广东海洋大学：生物技术系《分子生物》课程实验教学大纲

GD0U-B-11-213 《分子生物学》实验教学大纲 课程编号1340006学分2总学时90理论50实验/上机40 英文课程名 Molecular Biology 开课院农学院开课系生物技术 修订时间2005年09月10日 课程简介 分子生物学是研究蛋白质、核酸等大分子的结构和功能，阐明生命现象和生物学规律的一门新兴学科。 讲授染色体与DA的结构、DA复制和转座子。基因的转录过程及蛋白质的翻译过程。分子生物学研究的 一些基因基本方法。原核生物和真核生物的表达调控。 课程大纲 一、课程的性质与任务 本课程是生物技术专业的专业基础课。分子生物学作为生物学科最新兴、最具活力的科学，在推动我 国科学事业的发展、推动生物技术产业的崛起、推动国民经济持续高速发展等方面均有者举足轻重的影响。 通过对本课程的学习，使学生初步掌握分子生物学的发展史及研究内容：遗传信息的载体一染色体及 的结构和功能：DA是如何复制和转录、如何指导蛋白质的合成的：原核生物和真核生物是如何进行基因 表达和调控的等内容。 二、课程的基本要求 要求学生对原核生物和真核生物的基因的结构、基因的转录和翻译过程以及基因的表达与调控有深入 理解。 三、面向专业 生物技术专业 四、 先修课程 生物化学、遗传学 五、本课程与其它课程的联系 本课程与生物化学、遗传学、基因工程、蛋白质工程关系密切。生物化学及遗传学为分子生物学的学 习打下了深厚的基础，分子生物学系统知识的学习会使学生对基因工程、蛋白质工程及整个生物技术领域 有更为全面深刻的理解。 六、实验名称与类别： 序号 实哈内容 学时 实验一、大肠杆菌质粒DNA的提取及电泳 6学时 实验二、水稻基因DNA的提取 2 6学时

《分子生物学》实验教学大纲 课程编号 1340006 学分 2 总学时 90 理论 50 实验/上机 40 英文课程名 Molecular Biology 开课院 农学院 开课系 生物技术 修订时间 2005 年 09 月 10 日 课 程 简 介 分子生物学是研究蛋白质、核酸等大分子的结构和功能 ，阐明生命现象和生物学规律的一门新兴学科。 讲授染色体与 DNA 的结构、DNA 复制和转座子。基因的转录过程及蛋白质的翻译过程。分子生物学研究的 一些基因基本方法。原核生物和真核生物的表达调控。 课 程 大 纲 一、 课程的性质与任务 本课程是生物技术专业的专业基础课。分子生物学作为生物学科最新兴、最具活力的科学，在推动我 国科学事业的发展、推动生物技术产业的崛起、推动国民经济持续高速发展等方面均有着举足轻重的影响。 通过对本课程的学习，使学生初步掌握分子生物学的发展史及研究内容；遗传信息的载体—染色体及 DNA 的结构和功能；DNA 是如何复制和转录、如何指导蛋白质的合成的；原核生物和真核生物是如何进行基因 表达和调控的等内容。 二、 课程的基本要求 要求学生对原核生物和真核生物的基因的结构、基因的转录和翻译过程以及基因的表达与调控有深入 理解。 三、 面向专业 生物技术专业 四、 先修课程 生物化学、遗传学 五、 本课程与其它课程的联系 本课程与生物化学、遗传学、基因工程、蛋白质工程关系密切。生物化学及遗传学为分子生物学的学 习打下了深厚的基础，分子生物学系统知识的学习会使学生对基因工程、蛋白质工程及整个生物技术领域 有更为全面深刻的理解。 六、实验名称与类别: 序号 实验内容 学时 1 实验一、大肠杆菌质粒ＤＮＡ的提取及电泳 ６学时 2 实验二、水稻基因ＤＮＡ的提取 ６学时 GDOU-B-11-213

