延安大学：《生物化学 Biochemistry》精品课程教学资源（课件讲稿）第二十一章 DNA重组及重组DNA技术 Recombination and Recombinant DNA technology

第二十一章 DNA重组和重组DNA技DNA Recombination and recombinant dNA technology

目录 DNA重组和重组DNA技DNA Recombination and Recombinant DNA technology 第二十一章

●DNA重组( DNA recombination)是指不同 DNA分子断裂和连接而产生DNA片段的交换 并重新组合形成新DNA分子的过程。 ●重组DNA技术( recombinant dna technology)是指在体外将两个或两个以 上DNA分子重新组合并在适当细胞中增殖 形成新DNA分子的过程

目录 DNA重组（DNA recombination）是指不同 DNA分子断裂和连接而产生DNA片段的交换 并重新组合形成新DNA分子的过程。 重 组 DNA 技 术 （ recombinant DNA technology）是指在体外将两个或两个以 上DNA分子重新组合并在适当细胞中增殖 形成新DNA分子的过程

第一节 自然界DNA重组和基因转移 DNA Recombination and Gene Transfer in Nature

目录 第一节 自然界DNA重组和基因转移 DNA Recombination and Gene Transfer in Nature

DNA重组 同源重组( homologous recombination) 位点特异的重组(site- specific recombination) 转座重组 transposition recombination 接合作用( conjugation 转化作用( transformation) 转导作用( transduction)

目录 DNA重组 同源重组 (homologous recombination) 位点特异的重组(site-specific recombination) 转座重组(transposition recombination) 接合作用 (conjugation) 转化作用 (transformation) 转导作用 (transduction)

、同源重组是最基本的DNA重组方式 发生在同源序列间的重组称为同源重组 homologous recombination),又称基本重组 ( general recombination)。是最基本的 DNA重组方式,通过链的断裂和再连接,在 两个DNA分子同源序列间进行单链或双链片 段的交换 以Eco的同源重组为例,了解同源重组机制 的 Holliday模型

目录  发生 在 同 源 序 列 间 的 重 组 称 为 同 源 重 组 (homologous recombination)，又称基本重组 （ general recombination ） 。 是 最 基 本 的 DNA重组方式，通过链的断裂和再连接，在 两个DNA分子同源序列间进行单链或双链片 段的交换。  以E.coli的同源重组为例，了解同源重组机制 的Holliday模型 一、同源重组是最基本的DNA重组方式

Holliday模型的4个关键步骤: 两个同源染色体DNA排列整齐 一个DNA的一条链断裂、并与另一个DNA 对应的链连接,形成 Holliday中间体; 通过分支移动产生异源双链DNA; Holliday中间体切开并修复,形成两个双链 重组体DNA,分别为: 片段重组体( patch recombinant) 拼接重组体( splice recombinant)

目录  Holliday模型的4个关键步骤：  两个同源染色体DNA排列整齐； 片段重组体(patch recombinant) 拼接重组体(splice recombinant)  一个DNA的一条链断裂、并与另一个DNA 对应的链连接，形成Holliday中间体；  通过分支移动产生异源双链DNA；  Holliday中间体切开并修复，形成两个双链 重组体DNA，分别为：

片段重组体(见模型图左边产物): 切开的链与原来断裂的是同一条链,重组 体含有一段异源双链区,其两侧来自同一亲 本DNA。 拼接重组体(见模型图右边产物): 切开的链并非原来断裂的链,重组体异源双 链区的两侧来自不同亲本DNA

目录  片段重组体 （见模型图左边产物）： 切开的链与原来断裂的是同一条链，重组 体含有一段异源双链区，其两侧来自同一亲 本DNA。  拼接重组体（见模型图右边产物）： 切开的链并非原来断裂的链，重组体异源双 链区的两侧来自不同亲本DNA

3 5335 5内切酶 533 355 3(recbCD) 5 3 DNA侵扰 (recA) 5335 5′分支迁移 (recA) 5335 内切酶 (recBCD) 3 DNA 5333 连接酶 5335 3553 Holliday中间体

内切酶 (recBCD) DNA侵扰 (recA) 分支迁移 (recA) 内切酶 (recBCD) DNA 连接酶 5´ 3´ 5´ 3´ 5´ 3´ 3´ 5´ 5´ 3´ 5´ 3´ 3´ 5´ 3´ 5´ 5´ 3´ 5´ 3´ 3´ 5´ 3´ 5´ 5´3´ 5´ 3´ 3´ 3´ 3´ 5´ 3´ 5´ 5´ 3´ 5´ 3´ 3´ 5´ 3´ 5´ Holliday中间体 5´ 3´ 5´ 3´ 3´ 5´ 3´ 5´

335 3553 5 Holliday中间体 3 内切酶 内切酶 3 ruvC) (ruvC) 5 5 DNA DNA 连接酶 连接酶 片段重组体 拼接重组体 3

Holliday中间体 5´ 3´ 5´ 3´ 3´ 5´ 3´ 5´ 5´ 5´ 3´ 5´ 5´ 3´ 3´ 3´ 3´ 5´ 5´ 5´ 5´ 3´ 3´ 3´ 3´ 5´ 5´ 5´ 5´ 3´ 3´ 3´ 5´ 5´ 5´ 5´ 3´ 3´ 3´ 3´ 5´ 5´ 5´ 5´ 3´ 3´ 3´ 3´ 内切酶 内切酶 (ruvC) (ruvC) DNA 连接酶 DNA 片 连接酶 段 重 组 体 拼 接 重 组 体

位点特异重组是发生在特异位点 间的DNA整合 位点特异重组 (site-specific recombination) 是由整合酶催化,在两个DNA序列的特异 位点间发生的整合

目录 二、位点特异重组是发生在特异位点 间的DNA整合  位点特异重组(site-specific recombination) 是由整合酶催化，在两个DNA序列的特异 位点间发生的整合