安徽医科大学基础医学院：《分子生物学》课程教学资源（PPT课件讲稿）第9章 基因治疗

第九章基因治疗 概念： 经典的基因治疗：指正常的基因整合入细胞 基因组以校正或置换致病基因的一种治疗方 法。 广义的基因治疗：将某种遗传物质转移到患 者细胞内，使其在体内发挥作用，以达到治 疗疾病目的的方法

第九章 基因治疗 一、概念： ◼ 经典的基因治疗：指正常的基因整合入细胞 基因组以校正或置换致病基因的一种治疗方 法。 ◼ 广义的基因治疗：将某种遗传物质转移到患 者细胞内，使其在体内发挥作用，以达到治 疗疾病目的的方法

基因治疗分类 体细胞(somatic cell) 只限于某一体细胞的 基因治疗 基因的改变 ÷只限于某个体的当代 对缺陷的生殖细胞进 生殖细胞(germline) 行矫正 基因治疗 当代及子代

▪基因治疗分类 ➢ 体细胞(somatic cell) 基因治疗 ➢ 生殖细胞(germline) 基因治疗 ❖ 只限于某一体细胞的 基因的改变 ❖ 只限于某个体的当代 ❖ 对缺陷的生殖细胞进 行矫正 ❖ 当代及子代

1973年第一例人体实验 1978年第二例基因治疗实验 基因治疗动物实验广泛开展 Dr Anderson(1980)首先阐明 基因治疗前景和发展方向 Rosenberg(1990)利用逆转录 病毒将基因导入肿瘤浸润淋巴细胞 (TIL) ,并将TIF输回体内，TIF集中 在肿瘤部位，表达neoR

1973年第一例人体实验 1978年第二例基因治疗实验 基因治疗动物实验广泛开展 Dr Anderson（1980）首先阐明 基因治疗前景和发展方向 Rosenberg（1990）利用逆转录 病 毒 将 基 因 导 入 肿 瘤 浸 润 淋 巴 细 胞 （TIL），并将TIF输回体内，TIF集中 在肿瘤部位，表达neoR

1990年9月14日：第一例正式批准的基因治 疗实验开始进行 (美国 世界上开展基因治疗最早的国家 大规模进行基因治疗临床实验必须经历以下阶段： 体外试验和动物试验 I期临床试验 6--10名志愿者 I期临床试验 20-30名志愿者 期临床试验 充分分疗效、安全性 中国 1991年7月开始进行基因治疗试验

1990年9月14日：第一例正式批准的基因治 疗实验开始进行 （美国，世界上开展基因治疗最早的国家） 大规模进行基因治疗临床实验必须经历以下阶段： 体外试验和动物试验 I期临床试验——6---10名志愿者 II期临床试验——20---30名志愿者 III期临床试验——充分分析疗效、安全性 中国 1991年7月开始进行基因治疗试验

一、基因治疗的策略 The Strategy of Gene Therapy

一、基因治疗的策略 The Strategy of Gene Therapy

【一)基因置换(gene replacement 定义：指将特定的目的基因导入特定细胞，通过 定位重组，以导入的正常基因置换基因组内原有的 缺陷基因。 目的：将缺陷基因的异常序列进行矫正。 对缺陷基因的缺陷部位进行精确的原位修复， 不涉及基因组的任何改变

（一）基因置换（gene replacement） 定义：指将特定的目的基因导入特定细胞，通过 定位重组，以导入的正常基因置换基因组内原有的 缺陷基因。 目的：将缺陷基因的异常序列进行矫正。 对缺陷基因的缺陷部位进行精确的原位修复， 不涉及基因组的任何改变

基因同源重组技术 又称为基因打靶(gene targeting) ·定点整合的条件：转导基因的载体与染色 体上的DNA具有相同的序列。带有目的基 因的载体就能找到同源重组的位点，进行 部分基因序列的交换，使基因置换这一治 疗策略得以实现

◼ 又称为基因打靶(gene targeting） ◼ 定点整合的条件:转导基因的载体与染色 体上的DNA具有相同的序列。带有目的基 因的载体就能找到同源重组的位点，进行 部分基因序列的交换，使基因置换这一治 疗策略得以实现。 基因同源重组技术

要实现基因置换，需要采用同源重组技 术使相应的正常基因定向导入受体细胞 的基因缺陷部位。 定向导入的发生率约1/100万，采用胚 胎干细胞培养的方法，这种同源重组的 检出率最高可达1/10

◼ 要实现基因置换，需要采用同源重组技 术使相应的正常基因定向导入受体细胞 的基因缺陷部位。 ◼ 定向导入的发生率约1/100万，采用胚 胎干细胞培养的方法，这种同源重组的 检出率最高可达1/10

基因置换必要条件： 1、对导入的基因及其产物有详尽的了解 2、外来基因能有效地导入靶细胞 3、导入基因能在靶细胞中长期稳定存在 4、导入基因能有适度水平的表达 5、基因导入的方法及所用载体对宿主细胞安全无害

基因置换必要条件： 1、对导入的基因及其产物有详尽的了解 2、外来基因能有效地导入靶细胞 3、导入基因能在靶细胞中长期稳定存在 4、导入基因能有适度水平的表达 5、基因导入的方法及所用载体对宿主细胞安全无害

(二)基因添加 基因添加或称基因增补(gene augmentation): 通过导入外源基因使靶细胞表达其本身不表达的 基因。 类型： 在有缺陷基因的细胞中导入相应的正常基因 而细胞内的缺陷基因并未除去，通过导入正常 基因的表达产物，补偿缺陷基因的功能； 向靶细胞中导入靶细胞本来不表达的基因，利 用其表达产物达到治疗疾病的目的

（二） 基因添加 基因添加或称基因增补（gene augmentation）: 通过导入外源基因使靶细胞表达其本身不表达的 基因。 类型: ◼ 在有缺陷基因的细胞中导入相应的正常基因， 而细胞内的缺陷基因并未除去，通过导入正常 基因的表达产物，补偿缺陷基因的功能； ◼ 向靶细胞中导入靶细胞本来不表达的基因，利 用其表达产物达到治疗疾病的目的