《临床检验仪器学》课程教学资源(知识扩充)第六章 电泳技术和电泳仪

第六章电泳技术和电泳仪(知识扩充) 一、电泳技术概述 电泳(electrophoresis)是指带电荷的溶质或粒子在电场中向着与其本身所带电荷相反的电极 移动的现象。利用电泳现象将多组分物质分离、分析的技术叫做电泳技术。可以实现电泳分离技术 的仪器称之为电泳仪(electrophoresister))。电泳技术是由瑞典科学家A.Tiselius在1937年首先利 用U形管建立了移界电泳法(moving boundary EP),即区带电泳(zone electrophoresis),他成 功地将血清蛋白质分成5个主要成分(清蛋白,¤1、a2、B、球蛋白),开创了电泳技术的新纪元。 由于他的突出贡献,1948年菜获诺贝尔化学奖。20世纪50年代后纸上电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳在 生物学研究中普遍使用,80年代后,许多自动化电泳仪器相继为临床实验室所采用,电泳技术已成 为基础医学和临床医学研究的重要工具之一。 二、电泳技术的发展 自从1946年瑞典物理化学家Tiselius教授研制的第一台商品化移界电泳系统问世以来, 在近半个多世纪的时间里,电泳分析所用仪器发展极其迅速。特别是电泳所用支持介质由流 动相改为固相支持物后,各种各样的电泳分析装置不断推出以适应不同教学、临床和科研工 作的需要。20世纪80年代以来,越来越多的电泳分析仪器与设备,尤其是一些自动化的电泳分析 仪相继被引入临床实验室,发挥越来越重要的作用。特别一提的是电泳技术与质谱技术联用在后基 因组学研究中正发挥着巨大的作用。 )电泳设备 通常所说的电泳设备可分为主要设备(分离系统)和辅助设备(检测系统)。主要设备 指电泳仪电源和电泳槽及其附件,辅助设备指与电泳有关的设备。 目前临床常规使用的自动化电泳仪一般分为两个部分:电泳可控制单元(这个单元包括了 电泳槽,电源和冷却装置)以及染色单元。有的仪器电泳过程,包括点样、电泳、染色和脱色 全部由微机自动化控制,操作简便和快速,并保证了检测结果的准确性和可重复性。 桓温系统主要用干冷知凝胶温度,它有两种形式: 一种是在电泳槽中有冷却管或冷却板 与外恒温循环系统相连,另一种是凝胶板下有半导体冷却装置。临床自动化电泳仪多采用后 者。 扫描或检测设备分为可见光源、紫外、荧光和激光光源等。可见光源和激光光源对染色 的凝胶进行扫描,紫外光源可以扫描不经染色的凝胶,并且荧光测量的灵敏度最高。目前, 一些电泳仪器可自动对不同条带的光吸收度进行分析,综合计算后得出报告结果,此方法方 便快捷、准确可靠。 (二)电泳仪进展 1.1960年以前:多采用醋酸纤维素薄膜作为电泳支持介质,且没有专用的电泳扫描仪 作为分析工具,条带的分析通常使用脱色比色法。即只能在电泳分离、染色后,用人工方法 将各种电泳条带分别剪下,放入不同试管中,再用适当溶液将染料溶解脱色,最后放入比色 计中比色测定各种成份的吸光度,然后计算出各种成份所占百分比及浓度。这一方法操作比 较复杂,干扰因素多,重复性差
