《微生物生理学》课程实验指导技术（共六个实验）

微生物实验技术（下） 关国华陈文峰

微生物实验技术（下） 关国华 陈文峰

实验一、根瘤菌接种豆科植物甘草的实验 实验二、细胞含水量测定方法 实验三、细菌细胞蛋白质含量的测定 实验四、丝状真菌线粒体的提取及检测（上） 实验五、丝状真菌线粒体的提取及检测（下） 实验六、根瘤共生有效性的测定

实验一、根瘤菌接种豆科植物甘草的实验 实验二、细胞含水量测定方法 实验三、细菌细胞蛋白质含量的测定 实验四、丝状真菌线粒体的提取及检测 ( 上 ) 实验五、丝状真菌线粒体的提取及检测 ( 下 ) 实验六、根瘤共生有效性的测定

实验一、根瘤菌接种豆科植物甘草的实验 ↓ 培养1一2个月时间 实验六、根瘤共生有效性的测定

实验一、根瘤菌接种豆科植物甘草的实验 培养 1 － 2个月时间 实验六、根瘤共生有效性的测定

实验一、根瘤菌接种豆科植物甘草的实验 实验目的： 学会种子表面消毒技术 掌握严格无菌条件下的接种技术 掌握实验室内根瘤菌接种豆科植物的方法

实验一、根瘤菌接种豆科植物甘草的实验 实验目的： 学会种子表面消毒技术 掌握严格无菌条件下的接种技术 掌握实验室内根瘤菌接种豆科植物的方法

实验原理： 豆科植物的根部因根瘤菌的侵入形成根瘤，根瘤菌在根瘤中可以固 定空气中的氮气一方面作为自己的氮素营养，同时也提供给豆科植 物。豆科植物也为根瘤菌提供其生活所必需的碳水化合物，根瘤菌 与豆科植物之间的这种关系，称之为共生关系。 root hair infection hread bacteroid acuole m2e儿m bacteria nodule 1996 Enouclopaedia Britannica.Inc

豆科植物的根部因根瘤菌的侵入形成根瘤，根瘤菌在根瘤中可以固 定空气中的氮气一方面作为自己的氮素营养，同时也提供给豆科植 物。豆科植物也为根瘤菌提供其生活所必需的碳水化合物，根瘤菌 与豆科植物之间的这种关系，称之为共生关系。 实验原理：

实验原理： ■根瘤菌侵染豆科植物形成根瘤有专一性，即一定的根 瘤菌只能侵染一定的豆科植物，而对于其他豆科植 物，或者是侵染形成无效瘤（假瘤）；或者不能侵 沈 oot hair infection bacteroid vacuole bacteria nodule 1996 Encyclopaedia Britannica,Inc

„根瘤菌侵染豆科植物形成根瘤有专一性，即一定的根 瘤菌只能侵染一定的豆科植物，而对于其他豆科植 物，或者是侵染形成无效瘤（假瘤）；或者不能侵 染。 实验原理：

实验原理： 豆科植物的种子表面有许多微生物，可能 也有根瘤菌存在，而要保证供试根瘤菌能入 侵供试的豆科植物，必须进行种子的表面消 毒，然后再接种根瘤菌。 有的种子种皮较厚，不易发芽，因此还需 对种子进行处理，如硫酸处理软化种皮，然 后再进行消毒、种子发芽，接种根瘤菌等工 作

„豆科植物的种子表面有许多微生物，可能 也有根瘤菌存在，而要保证供试根瘤菌能入 侵供试的豆科植物，必须进行种子的表面消 毒，然后再接种根瘤菌。 实验原理： „有的种子种皮较厚，不易发芽，因此还需 对种子进行处理，如硫酸处理软化种皮，然 后再进行消毒、种子发芽，接种根瘤菌等工 作

实验材料： 甘草种子、根瘤菌 浓硫酸、0.2%升汞、无菌水、20倍低氮营 养液、TY液体培养基 镊子、剪刀等 装有蛭石的瓶子

甘草种子、根瘤菌 实验材料： 装有蛭石的瓶子 浓硫酸、0.2%升汞、无菌水、20倍低氮营 养液、TY液体培养基 镊子、剪刀等

实验方法及过程： 1.甘草种子用98%浓硫酸处理3-4个小时，水洗 2.0.2%升汞消毒甘草种子2-3分钟 3.无菌水冲洗甘草种子7-8次 4.种子植入蛭石中，深1.5一2cm,每瓶种5颗 左右种子，每人一个瓶子。记录自己名字。 5.培养3天左右，使甘草出苗 6.根瘤菌菌剂的扩大培养，培养3天 7.接种根瘤菌菌剂，对照不接种根瘤菌 8.温室中培养植物40一60天

1.甘草种子用98%浓硫酸处理3-4个小时，水洗 实验方法及过程： 7. 接种根瘤菌菌剂，对照不接种根瘤菌 4. 种子植入蛭石中，深1.5－2cm，每瓶种5颗 左右种子，每人一个瓶子。记录自己名字。 2. 0.2%升汞消毒甘草种子2-3分钟 3. 无菌水冲洗甘草种子7-8次 5. 培养3天左右，使甘草出苗 8. 温室中培养植物40－60天 6. 根瘤菌菌剂的扩大培养，培养3天

作业： 1、甘草种子为什么要进行硫酸和升 汞处理？ 2、为什么要对甘草种子处理后再接 种根瘤菌？根瘤菌对豆科植物的主 要作用是什么？ 3、查文献讨论田间如何对豆科植物 接种根瘤菌？

作业： 1、甘草种子为什么要进行硫酸和升 汞处理？ 2、为什么要对甘草种子处理后再接 种根瘤菌？根瘤菌对豆科植物的主 要作用是什么？ 3、查文献讨论田间如何对豆科植物 接种根瘤菌？