南方医科大学：《分子生物学》课程教学资源（课件讲稿）基因诊断 Gene diagnosis（主讲：殷志新）

基因诊断 Gene diagnosis 殷志新 南方医科大学生物化学教研室 E-mail:yinzx2003@163.com

Gene diagnosis 殷志新 南方医科大学生物化学教研室 E-mail:yinzx2003@163.com

01 概念特点 NTENTS 02 基因结构变化及检测 目录 03 基因表达调控机制 04 应用

01 概念特点 03 基因表达调控机制 02 基因结构变化及检测 04 应用 C 目录O N T E N T S

第一节 概念、特点 分子水平上检测 基因的存在，→ DNA 基因结构及 表达水平， RNA 诊断疾病。 蛋白质

第一节 概念、特点 分子水平上检测 基因的存在, 基因结构及 表达水平, 诊断疾病。 DNA RNA 蛋白质

特点 病因诊断 应用广 特异性高 灵敏度高

特 点 病因诊断 特异性高 灵敏度高 应用广

样品 血液 组织块 精液 毛发 睡液 尿液 羊水， 绒毛，脐血，母 体DNA

样 品

第二节基因结构变化及检测 一、基因缺失或插入 Southern印迹 BamH 2 BamHI 14 kb 正常杂合子纯合子 02 14 kb probe 10k6 10 kb

第二节 基因结构变化及检测 一、基因缺失或插入 BamH I BamHI α2 α1 α2 10 kb 14 kb probe Southern印迹 14 kb 10 kb 正常 杂合子 纯合子

PCR及相关技术 (1)直接PCR 正常人 患者 电 泳 WT APC

正常人 患者 扩 增 电 泳 (1)直接PCR PCR及相关技术

2.Gap-PCR SEA/SEA SEA/aa aaa o 1 5kb 纯合子 杂合子正常M 02 1.5kb 1kb 失

2. Gap-PCR 2 1 2 3 1.5kb 缺失20kb 1kb 1 SEA/ SEA SEA/     /   1.5kb 1kb

二、点突变 1.等位基因特异性寡核苷酸分子杂交 (allele specific oligonucleotide,ASO) GCCCTGTGGGGGCAAGGTGAACGTGGA 正常 itittthitiinlitttte 基因组 CGGGACACCCCGTTCCACTTGCACCT DNA GCCCTGTGGGGCTAGGTGAACGTGGA 突变 11EREHRERRRRHRERREEEERRE CGGGACACCCCGATCCACTTGCACCT GTGGGGCAAGGTGAAC GTGGGGCTAGGTGAAC 正常探针 突变探针 正常探针 突变探针 A: B:C:3个样品 正常；突变纯合子；杂合子

二、点突变 1. 等位基因特异性寡核苷酸分子杂交 （allele specific oligonucleotide, ASO) 正常探针 突变探针 A： B： C：3个样品 正常；突变纯合子；杂合子

2.反向点杂交(B-珠蛋白生成障碍) 71/72 -2817βE41/42 654 N M 正常 父 99999 母P回8 99P98 胚胎 P9998 胚胎 胚胎 99898 胚胎

NC膜 2. 反向点杂交（-珠蛋白生成障碍）