徐州医科大学：质谱技术在临床微生物领域应用进展（学术讲座稿，主讲人：顾兵）

捨州醫剂大学 XUZHOU MEDICAL UNIVERSITY 质谱技术在临床微生物领域应用进展 顾兵 2016-07-21

质谱技术在临床微生物领域应用进展 顾兵 2016-07-21

同徐州号利太导 提纲 微生物质谱技术的原理 。质谱技术在病原菌鉴定中的应用 ·质谱技术在耐药性预测中的应用 ·趣谈临床微生物科研 ·质谱技术对微生物工作流程的改进

提 纲 • 微生物质谱技术的原理 • 质谱技术在病原菌鉴定中的应用 • 质谱技术在耐药性预测中的应用 • 趣谈临床微生物科研 • 质谱技术对微生物工作流程的改进

偷州嘴利太手 对快速准确的病原菌 鉴定和药敏试验的迫切需求 Sepsis is a medical emergency 1o0% Patient survival 80% rate (% 60% Patients 40% with effective 20% antibiotic therapy ohours 1 2 3 69122436 Time to antibiotics Kumar A.Roberts D.Wood KE,et al.:Duration of hypotension before initiation of effective antimicrobial therapy is the critical determinant of survival in human septic shock.Crit Care Med,34:1589-1596,2006

Kumar A, Roberts D, Wood KE, et al.: Duration of hypotension before initiation of effective antimicrobial therapy is the critical determinant of survival in human septic shock. Crit Care Med, 34: 1589-1596, 2006. 对快速准确的病原菌 鉴定和药敏试验的迫切需求

爸徐州号科大手 病例1：改变命运的预后 。1 女，8岁 。 2岁被诊断为囊性纤维化 ·在过去2年间肺功能严重下降 ·2012年出现在肺移植手术的名单上 ·每月进行痰培养：鉴定为非发酵革兰阴性杆菌 铜绿假单胞菌 Vs 洋葱伯克霍尔德菌

病例1: 改变命运的预后 • 女，8岁 • 2岁被诊断为囊性纤维化 • 在过去2年间肺功能严重下降 • 2012年出现在肺移植手术的名单上 • 每月进行痰培养：鉴定为非发酵革兰阴性杆菌 铜绿假单胞菌 vs 洋葱伯克霍尔德菌

⑤徐州号料太手 病例2：快速鉴定提升抗菌药物合理使用 Smith先生67岁，主动脉瘤术后合并并发症 在ICU病房机械通气持续5周 。 出现发热，脓性气管分泌物 ·可疑呼吸机相关肺炎 血培养和痰培养有革兰阴性杆菌和真菌生长 产气肠杆菌Vs肺炎克雷 伯菌 白假丝酵母菌Vs光滑假 丝酵母菌

病例2: 快速鉴定提升抗菌药物合理使用 • Smith先生 67岁，主动脉瘤术后合并并发症 • 在ICU病房机械通气持续5周 • 出现发热，脓性气管分泌物 • 可疑呼吸机相关肺炎 • 血培养和痰培养有革兰阴性杆菌和真菌生长 产气肠杆菌vs肺炎克雷 伯菌 白假丝酵母菌vs光滑假 丝酵母菌

可偷州号科太手 一、微生物质谱技术的原理

一、微生物质谱技术的原理

MALDI-TOF:基质辅助激光 解吸/电离-飞行时间质谱分析法(MS) BIOMERIEUX VITEK Microflex -

MALDI-TOF: 基质辅助激光 解吸/电离-飞行时间质谱分析法 (MS) VITEK MS Microflex

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MALDI-TOF MS概述 (Matrix Assisted Laser Desorption/lonization Time of Flight 检测 离子检测器 分离 飞行时间 加速 加速场 离子化 解吸附 基质样本结晶 靶板

MALDI-TOF MS 概述 (Matrix Assisted Laser Desorption/Ionization Time of Flight ) 解吸附 离子化 加速 分离 检测 离子检测器 + + + + + + 靶板 基质/样本结晶 加速场 飞行时间

⑤盒州号热太 MALDI-TOF质谱分析法 分析2,000到20,000道尔顿蛋白 品8品 检测150-200个质量峰 Streptococcus 品 20-30个蛋白与数据库中的理论 器器 Escherichia coli 。 核糖体蛋白直接匹配 Pseudomonas 32 其他质量峰为未知蛋白（有可能是 4000 600 10000 12000 修饰后的核糖体蛋白)

MALDI-TOF 质谱分析法 • 分析2,000 到20,000 道尔顿蛋白 • 检测150-200个质量峰 • 20-30 个蛋白与数据库中的理论 核糖体蛋白直接匹配 • 其他质量峰为未知蛋白 (有可能是 修饰后的核糖体蛋白)