绍兴文理学院生命科学学院：《细胞生物学 Cell Biology》课程教学资源（PPT课件讲稿）第二章 实验技术 METHODS AND TECHNIQUES

© http://www.cella.cn 第二章 细胞生物学实验技术 METHODS AND TECHNIQUES Dr Tian 2008

http://www.cella.cn 第二章 细胞生物学实验技术 METHODS AND TECHNIQUES

本章内容提要 ·第一节显微技术 ，一、光学显微镜 二、电子显微镜 三、显微操作技术 第二节生物化学与分子生物学技术 ·第三节细胞分离技术 第四节细胞培养与细胞杂交 D7a%2008

本章内容提要 • 第一节 显微技术 • 一、光学显微镜 • 二、电子显微镜 • 三、显微操作技术 • 第二节 生物化学与分子生物学技术 • 第三节 细胞分离技术 • 第四节 细胞培养与细胞杂交

© http://www.cella.cn 第一节显微技术 光学显微镜与电子显微镜 D7e2008

http://www.cella.cn 第一节 显微技术 光学显微镜与电子显微镜

© http://www.cella.cn 一、光学显微镜 Dr Tian 2008

http://www.cella.cn —、光学显微镜

(一)普通光学显微镜 ·1.构成： ①照明系统 ②光学放大系统 ③机械装置 ·2.原理：经物镜形成倒立实像，经目镜放大成虚像。 Dr Tian 2008

（一）普通光学显微镜 • 1. 构成： • ①照明系统 • ②光学放大系统 • ③机械装置 • 2. 原理：经物镜形成倒立实像，经目镜放大成虚像

Structure of Microscope 胶片平面 照相机接口 取景器 光学传感器阵列 PL授影镜头 眼点位置 物镜 载物台运动控制旋钮 同轴粗微调旋钮 聚光器 视场光阑调节环 集光镜 漫射镜 灯室聚光镜 卤素灯 D7ae2008

Structure of Microscope

eye eyepiece (ocular) Light Pathway of Microscope objective specimen condenser light wm☐ source /1111 Dr Tian 2008

Light Pathway of Microscope

·3.分辨力：指分辨物体最小间隔的能力。 光学显微镜的分辨力R=0.61入/N.A. -其中λ为入射光线波长； -N.A.为镜口率=n sina/2; -n=介质折射率： -α=镜口角（样品对物镜镜口的张角） Dr 7ian 2008

• 3. 分辨力：指分辨物体最小间隔的能力。 • 光学显微镜的分辨力R=0.61λ/N．A． – 其中λ为入射光线波长； – N．A．为镜口率 ＝ｎsinα/2； – n=介质折射率； – α=镜口角（样品对物镜镜口的张角）

表一、几种介质的折射率 介质 空气 水 香柏油 a溴萘 折射率 1 1.33 1.515 1.66 Dr Tian 2008

表一、几种介质的折射率 介质 空气 水 香柏油 α 溴萘 折射率 1 1.33 1.515 1.66

显微镜的几个光学特点： -介质折射率越接近镜头玻璃的(1.7)越好； -sina/2的最大值小于1；镜口率最大约1.6： 普通光线的波长为400700nm,光镜分辨力约 为0.2μm,人眼的分辨力为0.2mm,因此显微镜 的最大有效倍数为1000X。 Dr Tian 2008

• 显微镜的几个光学特点： – 介质折射率越接近镜头玻璃的（ 1. 7 ）越好； – sin α /2的最大值小于1；镜口率最大约1.6； – 普通光线的波长为400~700nm，光镜分辨力约 为0.2μm，人眼的分辨力为0.2mm，因此显微镜 的最大有效倍数为1000X