厦门大学：《现代生物实验学》课程教学课件（PPT讲稿）实验十六、显微摄影技术.ppt_大学文库

实验十六显微摄影术一、实验原理: 光源入射光束,经聚光镜有效聚焦到标本上,由标本表面的光入射到物镜上,标本经物镜放大,其光线再经照相目镜聚焦在照相暗盒的胶片上,光电转换器将标本成象的光线转换成电信号,自动曝光控制器根据信号的强弱、胶卷尺寸的大小、胶卷感光速度、胶卷倒易率失效补偿、色温大小等数据由机内电子计算机进行计算、修正,准确算出最佳曝光时间.经曝光后,就可以在胶片上获得与标本相反的实象,即潜像

二、试剂与器材显微镜、摄影装置、胶卷

显微摄影装置

10 13 14 15 9 19 18 17 16 图3-1自动曝光调控装置 1.曝光调节显示器；2.倒易律失效补偿显示器；3.ASA胶片速度显示器；4.胶片规格显示器；5.胶片规格选择钮；6.工作灯；7.安全灯；8.曝光钮；9.ASA胶片感光度刻度盘；10.倒易律失效补偿刻度盘；11.电源开关；12.曝光时间显示器；13.躁光方式选择刻度盘；14.曝光调节刻度盘；15.躁光时间重现钮；16.自动曝光固锁按钮；17.时间停止/进片钮；18.指令读片；19.胶片拍完灯

三. 实验程序 (一）显微摄影 1·把“MODE/EXPOSURE TIME” 曝光方式选择器的旋钮对准“AUTO"位以进行自动曝光。 2·按下“FORMAT”胶卷规格选择器上3个按钮中标明“35”的按键。 3·打开照相机的后盖，装入胶片。把胶片的头端放人收片轴的片槽时，不要使它超出片槽的另一端。 4·按自动曝光控制器的“WINDING”卷片钮2-3次，进行空卷空拍。在卷胶片时，要观察胶片的计数器是否转动。如果没有转动，说明胶片的齿孔与片轴的齿牙没有衔接好，需要再一次打开照相机后盖，使其紧密地衔接好

5·选用所使用胶片的感光度。目前国内所用的胶片多为 ASA100。 6·选定所使用胶片的倒易律失效的补偿指数。然后对准刻度盘。一般情况下，使用黑白胶卷对准"4"，彩色胶卷对准"2"。 7·测量色温，彩色照相时，把照明的色温调整到胶片规定的色温上。测量色温应在标本或载玻片的空白处进行，而不能在有标本的区域进行。 8. 黑白照相时，把照明光源的电压调在6V以上。使用绿色滤色镜，或在照明度亮的时候使用中灰滤色镜。 9·对焦与调节孔径光阑，将标本对焦并调节聚光镜的孔径光阑，以取得合适的反差。孔径光阑一般收缩到物镜数值孔径的60%到80%

10·根据标本的分布密度情况，把“EXPOSURE ADJ”曝光补偿刻度盘调整到适当的位置上“1” 。 11·对焦转动调焦目镜上的屈光度调节环，使取景框中的双十字线达到最清晰的程度。在使用低倍率物镜时，需要使用对焦望远镜(FT -36)。 12·按下曝光按钮“EXPOSE”，快门开启，胶片感光;曝光同时，工作信号灯“Work”灯亮;快门闭合，曝光结束，灯熄灭，胶卷已自动进片一帧。 12、根据实际需要重复拍摄,直到整个胶卷拍摄完时,胶片的结束信号灯“FILM END”亮. 13、按操作规程取下胶卷

四、注意事项 1、装入胶片后，要注意按自动曝光控制器的 “WINDING” 卷片钮。 2、注意选定所使用胶片的倒易律失效的补偿指数。 3、注意调好“双十字”线

五、思考题 1、显微镜摄影时应掌握哪些关键步骤？