第六章 电泳技术和电泳仪(知识扩充) 一、电泳技术概述 电泳(electrophoresis)是指带电荷的溶质或粒子在电场中向着与其本身所带电荷相反的电极 移动的现象。利用电泳现象将多组分物质分离、分析的技术叫做电泳技术。可以实现电泳分离技术 的仪器称之为电泳仪(electrophoresister)。电泳技术是由瑞典科学家A.Tiselius在1937年首先利 用U形管建立了移界电泳法(moving boundary EP),即区带电泳( zone electrophoresis ),他成 功地将血清蛋白质分成5个主要成分(清蛋白,α1 、α2 、β、 球蛋白),开创了电泳技术的新纪元。 由于他的突出贡献,1948年荣获诺贝尔化学奖。20世纪50年代后纸上电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳在 生物学研究中普遍使用,80年代后,许多自动化电泳仪器相继为临床实验室所采用,电泳技术已成 为基础医学和临床医学研究的重要工具之一。 二、电泳技术的发展 自从1946年瑞典物理化学家Tiselius教授研制的第一台商品化移界电泳系统问世以来, 在近半个多世纪的时间里,电泳分析所用仪器发展极其迅速。特别是电泳所用支持介质由流 动相改为固相支持物后,各种各样的电泳分析装置不断推出以适应不同教学、临床和科研工 作的需要。20世纪80年代以来,越来越多的电泳分析仪器与设备,尤其是一些自动化的电泳分析 仪相继被引入临床实验室,发挥越来越重要的作用。特别一提的是电泳技术与质谱技术联用在后基 因组学研究中正发挥着巨大的作用。 (一)电泳设备 通常所说的电泳设备可分为主要设备(分离系统)和辅助设备(检测系统)。主要设备 指电泳仪电源和电泳槽及其附件,辅助设备指与电泳有关的设备。 目前临床常规使用的自动化电泳仪一般分为两个部分:电泳可控制单元(这个单元包括了 电泳槽,电源和冷却装置)以及染色单元。有的仪器电泳过程,包括点样、电泳、染色和脱色 全部由微机自动化控制,操作简便和快速,并保证了检测结果的准确性和可重复性。 恒温系统主要用于冷却凝胶温度,它有两种形式:一种是在电泳槽中有冷却管或冷却板 与外恒温循环系统相连,另一种是凝胶板下有半导体冷却装置。临床自动化电泳仪多采用后 者。 扫描或检测设备分为可见光源、紫外、荧光和激光光源等。可见光源和激光光源对染色 的凝胶进行扫描,紫外光源可以扫描不经染色的凝胶,并且荧光测量的灵敏度最高。目前, 一些电泳仪器可自动对不同条带的光吸收度进行分析,综合计算后得出报告结果,此方法方 便快捷、准确可靠。 (二)电泳仪进展 1.1960年以前:多采用醋酸纤维素薄膜作为电泳支持介质,且没有专用的电泳扫描仪 作为分析工具,条带的分析通常使用脱色比色法。即只能在电泳分离、染色后,用人工方法 将各种电泳条带分别剪下,放入不同试管中,再用适当溶液将染料溶解脱色,最后放入比色 计中比色测定各种成份的吸光度,然后计算出各种成份所占百分比及浓度。这一方法操作比 较复杂,干扰因素多,重复性差

2.1960年至1980年:随着琼脂糖凝胶作为电泳支持介质的广泛应用,以往用醋酸纤维 素薄膜电泳无法分离开的成份或无法检测出的成份能够被分离或检测,分离效果大为改善及 灵敏度提高。同时,国外多家设备厂家相继生产出电泳扫描仪。这类设备的应用,解决以往 为浓度计算所花费大量人力及时间,并大幅提高电泳分析浓度计算的准确度,但此时期的电 泳扫描仪均为可见光系统。主要用于蛋白质如血清蛋白、脂蛋白、血红蛋白等项目分析。 3.1981年至1990年:这一时期电泳分析仪的标志为各生产厂家均推出可见光/荧光双系 统自动电泳扫描仪。荧光扫描仪的推出及与电脑的结合均对临床电泳分析有相当大的帮助,大大提 高了分析的准确度与精密度。电泳分析的原理也由单一可见光,增加为荧光及可见光,而荧光试剂 的应用也使分析的灵敏度大为提高。以往无法检出或检出效果不佳的项目(如各种同工酶),由于荧光 试剂与荧光扫描仪的推出,极大地方便了临床如乳酸脱氢酶和肌酸激酶(CK)同工酶的测定, 4.1991年至今:这一时期电泳分析仪的最大变化特点为自动化程度日益提高,基本可将 其分为两大类。第一类为临床实验室常规使用的分析仪,如:全自动荧光可见光双系统电泳 仪、全自动醋纤膜电泳仪和全自动琼脂糖电泳仪。第二类为以科研为主,兼做临床样本的仪 器,如:双向电泳及双向电泳液相色谱质谱联用、高效毛细管电泳及高效毛细管电泳-质谱联 用、高效毛细管芯片电泳、DNA测序系统。 三、电泳技术新进展 一、电泳技术与免疫技术相结合,大大扩大了其临床应用的范围 让电流来加速抗原与抗体的扩散并规定其运行方向、从而加快了沉淀反应速度。免疫电泳技术的 种类很多,如:对流免疫电泳(CIP)、火箭免疫电泳(RIE)、电免疫扩散(EID)。该技术的最 大优势是敏感性达50-150mgd,操作周期短,分辨率高,结果易于分析。现最常用于M蛋白的分型 与鉴定,已列入临床实验室的常规检测工, 二、电泳技术进行同工酶谱分析,提高诊断率 1.血清乳酸脱氢酶同工酶(IS0LD州):测定LDH同工酶有电泳法、离子交换柱层析法、免疫 法、抑制剂法和酶切法,但迄今用得取多的仍是琼脂糖凝胶电泳法。经电泳分离后要分离出五种同 工酶区带,急性心肌梗塞发病后平均6hLDH1即开始升高,LDH1LDH2≥1为心肌损伤的阳性决定性 水平,肝癌时可见LDH5明显升高,各区带含量的确定,将经电泳分离后的同工酶谱采用扫描予以定 量,其精确度明显高于用肉眼判断。 2.血清肌酸激酶同工酶(S0-CK);测定CK和CK-MB仍是目前用于证实急性心肌梗塞的首选指 标。近年来国内一些单位用免疫抑制法测CK-MB,使用电泳方法分离CK-MB,是根据CK-同工酶分 子结构不同,在电泳缓冲液中,所带电荷各异,可以从阴极到阳极将CK不同组份予以分离,其分别 为CK-MM,CK-MB和CK-BB。电泳特点是当出现异常同工酶如巨CKL、巨CKII等,从电泳图谱上很 容易发现,由扫描仪对恪条酶进行扫描,报告各条区带所占百分比,结合总酶活力,求得区带的酶 活力定值结果。Macro-CK在CK-MM和CK-MB中间,而CK-MT位置靠近阴极端,在CK-MM后面。这 样不会将CK-BB和各种异常同工酶误认为是CK-MB而误诊,也可解决CK-MB假性增高的错误原因所 在。为此,CK同工海电永是项非常实用的检验技术,具有十分重要的临床意义 3.CK亚型同工酶:此外,CK-MB和CK-MM亚型测定常采用琼脂糖凝胶等电聚焦电泳或高压电 泳,由于操作比一般电泳麻烦,故常规常测定尚无法普及。目前引进的自动电泳仪,有试剂盒提 供,可作CK亚型分析,参考值:CK-MM1(57.7±4.7)%:CK-MM2为(26.5t5.3):CK-MM3为 (15.8±2.5)%:CK-MM3/CK-MM1比值为0.28±0.05(范围0.15-0.39),阳性决定性水平>0.5。AM1第一天 血中以MM3为主,但第二天以后测以MM1为主。采用电泳法分离CKMB,CKMB1和CKMB2在正常人
2.1960年至1980年:随着琼脂糖凝胶作为电泳支持介质的广泛应用,以往用醋酸纤维 素薄膜电泳无法分离开的成份或无法检测出的成份能够被分离或检测,分离效果大为改善及 灵敏度提高。同时,国外多家设备厂家相继生产出电泳扫描仪。这类设备的应用,解决以往 为浓度计算所花费大量人力及时间,并大幅提高电泳分析浓度计算的准确度,但此时期的电 泳扫描仪均为可见光系统。主要用于蛋白质如血清蛋白、脂蛋白、血红蛋白等项目分析。 3.1981年至1990年:这一时期电泳分析仪的标志为各生产厂家均推出可见光/荧光双系 统自动电泳扫描仪。荧光扫描仪的推出及与电脑的结合均对临床电泳分析有相当大的帮助,大大提 高了分析的准确度与精密度。电泳分析的原理也由单一可见光,增加为荧光及可见光,而荧光试剂 的应用也使分析的灵敏度大为提高。