石河子大学：《仪器分析》课程PPT教学课件（医学检验）荧光分析法简述（主讲：赵芳）

黄光今并法简述 7化学四 苏世烟 03081124

荧光分析法简述 化学四班 苏世烟 03081124

在我的的在分析课本中提到分子光谱法有 吸光光度法 荧光法 是分折云呢 拉曼光谱法

在我的的在分析课本中提到分子光谱法有 吸光光度法 荧光法 拉曼光谱法

某些物质经紫外线照射后，能立即放 出能量较低（亦即波长较长）的光。 当照射停止后，如化合物的发射在 10-9秒钟内停止，则称荧光 超过此限度即称为磷光

某些物质经紫外线照射后，能立即放 出能量较低（亦即波长较长）的光。 当照射停止后，如化合物的发射在 10-9秒钟内停止，则称荧光 超过此限度即称为磷光

荧光的波长与被照射物质有关。 以紫外线作激发光源，所发射的 荧光常在可见光区。 测量荧光强度以确定物质含量的方法 叫做荧光分析法， 所使用的仪器叫荧光计

荧光的波长与被照射物质有关。 以紫外线作激发光源，所发射的 荧光常在可见光区。 测量荧光强度以确定物质含量的方法 叫做荧光分析法， 所使用的仪器叫荧光计

一原理 设1为荧光强度； l入射紫外线强度； 1为透过溶液后紫外线强度； la为溶液吸收紫外线； C为溶液中被测物质的浓度； 为溶液层的厚度

一.原理 ▪ 设IF为荧光强度； ▪ I0入射紫外线强度； ▪ I t为透过溶液后紫外线强度； ▪ Ia为溶液吸收紫外线； ▪ C为溶液中被测物质的浓度； ▪ l为溶液层的厚度

c 被溶液吸收的紫外线强度为： la=lo-lt 据朗伯-比尔定律 =108cl I. 代入上式得： 1。=1-1o×10=11-10)=11-e2ed) 经数学推导，当浓 度很小时：823ed=1+(-2.38cl) .1。=1o1-(1-2.38cl]=2.31oscl

被溶液吸收的紫外线强度为： Ia=I0 -I t 据朗伯-比尔定律 代入上式得： 经数学推导，当浓 度很小时： cl t I I  10 0 = lc t I I  10 0 = lc t I I  10 0 = lc t I I  10 0 = ( ) ( ) cl cl cl a I I I I I     2.3 0 0 10 0 1 10 0 1 − − − = −  = − = − ( ) I I  ( cl) I cl cl a cl      0 0 2.3 1 1 2.3 2.3 1 2.3  = − − = = + − −

荧光强度F与物质吸收紫外线的强度 成正比 Ip KI=2.318cl 当紫外线的强度一定，溶液的厚度一定， 对同一物质而言2.3KI0为常数，以A表 示，故：lF=AC 这说明浓度与荧光强度成正比，这 就是荧光定量分析的理论基础

荧光强度IF与物质吸收紫外线的强度 成正比 I KI I cl F = a = 2.3 0  当紫外线的强度一定，溶液的厚度一定， 对同一物质而言 2.3 KI0ξl为常数，以A表 示,故:IF=AC 这说明浓度与荧光强度成正比，这 就是荧光定量分析的理论基础

所以只要测出样品溶液的荧光强度 和标准溶液的荧光强度，就可按正 比关系计算样品溶液的浓度。 Cx为样品溶液浓度 I Fx Cs为标准溶液浓度 lFx为样品溶液荧光 强度； lFs为标准溶液荧光 强度

所以只要测出样品溶液的荧光强度 和标准溶液的荧光强度，就可按正 比关系计算样品溶液的浓度。 CX为样品溶液浓度 CS为标准溶液浓度 IFX为样品溶液荧光 强度； IFS为标准溶液荧光 强度 S F F X C I I C S = X 

二.荧光计 荧光分析中有两种光线：紫外线和 荧光，故 在比色计中光源、比色杯和光电源 三者排列成一条直线 在荧光计中三者需排成三角形，通 常呈直角三角形，如下图所示

二．荧光计 荧光分析中有两种光线：紫外线和 荧光,故: 在比色计中光源、比色杯和光电源 三者排列成一条直线 在荧光计中三者需排成三角形，通 常呈直角三角形，如下图所示

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