石河子大学：《仪器分析》课程PPT教学课件（医学检验）紫外可见分光光度法（ultraviolet and visible spectrophotometry，UV-Vis）

紫外一可见分光光度法(UV- Vis) (ultraviolet and visible spectrophotometry) 2024-9-11 石河子大学化学化工学院

2024-9-11 石河子大学化学化工学院 1 紫外—可见分光光度法(UV￾Vis) (ultraviolet and visible spectrophotometry)

第一节 概述 紫外-可见分光光度法： 紫外一可见分光光度法是利用某些物质的分 子吸收200-800nm光谱区的辐射来进行分析测定 的方法。 吸收光谱产生的原因： 过程：运动的分子外层电子 吸收外来外来辐 射 -一产生电子能级跃迁 -分子吸收谱。 应用范围：无机和有机物质的定性和定量测定。 2024-9-11 石河子大学化学化工学院 2

2024-9-11 石河子大学化学化工学院 2 紫外-可见分光光度法： 紫外—可见分光光度法是利用某些物质的分 子吸收200-800nm光谱区的辐射来进行分析测定 的方法。 吸收光谱产生的原因： 过程：运动的分子外层电子-吸收外来外来辐 射-产生电子能级跃迁-分子吸收谱。 第一节 概 述

■物质对光的选择性吸收 ■ 光的基本性质 光是一种电磁波，根据波长和或频率的 大小分为x射线、可见、红外、微波和 无线电波。 紫外：200-400nm(近紫外200-400，远紫 外100-200) ■可见：400-750nm 2024-9-11 石河子大学化学化工学院

2024-9-11 石河子大学化学化工学院 3 n 物质对光的选择性吸收 n 光的基本性质 n 光是一种电磁波，根据波长和或频率的 大小分为x射线、可见、红外、微波和 无线电波。 n 紫外：200-400nm(近紫外200-400,远紫 外100-200) n 可见：400-750nm

不同颜色的可见光波长及其互补光 颜色 2(nm) 互补光 紫光 400-450 黄绿 兰 450-480 黄 绿兰 480-490 橙 兰绿 490-500 红 绿 500-560 红紫 黄绿 560-580 紫 黄 580-610 兰 红 650-760 兰绿 2024-9-11 石河子大学化学化工学院 4

2024-9-11 石河子大学化学化工学院 4 不同颜色的可见光波长及其互补光 颜色 λ（nm） 互补光 紫光 400-450 黄绿 兰 450-480 黄 绿兰 480-490 橙 兰绿 490-500 红 绿 500-560 红紫 黄绿 560-580 紫 黄 580-610 兰 红 650-760 兰绿

紫 红 蓝 白光 黄 青蓝 绿 青 2024-9-11 石河子大学化学化工学院 5

2024-9-11 石河子大学化学化工学院 5 n n n n n

第二节 光吸收的基本定律 透光率（透射比） (Transmittance) T= Io 吸光度(Absorbance) 作1gI/I=1g(1/) =-1gT Kbc T =10-Kbc=104 2024-9-11 石河子大学化学化工学院 6

2024-9-11 石河子大学化学化工学院 6 透光率(透射比）（Transmittance） 0 I T = I 吸光度（Absorbance） A=lg I0/It =lg(1/T) =-lgT = Kbc = 1 0 = 1 0 -K b c -A T I0 It 第二节 光吸收的基本定律

1、光吸收基本定律：朗伯-比尔定律 朗伯定律：(1760) =1g(I/)=kb 意义： 当入射光的入，吸光物质的c和溶液的 T一定时，溶液的吸光度A与液层厚度b成 正比. 2024-9-11 石河子大学化学化工学院

2024-9-11 石河子大学化学化工学院 7 1、光吸收基本定律:朗伯-比尔定律 朗伯定律:(1760) A=lg(I0/It)=k1b 意义: 当入射光的λ,吸光物质的c和溶液的 T一定时,溶液的吸光度A与液层厚度b成 正比

比尔定律1852) A=1g (Io/I)=k2c 意义： 当入射光的入，液层厚度b和溶液的T 一 定时，溶液的吸光度A与吸光物质的C成 正比 2024-9-11 石河子大学化学化工学院 8

2024-9-11 石河子大学化学化工学院 8 比尔定律(1852) A=lg(I0/It)=k2c 意义: 当入射光的λ,液层厚度b和溶液的T 一定时,溶液的吸光度A与吸光物质的c成 正比

朗伯-比尔定律 A=1g(Io/I)=kbc 意义： 当一束平行单色光垂直通过均匀、非散射的 溶液时，其吸光度与溶液的浓度和液层厚度的 乘积成正比. 2024-9-11 石河子大学化学化工学院

2024-9-11 石河子大学化学化工学院 9 朗伯-比尔定律 A=lg(I0/It)=kbc 意义: 当一束平行单色光垂直通过均匀、非散射的 溶液时，其吸光度与溶液的浓度和液层厚度的 乘积成正比

1968年IUPAC规定用4个量A,T,K,b 最常用的形式：A=Kbc K=A/bc 吸光系数的物理意义： 当吸光物质浓度为1mo1L1,液池厚1cm时，一定 波长的光通过溶液时的吸光度值。 K是物质本性决定的，表示灵敏度。 2024-9-11 石河子大学化学化工学院 10

2024-9-11 石河子大学化学化工学院 10 1968年IUPAC规定用4个量 A,T,K,b 最常用的形式： A＝Kbc K＝ A/bc 吸光系数的物理意义： 当吸光物质浓度为1mol·L -1 ,液池厚1cm时，一定 波长的光通过溶液时的吸光度值。 K是物质本性决定的，表示灵敏度