以往无法检出或检出效果不佳的项目(如各种同工酶),由于荧光 试剂与荧光扫描仪的推出,极大地方便了临床如乳酸脱氢酶和肌酸激酶(CK)同工酶的测定。 4.1991年至今:这一时期电泳分析仪的最大变化特点为自动化程度日益提高,基本可将 其分为两大类。第一类为临床实验室常规使用的分析仪,如:全自动荧光/可见光双系统电泳 仪、全自动醋纤膜电泳仪和全自动琼脂糖电泳仪。第二类为以科研为主,兼做临床样本的仪 器,如:双向电泳及双向电泳-液相色谱-质谱联用、高效毛细管电泳及高效毛细管电泳-质谱联 用、高效毛细管芯片电泳、DNA测序系统。 三、电泳技术新进展 一、电泳技术与免疫技术相结合,大大扩大了其临床应用的范围 让电流来加速抗原与抗体的扩散并规定其运行方向、从而加快了沉淀反应速度。免疫电泳技术的 种类很多,如:对流免疫电泳(CIEP)、火箭免疫电泳(RIE)、电免疫扩散(EID)。该技术的最 大优势是敏感性达50-150mg/dl,操作周期短,分辨率高,结果易于分析。现最常用于M蛋白的分型 与鉴定,已列入临床实验室的常规检测工。 二、电泳技术进行同工酶谱分析,提高诊断率 1.血清乳酸脱氢酶同工酶(ISO -LDH):测定LDH同工酶有电泳法、离子交换柱层析法、免疫 法、抑制剂法和酶切法,但迄今用得取多的仍是琼脂糖凝胶电泳法。经电泳分离后要分离出五种同 工酶区带,急性心肌梗塞发病后平均6h LDH1即开始升高,LDH1 /LDH2≥1为心肌损伤的阳性决定性 水平,肝癌时可见LDH5明显升高,各区带含量的确定,将经电泳分离后的同工酶谱采用扫描予以定 量,其精确度明显高于用肉眼判断。 2.血清肌酸激酶同工酶(ISO-CK);测定CK和CK-MB仍是目前用于证实急性心肌梗塞的首选指 标。近年来国内一些单位用免疫抑制法测CK-MB,使用电泳方法分离CK-MB,是根据CK-同工酶分 子结构不同,在电泳缓冲液中,所带电荷各异,可以从阴极到阳极将CK不同组份予以分离,其分别 为CK-MM,CK-MB和CK-BB。电泳特点是当出现异常同工酶如巨CKⅠ、巨CKⅡ等,从电泳图谱上很 容易发现,由扫描仪对各条酶进行扫描,报告各条区带所占百分比,结合总酶活力,求得区带的酶 活力定值结果。Macro-CK在CK-MM和CK-MB中间,而CK-MT位置靠近阴极端,在CK-MM后面。这 样不会将CK-BB和各种异常同工酶误认为是CK-MB而误诊,也可解决CK-MB假性增高的错误原因所 在。为此,CK同工酶电泳是项非常实用的检验技术,具有十分重要的临床意义。 3.CK亚型同工酶:此外,CK-MB和CK-MM亚型测定常采用琼脂糖凝胶等电聚焦电泳或高压电 泳,由于操作比一般电泳麻烦,故常规常测定尚无法普及。目前引进的自动电泳仪,有试剂盒提 供,可作CK亚型分析,参考值:CK-MM1(57.7±4.7)%;CK-MM2为(26.5±5.3);CK-MM3为 (15.8±2.5)%;CK-MM3 /CK-MM1比值为0.28±0.05(范围0.15-0.39),阳性决定性水平>0.5。AMI第一天 血中以MM3为主,但第二天以后则以MM1为主。采用电泳法分离CKMB,CKMB1和CKMB2在正常人

