绍兴文理学院生命科学学院：《细胞生物学 Cell Biology》课程教学资源（实验PPT讲稿）实验三 线粒体和液泡系的超活染色与观察

实验三 线粒体和液泡系的超活染 色与观察 Dr.Tian 2002

实验三 线粒体和液泡系的超活染 色与观察

一、实验目的 ·1·观察动植物活细胞内线粒体、液泡系的 形态、发育和分布； ·2.了解细胞和细胞器的超活染色技术 Dr.Tian 2002

一、实验目的 • 1 ．观察动植物活细胞内线粒体、液泡系的 形态、发育和分布； • 2 ．了解细胞和细胞器的超活染色技术

二、实殓原理 ·詹纳斯绿B可专一性地对对线粒体进行活染，这是 由于线粒体内的细胞色素氧化酶系的作用，使染 料始终保持氧化状态（即有色状态），呈蓝绿色。 中性红对液泡系的染色具有专一性，将活细胞中 的液泡系染成红色。 Dr.Tian 2002

二、实验原理 • 詹纳斯绿Ｂ可专一性地对对线粒体进行活染,这是 由于线粒体内的细胞色素氧化酶系的作用，使染 料始终保持氧化状态(即有色状态),呈蓝绿色。 • 中性红对液泡系的染色具有专一性，将活细胞中 的液泡系染成红色

三、实验用品 。1.器材： ·显微镜、恒温水浴锅、、剪刀、镊子、解剖刀、 载玻片、盖玻片、吸管、牙签、吸水纸 。2.试剂： 。Ringer液、1/5000詹纳斯绿B、1/3000中性红 。3.材料：人口腔上皮细胞、洋葱鳞茎内表皮细 胞、绿豆幼根根尖 Dr.Tian 2002

三、实验用品 • 1 ．器材： • 显微镜、恒温水浴锅、、剪刀、镊子、解剖刀、 载玻片、盖玻片、吸管、牙签、吸水纸 • 2 ．试剂： • Ringer液、1/5000詹纳斯绿Ｂ、1/3000中性红 • 3 ．材料：人口腔上皮细胞、洋葱鳞茎内表皮细 胞、绿豆幼根根尖

四、实验方法 (一)线粒体的超活染色与观察 1.口腔上皮细胞线粒体的超活染色 1/5000詹纳斯绿B1-2滴，口腔上皮细胞（牙签刮取）， 载玻片于37℃恒温染色10-15min,显微镜下观察. ·2.洋葱鳞茎内表皮细胞线粒体的超活染色与观察 1/5000詹纳斯绿B溶液1-2滴，洋葱鳞茎内表皮，载玻片 于37℃恒温水浴染色10-15min,显微镜下观察. (二)绿豆幼根根尖液泡系的中性红染色观察 初生绿豆幼苗根尖(1一2cm)纵切面切片，1/3000中 性红溶液1滴染色5-10mim,载玻片于37℃恒温水浴，盖 上盖玻片压扁根尖，显微镜下观察 Dr.Tian 2002

四、实验方法 • （一）线粒体的超活染色与观察 • 1 ．口腔上皮细胞线粒体的超活染色 • 1/5000詹纳斯绿Ｂ1-2滴，口腔上皮细胞（牙签刮取）， 载玻片于３７℃恒温染色10-15min，显微镜下观察． • 2 ．洋葱鳞茎内表皮细胞线粒体的超活染色与观察 • 1/5000詹纳斯绿Ｂ溶液１-2滴，洋葱鳞茎内表皮，载玻片 于37℃恒温水浴染色10-15min，显微镜下观察． • （二） 绿豆幼根根尖液泡系的中性红染色观察 • 初生绿豆幼苗根尖（１－２cm）纵切面切片，1/3000中 性红溶液１滴染色5-10min，载玻片于37℃恒温水浴，盖 上盖玻片压扁根尖，显微镜下观察．

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五、作业 ·1,会出人口腔上皮细胞示线粒体的形态与 分布并简要分析。 ·2.绘出绿豆幼根根尖组织液泡系的形态与 分布并简要分析。 Dr.Tian 2002

五、作业 • 1 ．绘出人口腔上皮细胞示线粒体的形态与 分布并简要分析。 • 2 ．绘出绿豆幼根根尖组织液泡系的形态与 分布并简要分析