《基因工程概论》课程教学资源（PPT课件）电泳技术概论

电泳技术概论 讲授人:牛颜冰

电泳技术概论 讲授人：牛颜冰

电泳是指带电粒子在电场中向 与其自身带相反电荷的电极移动 的现象 带负电粒子 正极 负极 带正电粒子

• 电泳 是指带电粒子在电场中向 与其自身带相反电荷的电极移动 的现象 正极 负极 带负电粒子 带正电粒子

第一节基本原理 迁移率(或泳动度)是指带电颗粒在单位 电场强度下泳动的速度,可用下列公式计 算 U=UE=(dt/(1)=dl/Vt U为迁移率(cm2V1min1);u为颗粒泳 动速度(cms-1);E为电场强度(V·cm1); d为颗粒泳动的距离(cm);1为滤纸有效 长度(cm);V为实际电压(V);t为通电 时间(s或min)。通过测量d,l,V,t, 即可计算出被分离物质的迁移率

第一节 基本原理 • 迁移率（或泳动度）是指带电颗粒在单位 电场强度下泳动的速度，可用下列公式计 算： • Ｕ =υ/E =(d/t)/(V/l) =dl/Vt • Ｕ为迁移率（cm2·V -1·min-1）；υ为颗粒泳 动速度（cm·s -1）；E为电场强度（V·cm-1）； d为颗粒泳动的距离（cm）；l为滤纸有效 长度（cm）；V为实际电压（V）；t为通电 时间（s或min）。通过测量d, l, V, t, 即可计算出被分离物质的迁移率

各种血浆蛋白的等电点及迁移率 名称 等电点 迁移率(迁移率单位)分子量 清蛋白 4.88 5. 6900 n1-球蛋白 5.06 2000 02-球蛋白 5.06 30000 β一球蛋白 5.12 -2.89000-150000 y一球蛋白 6.85-7.50 156000-30000 1迁移率单位=105cm2V1min1 在确定的条件下,某物质的迁移率为常 数,是该物质的化学特征常数

• 1迁移率单位= 10-5 cm2·V -1·min-1 • 在确定的条件下，某物质的迁移率为常 数，是该物质的化学特征常数

°颗粒带净电荷多,直径小而接近于 球形,则在电场中泳动速度快,反 之则泳动速度慢 迁移率还与分子的形状,介质粘度 颗粒所带电荷有关,迁移率与颗表 面电荷成正比,与介质粘度及颗粒 半径成反比

• 颗粒带净电荷多，直径小而接近于 球形，则在电场中泳动速度快，反 之则泳动速度慢。 • 迁移率还与分子的形状，介质粘度， 颗粒所带电荷有关，迁移率与颗表 面电荷成正比，与介质粘度及颗粒 半径成反比

影响电泳速度的外界因素 1.电场强度 2.溶液的p值 3.溶液的离子强度 4.电渗现象 5.温度的影响 6.支持物的影响

影响电泳速度的外界因素 • 1.电场强度 • 2 .溶液的pH值 • 3.溶液的离子强度 • 4.电渗现象 • 5.温度的影响 • 6.支持物的影响

影响电泳速度的外界因素 1.电场强度 电场强度也称电位梯度,是指单位长度 (每一厘米)支持物体上的电位降,它 对泳动速度起着十分重要的作用 般,电场强度越高,带电颗粒移动速 度越快

影响电泳速度的外界因素 1.电场强度 • 电场强度也称电位梯度，是指单位长度 （每一厘米）支持物体上的电位降，它 对泳动速度起着十分重要的作用。 • 一般，电场强度越高，带电颗粒移动速 度越快

影响电泳速度的外界因素 2.溶液的p值 溶液的pH值决定了带电颗粒解离的 程度,也决定了物质所带净电荷的 多

影响电泳速度的外界因素 2．溶液的pH值 • 溶液的pH值决定了带电颗粒解离的 程度，也决定了物质所带净电荷的 多少

影响电泳速度的外界因素 3.溶液的离子强度 电泳液中的离子增加会使电泳迁移率降 低,原因是带电的离子会吸引相反符号 的离子聚集在其周围,相成一个与运动 粒子符号相反的离子氛( Ionic atmosphere),它使该离子向相反的方 向运动,从而降低了该粒子的迁移率

影响电泳速度的外界因素 3.溶液的离子强度 • 电泳液中的离子增加会使电泳迁移率降 低，原因是带电的离子会吸引相反符号 的离子聚集在其周围，相成一个与运动 粒子符号相反的离子氛（ionic atmosphere），它使该离子向相反的方 向运动，从而降低了该粒子的迁移率

离子的这种阻碍效应是与其浓度和价数 相关的。用离子强度来表示,它的数值 如下式 离子强度=1∑Czr2 °式中s表示共有s种离子,C和Z;分别代表 每种离子的浓度(mo1/L)和价数

• 离子的这种阻碍效应是与其浓度和价数 相关的。用离子强度来表示，它的数值 如下式： • 式中s表示共有s种离子，Ci和Zi分别代表 每种离子的浓度（mol/L）和价数