血中CK-MB2极微,一般比值近似1,在急性心肌梗塞后4-6CKMB,亚型即在血循环中可被检测到, 故MB,MB1的比例明显升高,并早于总CK-MB片段的增高。当心肌梗塞缓解后此比值也逐渐下降。 也可用干溶栓治疗后的病清观空 三、结合酶免疫标记抗体技术,检测脑脊液内寡克隆区带 曾有作者报道采用二维电泳和银染进行CSF蛋白质的分离与鉴定,方法繁复,耗时,现采用高分辨 率琼脂糖凝胶电泳分离CSF中的蛋白质,并经抗原和辣根过氧化物酶标记的特异性gG抗体进行反应 来鉴定"寡克隆区带”(OCB) 经此酶免疫标记放大技术和显色步骤,蛋白质浓度达31-125u机L即可 予以检测,可使检测灵敏度提高了100倍,这样脑脊液无须浓缩,避免了在浓缩过程中蛋白质的丢 失。可用于证实和分辨0CB免疫球蛋白及其型别。若在脑脊液标本中检出OCB,而其相应标本中未 能检出区带,则为阳性,真实地反映是由中枢神经系统本身合成的免疫球蛋白,具有重要临床意 义。它是一种定性检测,在多发性硬化症时,OCB是一个十分重要的标志物。但须将患者血清和 CSF在同一天同步进行分析,以认证不同来源的免疫球蛋白。中枢合成免疫球蛋白是中枢神经系统 疾患的一个重要信号,主要用于诊断和鉴别诊断中枢神经系统疾患如:多发性硬化症、痴呆、脊髓 炎、神经性梅素等。 四、利用固相内抗原、抗体反应分离脂蛋白(),用于心、脑血管独立的危险因子的检测 该该技术是利用抗原、抗体反应将电泳分离的脂蛋白予以鉴别。血清经琼脂糖凝胶电泳,再经染 色后可出现不同脂蛋白的条带。由于凝胶中脂蛋白等电点不同,不仅可区分、前B和邮区带,又因 介质中含有抗脂蛋白(a)LP(a)抗体及阳离子存在,抗LP(a)与患者血清中LP(a)结合形成 复合物,阳离子则抑制其他脂蛋白的泳动速度,LP()便与其他脂蛋白分离开来,使分辨十分清晰 的LP()条带呈现在前郇与v区域之间,将阳性条带扫描后,可获得区带的面积及其百分含量,该方 法使电泳技术趋于完美,大大减少了手工操作的弊端,既可予以半定量,又能将胶片保存,便于比 较。提高对心、脑血管独立的危险因子-LP()检测的敏感性和特异性 五、按分子量大、进行非浓缩尿蛋白电泳,区分尿蛋白类型 尿蛋白电泳可将尿液中各种蛋白质分离用于区分尿蛋白类型,可在无损伤的情况下,协助临床判 断肾脏损伤的部位。国内部分实验室采用SDS-PAGE盘状电泳进行尿蛋白分离,该法具有局限性,耗 时,操作繁琐,标本要求高,尿液需预浓缩,不适于临床实验室广泛开展。SDS-AGE电泳不需预浓 缩,尿蛋白电泳后呈现出中、高分子量蛋白区,带主要反应肾小球病变;呈现出低分子量蛋白区 带,可见于肾小管病变及溢出性蛋白尿;混合性蛋白尿则可见到大、中、小各种分子量区带,示肾 小球及肾小管均受累及。扫描仪可对电泳后尿液中蛋白质剖象进行扫描,求出百分比,以显示肾小 球或肾小管损伤程度,其电泳图谱及扫描图形可作为资料永载,利于分析比较。该技术的最大进步 是尿液不需预浓缩,操作简便,结果清晰,仅需三小时即可完成试验,还备有完整的定性标准,易 于量化,便于分析,对肾脏疾的诊断,鉴别诊断,指导治疗和判断愈合颇有价值。 四、电泳技术的展望 中国在电泳技术临床应用上与国外相比,存在一定的差距。若按照国外实验室标准,国 内三级甲等、 三级乙等医院均需配备自动电泳仪,但目前国内不少三级甲等医院仍没有使用 这类设备。电泳项目国内一般也只以血清蛋白为主,而国外所做项目包括血清蛋白、尿蛋 白、CK、LD、ALP、GGT同功酶、各种脂蛋白的胆固醇甘油三酯等。对于分析用的电泳试剂,欧 美这几年均以琼脂糖凝胶电泳片占95%以上,国内仍有40%市场采用醋酸纤维素薄膜电泳片,这也 是与国外差距较大的地方。但是,近年来一些在大专院校、科研院所使用的利科研类电泳技 术,如高效毛细管电泳、毛细管电泳芯片、电泳-色谱-质谱联用等,已开始在临床实验室使 用。如果能有公司厂家开发像生化分析仪上的试剂一样,生产出质量稳定、相关参数明确的 专门配套试剂,将加快其推广应用的进程
血中CK-MB2极微,一般比值近似1,在急性心肌梗塞后4-6h CKMB2亚型即在血循环中可被检测到, 故MB2 /MB1的比例明显升高,并早于总CK-MB片段的增高。当心肌梗塞缓解后此比值也逐渐下降。 也可用于溶栓治疗后的病情观察。 三、结合酶免疫标记抗体技术,检测脑脊液内寡克隆区带 曾有作者报道采用二维电泳和银染进行CSF蛋白质的分离与鉴定,方法繁复,耗时,现采用高分辨 率琼脂糖凝胶电泳分离CSF中的蛋白质,并经抗原和辣根过氧化物酶标记的特异性IgG抗体进行反应 来鉴定"寡克隆区带"(OCB),经此酶免疫标记放大技术和显色步骤,蛋白质浓度达31-125ul/L即可 予以检测,可使检测灵敏度提高了100倍,这样脑脊液无须浓缩,避免了在浓缩过程中蛋白质的丢 失。可用于证实和分辨OCB免疫球蛋白及其型别。若在脑脊液标本中检出OCB,而其相应标本中未 能检出区带,则为阳性,真实地反映是由中枢神经系统本身合成的免疫球蛋白,具有重要临床意 义。它是一种定性检测,在多发性硬化症时,OCB是一个十分重要的标志物。但须将患者血清和 CSF在同一天同步进行分析,以认证不同来源的免疫球蛋白。中枢合成免疫球蛋白是中枢神经系统 疾患的一个重要信号,主要用于诊断和鉴别诊断中枢神经系统疾患如:多发性硬化症、痴呆、脊髓 炎、神经性梅素等。 四、利用固相内抗原、抗体反应分离脂蛋白(a),用于心、脑血管独立的危险因子的检测 该该技术是利用抗原、抗体反应将电泳分离的脂蛋白予以鉴别。血清经琼脂糖凝胶电泳,再经染 色后可出现不同脂蛋白的条带。由于凝胶中脂蛋白等电点不同,不仅可区分a、前β和β区带,又因 介质中含有抗脂蛋白(a)[LP(a)]抗体及阳离子存在,抗LP(a)与患者血清中LP(a)结合形成 复合物,阳离子则抑制其他脂蛋白的泳动速度,LP(a)便与其他脂蛋白分离开来,使分辨十分清晰 的LP(a)条带呈现在前β与γ区域之间,将阳性条带扫描后,可获得区带的面积及其百分含量,该方 法使电泳技术趋于完美,大大减少了手工操作的弊端,既可予以半定量,又能将胶片保存,便于比 较。提高对心、脑血管独立的危险因子-LP(a)检测的敏感性和特异性。 五、按分子量大小进行非浓缩尿蛋白电泳,区分尿蛋白类型 尿蛋白电泳可将尿液中各种蛋白质分离用于区分尿蛋白类型,可在无损伤的情况下,协助临床判 断肾脏损伤的部位。国内部分实验室采用SDS-PAGE盘状电泳进行尿蛋白分离,该法具有局限性,耗 时,操作繁琐,标本要求高,尿液需预浓缩,不适于临床实验室广泛开展。SDS-AGE电泳不需预浓 缩,尿蛋白电泳后呈现出中、高分子量蛋白区,带主要反应肾小球病变;呈现出低分子量蛋白区 带,可见于肾小管病变及溢出性蛋白尿;混合性蛋白尿则可见到大、中、小各种分子量区带,示肾 小球及肾小管均受累及。扫描仪可对电泳后尿液中蛋白质剖象进行扫描,求出百分比,以显示肾小 球或肾小管损伤程度,其电泳图谱及扫描图形可作为资料永载,利于分析比较。该技术的最大进步 是尿液不需预浓缩,操作简便,结果清晰,仅需三小时即可完成试验,还备有完整的定性标准,易 于量化,便于分析,对肾脏疾的诊断,鉴别诊断,指导治疗和判断愈合颇有价值。 四、电泳技术的展望 中国在电泳技术临床应用上与国外相比,存在一定的差距。若按照国外实验室标准,国 内三级甲等、三级乙等医院均需配备自动电泳仪,但目前国内不少三级甲等医院仍没有使用 这类设备。电泳项目国内一般也只以血清蛋白为主,而国外所做项目包括血清蛋白、尿蛋 白、CK、LD、ALP、GGT同功酶、各种脂蛋白的胆固醇/甘油三酯等。对于分析用的电泳试剂,欧 美这几年均以琼脂糖凝胶电泳片占95%以上,国内仍有40%市场采用醋酸纤维素薄膜电泳片,这也 是与国外差距较大的地方。但是,近年来一些在大专院校、科研院所使用的科研类电泳技 术,如高效毛细管电泳、毛细管电泳芯片、电泳-色谱-质谱联用等,已开始在临床实验室使 用。如果能有公司厂家开发像生化分析仪上的试剂一样,生产出质量稳定、相关参数明确的 专门配套试剂,将加快其推广应用的进程