实验三、PCR扩增电泳及产物的回收及核酸定量分析 6学时 实验四、质粒DNA的酶切及重组DNA的构建 6学时 实验五、重组质粒DNA转化大肠杆菌 8学时 6 实验六、Southern印迹 8学时 七、实验目的、内容与要求 实验1大肠杆菌质粒DNA的提取及电泳 实验目的：掌握大肠杆菌质粒DNA的提取的原理及方法，DNM电泳的原理及方法。 实验内容：大肠杆菌质粒DNA的提取及电泳。 实验要求：用碱裂解法提取质粒DNA,要求每两个学生一组，要提取到质粒DNA,并观察到质粒的构 像，并照相完成实验报告。 实验2水稻基因DNA的提取 实验目的：掌握用SDS法提取水稻基因组DNA的原理及方法。 实验内容：水稻基因组DNA的提取。 实验要求：要求每两个学生一组，要提取到水稻基因组DNA,并照相完成实验报告。 实验3PCR扩增电泳及产物的回收及核酸定量分析 实验目的：掌握PCR的原理和方法。 实验内容：用引物从水稻基因组DNA中扩增出目标基因片段，用水稻基因组DNA测定核酸的浓度及质 量。 实验要求：要求每两个学生一组，要求扩增出目标片段，并照相。用学会测定核酸的浓度及质量的原 理及方法，完成实验报告。 实验4质粒DNA的酶切及重组DNA的构建 实验目的：掌握DNA的酶切和连接。 实验内容：质粒DNA的酶切及PCR产物与载体的连接。 实验要求：将连接产物下次备用。 实验5重组质粒DNA转化大肠杆菌 实验目的：掌握重组DA的转化及筛选的原理及方法。 实验内容：感受态大肠杆菌的制备及转化。 实验要求：要求每两个学生一组，获得含蓝白斑的平皿，拍照后完成实验报告。 实验6 Southern印迹 实验目的：掌握Southern印迹的原理和方法 实验内容：酶切DNA的转印，探针标记及杂交。 实验要求：要求每两个学生一组，获得杂交X光片，拍照后完成实验报告

3 实验三、ＰＣＲ扩增电泳及产物的回收及核酸定量分析 ６学时 4 实验四、质粒ＤＮＡ的酶切及重组ＤＮＡ的构建 6 学时 5 实验五、重组质粒ＤＮＡ转化大肠杆菌 ８学时 6 实验六、Ｓouthern 印迹 8 学时 七、实验目的、内容与要求 实验 1 大肠杆菌质粒ＤＮＡ的提取及电泳 实验目的：掌握大肠杆菌质粒ＤＮＡ的提取的原理及方法，DNA 电泳的原理及方法。 实验内容：大肠杆菌质粒ＤＮＡ的提取及电泳。 实验要求：用碱裂解法提取质粒 DNA，要求每两个学生一组，要提取到质粒 DNA，并观察到质粒的构 像，并照相完成实验报告。 实验 2 水稻基因ＤＮＡ的提取 实验目的：掌握用 SDS 法提取水稻基因组 DＮＡ的原理及方法。 实验内容：水稻基因组ＤＮＡ的提取。 实验要求：要求每两个学生一组，要提取到水稻基因组 DNA，并照相完成实验报告。 实验 3 ＰＣＲ扩增电泳及产物的回收及核酸定量分析 实验目的：掌握 PCR 的原理和方法。 实验内容：用引物从水稻基因组 DNA 中扩增出目标基因片段，用水稻基因组 DNA 测定核酸的浓度及质 量。 实验要求：要求每两个学生一组，要求扩增出目标片段，并照相。用学会测定核酸的浓度及质量的原 理及方法，完成实验报告。 实验 4 质粒ＤＮＡ的酶切及重组ＤＮＡ的构建 实验目的：掌握 DNA 的酶切和连接。 实验内容：质粒ＤＮＡ的酶切及 PCR 产物与载体的连接。 实验要求：将连接产物下次备用。 实验 5 重组质粒ＤＮＡ转化大肠杆菌 实验目的：掌握重组 DNA 的转化及筛选的原理及方法。 实验内容：感受态大肠杆菌的制备及转化。 实验要求：要求每两个学生一组，获得含蓝白斑的平皿，拍照后完成实验报告。 实验 6 Ｓouthern 印迹 实验目的：掌握Ｓouthern 印迹的原理和方法 实验内容：酶切 DNA 的转印，探针标记及杂交。 实验要求：要求每两个学生一组，获得杂交 X 光片，拍照后完成实验报告

九、教材与参考书： 本课程选用教材： 《现代分子生物学》（第二版），朱玉贤主著，2002，高等教有出版社 《分子牛物学实验指导》 自编 本课程推荐参考书： 《分子生物学实验指南》，魏群主编，1999，高等教有出版社和施普林格出版社 《分子遗传学)，孙乃恩、孙东旭、朱德熙编著，190，南京大学出版社 《分子生物学实验技术》，郝福英、朱玉贤编著，1998，北京大学出版社 《分子遗传学》，张玉静主著，2000，科学出版社 九、考核方式： 实验结果评定的平时成绩。 执笔：胡汉桥 审核： 批准人： 时间：

九、教材与参考书： 本课程选用教材： 《现代分子生物学》（第二版），朱玉贤主著，2002，高等教育出版社 《分子生物学实验指导》 自编 本课程推荐参考书： 《分子生物学实验指南》，魏群主编，1999，高等教育出版社和施普林格出版社 《分子遗传学》，孙乃恩、孙东旭、朱德熙编著，1990，南京大学出版社 《分子生物学实验技术》，郝福英、朱玉贤编著，1998，北京大学出版社 《分子遗传学》，张玉静主著，2000，科学出版社 九、考核方式: 实验结果评定的平时成绩。 执笔:胡汉桥 审核: 批准人: 时间: