南京农业大学：《生物化学 Biochemistry》课程教学资源（PPT课件）第十三章 DNA、RNA、核酸（13.1）DNA的生物合成

第一节艺%的物合成

第一节 DNA的生物合成

DNA的复制 复制部位 真核生物:细胞核 原核生物:细胞质的核质区

一. DNA的复制 复制部位： 真核生物：细胞核 原核生物：细胞质的核质区

()复制的反应 DNA的复制 nd atP n2dCTP(DNA聚合酶 d GtP DNA模板DNA+(n +n2+n3+n4)PPi nd ttp PPi随即被焦磷酸酶水解,从 而推动聚合反应的进行

(一) 复制的反应 n1d ATP n2d CTP n3d GTP n4d TTP DNA聚合酶 DNA模板 DNA +（n1 +n2 +n3 +n4 )PPi PPi随即被焦磷酸酶水解，从 而推动聚合反应的进行。 一. DNA的复制

(二)复制的方式 DNA的复制 半保留复制 DNA复制时,亲代DNA的双螺旋先解旋并分开 然后以毎条链为模板,按照碱基配对原则,各 形成一条互补链。这样,从亲代的一个DNA双螺 旋分子复制成两个与亲代的碱基序列完全相同的 子代DNA分子。每个子代DNA分子中,有一条链 来自亲代DNA,另一条则是新形成的,这样的复 制方式叫做半保留复制( semiconservative replication

(二) 复制的方式 DNA复制时，亲代DNA的双螺旋先解旋并分开 ，然后以每条链为模板，按照碱基配对原则，各 形成一条互补链。这样，从亲代的一个DNA双螺 旋分子复制成两个与亲代的碱基序列完全相同的 子代DNA分子。每个子代DNA分子中，有一条链 来自亲代DNA，另一条则是新形成的，这样的复 制 方 式 叫 做 半 保 留 复 制 （ semiconservative replication）。 半保留复制 一. DNA的复制

(二)复制的方式 DNA的复制 半保留复制 Conservative (b) Semiconservative 8 After one After two generationIs

半保留复制 ( 二) 复制的方式 一. DNA的复制

(二)复制的方式 DNA的复制 如何证明半保留复制 1958年, Meselson证明:用,15NH4C唯一氮源 培养大肠杆菌,之后,用14NH4C培养,然后进行 cscl2进行密度梯度离心。由于15NH4C密度大于 14NH4c,因此,形成不同区带,经过若干代培养 后,两个14NH4C区带增多

如何证明半保留复制 (二) 复制的方式 一. DNA的复制 1958年，Meselson 证明：用，15NH4Cl唯一氮源 培养大肠杆菌，之后，用14NH4Cl培养，然后进行 CsCl2进行密度梯度离心。由于15NH4Cl密度大于 14NH4Cl，因此，形成不同区带，经过若干代培养 后，两个14NH4Cl区带增多

sCl梯度 亲代15N-DNA I5N-DNA (a) Heavy (重) DNA (ON Original parent AN N-DNA 14N, 5N-DNA (中等) brid dna b)(15N-141 F一“NDNA First-generation daughter molecules 14N, 5N-DNA i 1 14N-DNA (轻) IN, I5N-DNA (中等) DNA O 14 (c) Hybrid DNA Second-generation daughter molecules

(二)复制的方式 DNA的复制 CsCl梯度 亲代N-DNA I5N-DNA IN-DNA (重 N-DNA AN N-DNA E DNA N,N-DNA ISN-DNA‖N-DNA (中等) IN-DNA 1,111 IN, SN-DNAI 1 H IN-DNA -IN-DNA (轻) IN, ISN-DNA 一1N-DNA (中等) 半保留复制 全保留复制

(二) 复制的方式 一.DNA的复制 半保留复制 全保留复制

(三)复制反应注意点 DNA的复制 DNA复制除入DNA聚合酶,DNA模板 dNTP外还需要多种蛋白质因子、引物 Mg2等 特点: A对利福平不敏感 B核糖核酸代替脱氧核糖核酸

(三) 复制反应注意点 DNA复制除入DNA聚合酶, DNA模板, dNTP外,还需要多种蛋白质因子、引物 、Mg2+等. 一. DNA的复制 特点： A 对利福平不敏感 B 核糖核酸代替脱氧核糖核酸

(四)参与复制的酶和蛋白质 DNA的复制 1.DNA聚合酶 DNA polymease) 催化活性 DNA聚合酶5→3·3-55→3 功能 聚合核酸外切核酸外切 DNA聚合 切去引物RNA,补 原酶I 上正确的DNA片段 核DNA聚合 生酶工 与修复有关(活性低) 物DNA聚合 负责链的延长 酶Ⅲ (活性高)

DNA聚合酶 催化活性 5'→3' 功 能 聚合 3'→5' 核酸外切 5'→3' 核酸外切 原 核 生 物 DNA聚合 酶Ⅰ ＋ ＋ ＋ 切去引物RNA，补 上正确的DNA片段 DNA聚合 酶Ⅱ ＋ ＋ 与修复有关(活性低) DNA聚合 酶Ⅲ ＋ ＋ 负责链的延长 (活性高) (四)参与复制的酶和蛋白质 一.DNA的复制 1. DNA聚合酶(DNA polymease)