从目前临床实验室的要求来看电泳仪必须具有下列功能: (1)全自动化:必须达到人员离机作业,由点样到出报告机器全能完成 (2)速度快:所有项目应在60mi内完成同时具备急诊项目如CK、LD等同工酶及亚型项 目。为临床提供及时、准确的诊断信息。 (3)项目齐全:除了血清蛋白、脂蛋白、血红蛋白、CK、LD同工酶等传统项目外必须还 能完成尿蛋白、脑脊液蛋白、免疫固定(单克隆抗体)、碱性磷酸酶(ALP)和(y~谷氨酰转肽酶 (GGT)同工酶、胆固醇(高密度/极低密度/低密度脂蛋白)、脂蛋白()等最新检验项目. (4)敏感度高:必须采用敏感度高的电泳片。如琼脂糖凝胶系统,才能得到准确度高,分 辨率高的电泳结果。 纪9 蛋 电泳代慧 且电泳技术方面的临 通首 集束化的 细 变电泳技 卡的出现 红细 其他 组织,以及实装 等样品,能对蛋白质,多肽、 特 产物等物质分离。广泛用于临床疾病诊 害白质分析 临床 离子、药物及其代 物分析 理 同工酶分析 PCR产物 析 由于它具有高效 发 应用 电泳技术也在不断发展和更新,相随者电泳技的不新发展,其在临床医学和分子尘物学将的资应
从目前临床实验室的要求来看电泳仪必须具有下列功能: (1)全自动化:必须达到人员离机作业,由点样到出报告机器全能完成。 (2)速度快:所有项目应在60min内完成同时具备急诊项目如CK、LD等同工酶及亚型项 目。为临床提供及时、准确的诊断信息。 (3)项目齐全:除了血清蛋白、脂蛋白、血红蛋白、CK、LD同工酶等传统项目外必须还 能完成尿蛋白、脑脊液蛋白、免疫固定(单克隆抗体)、碱性磷酸酶(ALP)和(g-谷氨酰转肽酶 (GGT)同工酶、胆固醇(高密度/极低密度/低密度脂蛋白)、脂蛋白(a)等最新检验项目。 (4)敏感度高:必须采用敏感度高的电泳片。如琼脂糖凝胶系统,才能得到准确度高,分 辨率高的电泳结果。 现已有较新研究报道蛋白电泳用于泪液、唾液和头发蛋白质分析。而且电泳技术方面的临床进展也日新月异,上个 世纪90年代中期,测序仪重大改进,集束化的毛细管电泳代替凝胶电泳。2001年完成人类基因组框架图 提前完成得益于多通道、集束化的毛细管凝胶电泳技术的出现。近期发展起来的毛细管电泳是一种新型的区 带电泳,又称毛细管带电泳,它能检测尿样、血浆、血清、脑脊液、红细胞、其他体液或组织,以及实验动物活体 等样品。能对蛋白质、多肽、氨基酸、糖、酶、DNA、寡核苷酸、病毒、小和生物活性分子、离子、药物及其代谢 产物等物质分离。广泛用于临床疾病诊断、临床蛋白质分析、临床药物分析、代谢研究、病理研究、同工酶分析、 PCR产物分析、DNA片段及序列分析等。由于它具有高效、快速、灵敏、应用范围广、所需样品少和可自 动化等特点,正逐渐被广大临床实验室所接受。随着国际、国内科技发展的日新月异和检验医学发展的突飞猛进, 电泳技术也在不断发展和更新,相信随着电泳技术的不断发展,其在临床医学和分子生物学领域将有广阔应用前 景
按次数下载不扣除下载券;
注册用户24小时内重复下载只扣除一次;
顺序:VIP每日次数-->可用次数-->下载券;
- 《临床检验仪器学》课程教学资源(知识扩充)第五章 色谱分析技术和色谱分析仪器.pdf
- 《临床检验仪器学》课程教学资源(知识扩充)第四章 光谱分析技术及相关仪器.pdf
- 《临床检验仪器学》课程教学资源(学习指导)第十一章 实验室自动化系统.pdf
- 《临床检验仪器学》课程教学资源(学习指导)第十章 自动生化分析技术和相关仪器.pdf
