性

抗生素敏感性 植物基因转化中，通常使用两类抗生素：  抑菌抗生素  选择性抗生素 选择性抗生素应满足以下条件：  植物受体材料对所选用的抗生素有一定的敏感性；  抗生素对受体植物没有剧烈的毒性