重庆医科大学：《分子与细胞》课程教学课件（实验讲稿）DNA、RNA的原位显示及细胞膜通透性的观察

重废警科大学 严谨龙实勤奋进取 CHONGOING MEDICAL UNIVERSITY DNA、RNA的原位显示及细胞膜通透性的观察 重庆医科大学基础医学院 程志

DNA、RNA的原位显示及细胞膜通透性的观察 重庆医科大学 基础医学院 程志

主要内容 一、 实验目的 二、实验原理 三、实验步骤 四、注意事项

主要内容 一、实验目的 二、实验原理 三、实验步骤 四、注意事项

实验目的 p掌握细胞内DNA、RNA原位显示的实验技术 p掌握细胞膜选择通透性观察的实验方法

p 掌握细胞内DNA、RNA原位显示的实验技术 p 掌握细胞膜选择通透性观察的实验方法 实验目的

DNA、RNA的原位显示

DNA、RNA的原位显示

实验原理 pDNA和RNA因聚合程度的不同，可被甲基绿一哌洛宁混合染 液染成不同的颜色，DNA聚合程度高，被甲基绿染成蓝绿色； RNA聚合程度低，被哌洛宁染成红色

p DNA和RNA因聚合程度的不同，可被甲基绿—哌洛宁混合染 液染成不同的颜色，DNA聚合程度高，被甲基绿染成蓝绿色； RNA聚合程度低，被哌洛宁染成红色。 实验原理

实验步骤 、 p采用脑组织捣毁法处死牛蛙： 1.将牛蛙头部抬起，其背部皮肤会形成V形皱褶，V形皱褶中心的皮肤 下方为枕骨大孔。 2.将探针以与牛蛙背部成一个较小的角度向前插入脑部，探针尖部左右 摆动，捣毁脑组织。 3.将探针退出，但不要抽离皮肤，仍保持在枕骨大孔位置，再向后插入 脊髓腔中捣毁脊髓

p 采用脑组织捣毁法处死牛蛙： 1. 将牛蛙头部抬起，其背部皮肤会形成 V 形皱褶，V 形皱褶中心的皮肤 下方为枕骨大孔。 2. 将探针以与牛蛙背部成一个较小的角度向前插入脑部，探针尖部左右 摆动，捣毁脑组织。 3. 将探针退出，但不要抽离皮肤，仍保持在枕骨大孔位置，再向后插入 脊髓腔中捣毁脊髓。 实验步骤

实验步骤 p取牛蛙心脏血制备血涂片，每位同学制备一片，要求血膜均匀而 薄，充分晾干。 30°451 血涂片的制备流程

p 取牛蛙心脏血制备血涂片，每位同学制备一片，要求血膜均匀而 薄，充分晾干。 实验步骤 血 涂 片 的 制 备 流 程

实验步骤 p固定：70%酒精固定5分钟。 p染色：玻片晾干后，甲基绿-派洛宁混合染液染色15分钟。 p冲洗：细水冲标本片几秒钟。 p镜检：玻片晾干后，用低、高倍镜观察

p 固定：70%酒精固定5分钟。 p 染色：玻片晾干后，甲基绿-派洛宁混合染液染色15分钟。 p 冲洗：细水冲标本片几秒钟。 p 镜检：玻片晾干后，用低、高倍镜观察。 实验步骤

RNA DNA

RNA DNA

注意事项 p在使用实验动物时，要按照实验动物伦理要求操作，尊重生命、 敬畏生命。 p处死牛蛙时，要正确找到枕骨大孔。 p血涂片制作过程中，要使血膜较薄，使血细胞尽量分散，便于观 察

p 在使用实验动物时，要按照实验动物伦理要求操作，尊重生命、 敬畏生命。 p 处死牛蛙时，要正确找到枕骨大孔。 p 血涂片制作过程中，要使血膜较薄，使血细胞尽量分散，便于观 察。 注意事项