- 《临床检验仪器学》课程教学资源(学习指导)第九章 尿液分析技术和相关仪器.pdf
- 《临床检验仪器学》课程教学资源(学习指导)第八章 血液分析技术和相关仪器.pdf
- 《临床检验仪器学》课程教学资源(学习指导)第七章 微生物检测技术和相关仪器.pdf
- 《临床检验仪器学》课程教学资源(学习指导)第六章 电泳技术和常用电泳仪.pdf
- 《临床检验仪器学》课程教学资源(学习指导)第五章 色谱分析技术和色谱分析仪器.pdf
- 《临床检验仪器学》课程教学资源(学习指导)第四章 光谱分析技术及相关仪器.pdf
- 《临床检验仪器学》课程教学资源(知识扩充)第三章 离心技术与离心机.pdf
- 《临床检验仪器学》课程教学资源(作业习题)第三章 离心技术与离心机(含答案).pdf
- 《临床检验仪器学》课程教学资源(学习指导)第三章 离心技术与离心机.pdf
- 《临床检验仪器学》课程教学资源(知识扩充)第二章 显微镜技术和显微镜.pdf
- 《临床检验仪器学》课程教学资源(作业习题)第二章 显微镜技术和显微镜(含答案).pdf
- 《临床检验仪器学》课程教学资源(学习指导)第二章 显微镜技术和显微镜.pdf
- 《临床检验仪器学》课程教学资源(知识扩充)第一章 概论.pdf
- 《临床检验仪器学》课程教学资源(作业习题)第一章 概论(含答案).pdf
- 《临床检验仪器学》课程教学资源(学习指导)第一章 概论.pdf
- 《临床检验仪器学》课程教学大纲(医学检验、预防医学、医学影像学、生物医学工程等专业).pdf
- 《临床检验仪器学》课程教学资源(知识扩充)第七章 微生物检测技术和相关仪器.pdf
- 《临床检验仪器学》课程教学资源(知识扩充)第九章 尿液分析技术和相关仪器.pdf
- 《临床检验仪器学》课程教学资源(知识扩充)第十章 自动生化分析仪和相关仪器.pdf
- 《临床检验仪器学》课程教学资源(知识扩充)第十一章 实验室自动化系统.pdf
- 《临床检验仪器学》课程教学资源(知识扩充)第八章 血液分析技术与相关仪器.pdf
- 《临床检验仪器学》课程教学资源(作业习题)第四章 光谱分析技术及相关仪器(含答案).pdf
- 《临床检验仪器学》课程教学资源(作业习题)第五章 色谱分析技术和色谱分析仪器(含答案).pdf
- 《临床检验仪器学》课程教学资源(作业习题)第六章 电泳技术和常用电泳仪(含答案).pdf
- 《临床检验仪器学》课程教学资源(作业习题)第七章 微生物检测技术和相关仪器(含答案).pdf
- 《临床检验仪器学》课程教学资源(作业习题)第八章 血液分析技术和相关仪器(含答案).pdf
- 《临床检验仪器学》课程教学资源(作业习题)第九章 尿液分析技术和相关仪器(含答案).pdf
- 《临床检验仪器学》课程教学资源(作业习题)第十章 自动生化分析技术和相关仪器(含答案).pdf
- 《临床检验仪器学》课程教学资源(作业习题)第十一章 实验室自动化系统(含答案).pdf
- 《临床检验仪器学》课程教学资源(PPT课件)第一章 概论.ppt
- 《临床检验仪器学》课程教学资源(PPT课件)第三章 离心技术与离心机.ppt
- 《临床检验仪器学》课程教学资源(PPT课件)第九章 尿液分析技术和相关仪器.ppt
- 《临床检验仪器学》课程教学资源(PPT课件)第十章 自动生化分析技术和相关仪器.ppt
- 《临床检验仪器学》课程教学资源(PPT课件)第十一章 实验室自动化系统课件.ppt
- 《临床检验仪器学》课程教学资源(PPT课件)第二章 显微镜技术和显微镜.ppt
- 《临床检验仪器学》课程教学资源(PPT课件)第四章 光谱分析技术与相关仪器.ppt