《基因工程概论》课程教学资源（PPT课件）第三章 基因克隆的载体

生 基因程原理 niuniugood@yahoo.com.cn

基 因 工 程 原 理 牛 颜 冰 niuniugood@yahoo.com.cn

程愿理》 第一章导论 第二章基因操作的工具酶 第三章基因克隆的载体 第四章基因克隆的策略 第五章克隆基因的表达 第六章基因工程的基本技术

《基因工程原理》 第一章 导 论 第二章 基因操作的工具酶 第三章 基因克隆的载体 第四章 基因克隆的策略 第五章 克隆基因的表达 第六章 基因工程的基本技术

第三章基因克隆的载体 引言( introduction) 第一节质粒载体( plasimid vectors) 第二节噬菌体载体( phage vectors) 第三节柯斯质粒载体( cosmid vectors) 第四节人工染色体载体(BY/HAC)

第三章 基因克隆的载体 引 言（introduction） 第一节 质粒载体（plasimid vectors） 第二节 噬菌体载体（phage vectors） 第三节 柯斯质粒载体（cosmid vectors） 第四节 人工染色体载体（B/Y/HAC）

引言 基因克隆的本质是使目的基因在特定的条件下得到扩 增和表达,而目的基因本身无法进行复制,所以 就必须借助于“载体”及其“寄主细胞”来宀现。 作为基因克隆的载体必须具备以下特性 A.能在寄主细胞中进行独立的复制和表达; B.具有1-2个选择标记基因,如对抗生素的抗性基因等; 具备多克隆位点(MCS),而且可携带外源DNA片段的长 度范围较宽 D.自身分子量较小,在寄主细胞中的拷贝数高,易于操作和 DNA的制备

引 言 基因克隆的本质是使目的基因在特定的条件下得到扩 增和表达，而目的基因本身无法进行复制，所以 就必须借助于“载体”及其“寄主细胞”来实现。 作为基因克隆的载体必须具备以下特性： A. 能在寄主细胞中进行独立的复制和表达； B. 具有1-2个选择标记基因，如对抗生素的抗性基因等； C. 具备多克隆位点（MCS），而且可携带外源DNA片段的长 度范围较宽。 D. 自身分子量较小，在寄主细胞中的拷贝数高，易于操作和 DNA的制备

Characteristiyof vectorsfor gene cloning Foreign gene Marker

Characteristics of vectors for gene cloning MCS Marker Foreign gene

第三章基因克隆的载体 引言( introduction) 第一节质粒载体( plasimid vectors 第二节噬菌体载体( phage vectors) 第三节柯斯质粒载体( cosmid vectors) 第四节人工染色体载体( B/Y/HAC)

第三章 基因克隆的载体 引 言（introduction） 第一节 质粒载体（plasimid vectors） 第二节 噬菌体载体（phage vectors） 第三节 柯斯质粒载体（cosmid vectors） 第四节 人工染色体载体（B/Y/HAC）

第一节质粒载体 (plasimid vectors) 1、质粒载体的生物学特性 2、质粒载体相关知识介绍

第一节 质粒载体 （plasimid vectors） 1、质粒载体的生物学特性 2、质粒载体相关知识介绍

质粒载体的生物学特性 (1)质粒是一种广泛从在于细菌细胞中染色体以 外的能自主的复制 的裸露的环状双链 bacterium DNA分子,比病毒 plasmid 更简单。在霉菌、 蓝藻、酵母和一些 bacterial chromosome 动植物细胞中也发 现了质粒,目前对 细菌的质粒研究得 比较深入,特别是 大肠杆菌的质粒。 1 um

1.质粒载体的生物学特性 （1）质粒是一种广泛从在于细菌细胞中染色体以 外的能自主的复制 的裸露的环状双链 DNA分子，比病毒 更简单。在霉菌、 蓝藻、酵母和一些 动植物细胞中也发 现了质粒，目前对 细菌的质粒研究得 比较深入，特别是 大肠杆菌的质粒

1.质粒载体的生物学特性 (2)质粒的大小差异很大,最小的只有1kb,只能 编码中等大小的2-3种蛋白质分子,最大的达到 200kb (3)质粒的生存在寄主细胞中“友好”地“借 居”,离开了寄主它本身无法复制,它可以赋 予寄主一些非色体控制的遗传性状,以利 于寄 主的生存。比如,对抗菌素的抗性,对重金属 的抗性等

1.质粒载体的生物学特性 （2）质粒的大小差异很大，最小的只有1kb,只能 编码中等大小的2-3种蛋白质分子，最大的达到 200kb。 （3）质粒的生存在寄主细胞中“友好”地“借 居” ，离开了寄主它本身无法复制，它可以赋 予 寄主一些非染色体控制的遗传性状，以利 于寄 主的生存。比如，对抗菌素的抗性，对重金属 的抗性等

1.质粒载体的生物学特性 (4)质粒的复制类型一种质粒在宿主细胞中存 在的数目称为该质粒的拷贝数。据拷贝数将质粒分为两 种复制型:“严紧型”质粒( stigent plasmid),拷 贝数为1-3;“松弛型”质粒( relaxed plasmid),拷 贝数为10-60。不过,即使是同一质粒,其拷贝数在不 同的寄主细胞间也可能有很大的变化。 (5)质粒的不亲和性两种亲缘关系密切的不同 质粒不能在同一宿主细胞中稳定共存。已鉴别出25个 以上大肠杆菌质粒的不亲和群,它们之间是相容的

1.质粒载体的生物学特性 （4）质粒的复制类型一种质粒在宿主细胞中存 在的数目称为该质粒的拷贝数。据拷贝数将质粒分为两 种复制型：“严紧型”质粒（stigent plasmid）,拷 贝数为1-3；“松弛型”质粒（relaxed plasmid）,拷 贝数为10-60。不过，即使是同一质粒，其拷贝数在不 同的寄主细胞间也可能有很大的变化。 （5）质粒的不亲和性两种亲缘关系密切的不同 质粒不能在同一宿主细胞中稳定共存。已鉴别出25个 以上大肠杆菌质粒的不亲和群，它们之间是相容的